乙肝病毒血清學檢驗中化學發光免疫分析技術酶聯免疫吸附試驗價值分析

劉洪源

（廊坊市第三人民醫院 河北省廊坊市 060000）

乙型肝炎發病與乙肝病毒有關，是較為常見的病毒性肝炎，若沒有及時治療易引發肝硬化、肝癌、肝衰竭等，嚴重者威脅生命[1]。乙型肝炎診斷常采用血清學檢測，是判斷療效和預后的有效指標，為了進一步研究CLIA 和ELIAS 兩種方法的臨床效果，特選取我院100 例疑似患者進行研究，具體報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2018 年2 月至2019 年2 月我院收治的100 例疑似乙型肝炎患者作為研究對象，均有乙型肝炎患者接觸史，診斷符合《病毒性肝炎防治方案》的標準[2]，就診時由皮膚黃染、下肢水腫、肝區疼痛、全身乏力、食欲不振等癥狀。其中男性60 例，女性40 例，年齡25-70歲，平均（45.36±10.02）歲。此次試驗得到醫院倫理委員會批準，患者均知情同意并簽署知情同意書，自愿配合檢查。

1.2 方法

清晨留取空腹靜脈血10ml，離心（3000r/min）10min，取上層血清待檢，采用CLIS 和ELISA 兩種檢測方法進行乙肝病毒血清學指標檢測。

ELISA 試劑室溫放置30min，微孔反應條中加入待測血清樣本，封片，37℃水浴60min，取出去除液體后洗滌5 次，反應條加入試劑后封鎖，37℃水浴30min，取出加終止液。

CLIA 檢驗將待測血清樣本加入聚苯乙烯試管中（已包被HBV核心抗原），標記（100μL 辣根過氧化物酶），37℃放置2h，PBS 緩沖液沖洗3 次（3min/次），加0.1mol/L 氫氧化鉀100μL 和30mol/L 魯米諾100μL，室溫靜置10min，加3%過氧化氫100μL，發光儀測定。參照結果為熒光定量PCR（Roche LC480 實時熒光分析儀）檢測結果，配套試劑，操作嚴格遵循說明書。

1.3 觀察指標

比較CLIS 和ELISA 兩種方法陽性檢出率。ELISA 陽性：測得血清值≥臨界值（2×標準差+陰性樣品平均A 值）。CLIA 陽性：如HbsAg、HBeAg COI≥1.0。正常參考值上限：HbsAg 為0.2ng/mL、HBeAg 為 10.0mU /mL、HbeAb 為 0.05NCU/mL、HbsAb 為2.0NCU/mL、HbcAb 為1.5NCU/mL。

1.4 統計學方法

采用SPSS 17.0 統計學軟件進行統計分析，正態計量數據用“”表示，組間比較采用t 檢驗，樣本率的比較采用X2檢驗；以P＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 比較兩種檢測方法陽性檢出率

CLIA 法HBsAg、HBeAg、HBeAb 陽性檢出率明顯高于ELISA法，差異有統計學意義（P＜0.05），兩種檢測方法HBsAb、HBcAb 陽性率差異無統計學意義（P＞0.05）。詳細情況見表1。

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2.2 兩種檢測方式準確率

CLIA 法準確率95.00%（95 例）明顯高于ELISA 法91.00%（91例），差異有統計學意義（P＜0.05）。雙倍血清稀釋（參比血清定值HBsAg 1.0ng/mL）顯示ELISA 檢測最低濃度0.5ng/mL，CLIS 檢測最低濃度為0.1ng/mL。

3 討論

乙型肝炎主要由乙肝病毒感染導致的，體內長期潛伏乙肝病毒被激活發展為乙型肝炎，特點為發病率較高、病情遷延不愈、反復發作。CLIA 是準確性較高的化學發光檢測技術，標記物來源豐富且不易受突變抗體的影響，能夠避免人為因素的干擾，可識別逃逸變異株，具有操作簡單、準確率高、線性寬等特點，能夠彌補ELISA 定性檢測方法的不足。

通過試驗得出結果：CLIA 法HBsAg、HBeAg、HbeAb 陽性檢出率明顯高于ELISA 法，差異有統計學意義（P＜0.05），兩種檢測方法HBsAb、HbcAb 陽性率差異無統計學意義（P＞0.05）。雙倍血清稀釋（參比血清定值HBsAg 1.0ng/mL） 顯示ELISA 檢測最低濃度0.5ng/mL，CLIS 檢測最低濃度為0.1ng/mL。此次試驗得出的結果與程育春等人在《中國實用醫藥》中發表的《化學發光免疫分析技術和酶聯免疫吸附試驗在乙肝病毒血清學檢驗中的應用》結論相一致，針對乙肝病毒血清標志物的檢驗，CLIA 和ELISA 都能夠準確診斷，但CLIA 相較于ELISA 具有更高的準確性，診斷價值相對較高，能夠在乙肝發病初期發現，為治療、病情控制提供重要參考依據。ELISA 成本相對低廉，基層醫院應用廣泛，CLIA 成本較高，在基層醫院的普及需要進一步發展。

綜上所述，在乙肝病毒血清學檢驗中ELISA、CLIA 兩種檢測方法的診斷效果均較好，CLIA 準確性更高，有助于準確判斷病情，值得臨床大力推廣使用。