迷走神經(jīng)刺激對(duì)腦缺血再灌注大鼠磷酸腺苷活化蛋白激酶-沉默信息調(diào)節(jié)因子2相關(guān)酶1自噬通路的影響

魏海萍，郭佳，王歡，葛朝明

蘭州大學(xué)第二醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，甘肅蘭州市 730030

腦卒中嚴(yán)重危害中老年人健康，但缺乏有效干預(yù)措施[1]。缺血半影區(qū)神經(jīng)元自噬是缺血性腦卒中發(fā)生、發(fā)展的重要病理生理機(jī)制[2]。腦缺血發(fā)生時(shí)存在自噬[3]，自噬可減輕缺血性腦卒中神經(jīng)損傷[4]，在腦缺血中發(fā)揮腦保護(hù)作用[5]，也可加重腦缺血損傷[6]。迷走神經(jīng)刺激(vagus nerve stimulation,VNS)已被廣泛應(yīng)用于治療各種疾病[7]，如改善抑郁小鼠癥狀[8]、癲癇、頭痛和阿爾茨海默病等[9-11]，姜黃素聯(lián)合VNS 可減輕腦缺血再灌注損傷引起的行為障礙[12]。

調(diào)控腺苷酸活化蛋白激酶(adenosine monophosphate activated protein kinase,AMPK)信號(hào)通路的自噬可改善認(rèn)知障礙[13]。硒代蛋氨酸通過(guò)AMPK 激活下游哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)，從而激活皮層神經(jīng)元自噬，改善阿爾茨海默病小鼠認(rèn)知功能[14]。AMPK 激活需要α 亞基蘇氨酸(Threonine)172 位點(diǎn)磷酸化，通過(guò)活化AMPK/mTOR/Unc-51 樣自噬活化激酶信號(hào)通路可激活自噬[15]。

沉默信息調(diào)節(jié)因子2 相關(guān)酶1 (silent mating type information regulation 2 homolog 1,Sirt1)是一種重要的去乙酰化酶，在神經(jīng)退行性疾病中保護(hù)神經(jīng)元[16]。Sirt1 能與微管相關(guān)蛋白1 輕鏈3 (microtubule-associated protein 1 light chain 3,LC3)相互作用，在自噬泡形成階段起重要作用。Sirt1 的活化可正向調(diào)節(jié)AMPK，AMPK-Sirt1通路與認(rèn)知障礙有關(guān)[17]。

本研究探討VNS在缺血性腦卒中大鼠缺血半影區(qū)細(xì)胞自噬中的作用及其分子機(jī)制。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及造模

成年雄性SPF 級(jí)Sprague-Dawley 大鼠56 只，由蘭州大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，分為正常組(n=14)、假手術(shù)組(n=14)、模型組(n=14)和VNS 組(n=14)。后兩組參照文獻(xiàn)[18-19]線栓法阻斷大腦中動(dòng)脈(middle cerebral artery occlusion,MCAO) 1 h 再 灌 注。VNS 組 在 血流阻斷0.5 h 時(shí)，行左側(cè)VNS(因左側(cè)迷走神經(jīng)發(fā)出支配心臟纖維少)，實(shí)驗(yàn)參數(shù)和操作參照文獻(xiàn)[20]。……