CRISPR-Cas9基因編輯技術用于腫瘤細胞模型的研究進展*

陳燕，劉芷兮 綜述，肖洪濤 審校

610041成都，四川省腫瘤醫院·研究所，四川省癌癥防治中心，電子科技大學醫學院 臨床藥學部(陳燕、劉芷兮、肖洪濤);610072成都，個體化藥物治療四川省重點實驗室(肖洪濤)

成簇的規律間隔的短回文重復序列(Clustered regularly interspaced short palindromic repeat，CRISPR)由一系列短的高度保守的正向重復序列與長度相似的間隔序列排列組成。相關核酸酶9(Cas9)基因編碼的蛋白質不僅具有與核酸結合的功能，還具有與核酸酶、聚合酶、解旋酶等酶結合的活性。基于CRISPR-Cas9系統的作用原理，研究人員通過體外人工合成引導RNA(guide RNA，gRNA)成功實現對特定基因片段的精確靶向與剪切，由此開創了一種由gRNA的指導、Cas9定位于特定的基因序列上對DNA雙鏈進行切割的新型基因編輯技術。該項技術與傳統的鋅指核酸酶(zincfinger nucleases，ZFNs)和轉錄激活樣因子效應物核酸酶(transcription activator-like effector nudeases,TALEN)基因編輯技術相比，具有編輯效率更高、操作步驟更簡單、價格更適宜以及編輯范圍更為廣泛等優勢。

腫瘤的發生與發展是一個由多基因參與的、不同信號通路相互調控與作用的復雜過程。同一基因在不同腫瘤、不同階段、不同患者中時常發揮著截然不同的生物信息學作用。過去腫瘤的基因組學研究多局限于全基因組關聯分析等觀察層面上，近年來隨著CRIPSR-Cas9基因編輯技術的深入研究，使得腫瘤治療從基因治療層面上取得了較多的應用成果。本文就CRISPR-Cas9基因編輯技術在構建腫瘤細胞模型研究與應用中的新進展進行綜述，旨在為腫瘤臨床前研究提供新的思路和策略。……