支氣管哮喘合并RSV感染患兒IgE、Th17、CD4+CD25+Treg評估病情效能

彭麗芳

支氣管哮喘（bronchial asthma，BA）為兒童較為多見的呼吸道系統相關疾病，患兒會出現反復咳嗽、喘息、胸悶以及氣促等癥狀，尤其在夜間或清晨期間發作會加劇，治療不及時會隨著疾病的病程延長而導致氣道產生不可逆性的縮窄以及氣道重塑[1-2]。呼吸道合胞病毒（respiratory syncytial virus，RSV）是具有包膜單股負鏈的RNA病毒，病毒一般呈現為絲狀或圓形，核衣殼螺旋具備對稱性且含RNA多聚酶，會導致患兒產生高熱、咽喉炎以及上呼吸道感染[1，3]。BA合并RSV感染患兒病情程度較為嚴重，同時會給患兒以及家屬巨大的精神壓力，影響患兒疾病預后以及生活質量[3]。有研究[4]表明，輔助性T細胞17（T helper cell 17，Th17）、CD4+CD25+調節性T細胞（regulatory cells，簡稱Tregs）對維持機體免疫平衡極為重要，檢測相關指標并采取對癥治療能顯著改善患兒癥狀，加快病情恢復。本研究檢測BA合并RSV感染患兒血清免疫球蛋白E（serum immunoglobulin E，IgE）、Th17、CD4+CD25+Treg水平，并分析其在病情評估中的效能，旨在為臨床治療BA合并RSV感染提供參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取本院2017年1月—2019年10月收治的BA合并RSV感染患兒80例設為研究對象，其中40例為疾病發作期定義為A組，40例病情緩解期定義為B組，選取同時期健康體檢兒童40例設為參照組，年齡3～10歲。納入標準：符合兒童BA合并RSV感染診斷標準[5]，近期未發生感染，無藥物過敏現象，無哮喘病史以及精神無障礙等。倫理委員會審批合格，患兒家屬知情同意。排除標準：治療前兩周內應用過糖皮質激素，呼吸系統外伴隨細菌感染，合并重大器官障礙，依從性差，急性發作期以及免疫缺乏等。A組男20例，女20例，平均（5.45±2.35）歲；B組男19例，女21例，平均（5.24±2.06）歲；參照組男21例，女19例，平均（5.68±2.17）歲。三組一般資料比較差異無統計學意義（P＞0.05）。

1.2 方法

操作嚴格遵從說明書。（1）所有實驗兒童清晨空腹采集3 mL外周靜脈血，放到具有肝素鈉的抗凝管里進行搖勻，用1 200 r/min進行5 min離心，低溫待檢。（2）選用試劑盒（北京衛戍區生物制品有限公司）實施免疫擴散法對IgE水平進行檢測。（3）選取美國BD公司的FacScan流式細胞儀對Th17、CD4+CD25+Treg水平進行檢測。（4）雙抗體夾心法對干擾素-α（IFN-α）指標水平進行測定，四色聯合流式液相蛋白定量法檢測患兒血清里白介素17（IL-17）以及白介素10（IL-10）水平。

1.3 觀察指標

比較三組兒童外周血IgE、Th17、 CD4+CD25+Treg水平以及炎性因子相關指標變化。

1.4 統計學方法

采用SPSS 20.0軟件來處理數據，計數資料用（n，%）表示，行χ2檢驗，計量資料用（）表示，行t檢驗；以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 外周血IgE、Th17 、 CD4+CD25+Treg水平比較

外周血IgE與Th17水平A組＞B組＞參照組，CD4+CD25+Treg水平A組＜B組＜參照組，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表1。

2.2 炎性因子相關指標比較

IL-17指標水平A組＞B組＞參照組，IFN-α與IL-10指標水平A組＜B組＜參照組，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表2。

表1 三組兒童外周血IgE、Th17 / CD4+CD25+Treg水平比較（）

表1 三組兒童外周血IgE、Th17 / CD4+CD25+Treg水平比較（）

注： 與 A 組 比 較，*P＜ 0.05； 與 B 組 比 較，#P＜ 0.05；A 組vs B 組：IgE（t=77.020，P＜ 0.001），Th17（t=11.873，P=0.000），CD4+CD25+Treg（t=10.143，P=0.000）；B 組vs參照組：IgE（t=107.780，P=0.000），Th17（t=4.749，P=0.000），CD4+CD25+Treg（t=7.106，P=0.000）；A 組vs參照組：IgE（t=97.334，P=0.000），Th17（t=16.623，P=0.000），CD4+CD25+Treg（t=17.249，P=0.000）

組別 例數 IgE（IU/mL） Th17（%） CD4+CD25+Treg（%）A 組 40 274.37±9.25 2.37±0.65 1.38±0.97 B 組 40 197.35±8.93* 1.12±0.43* 3.25±0.64*參照組 40 89.57±7.14*# 0.62±0.24*# 4.56±0.83*#F值 - 4780.652 146.617 150.293 P值 - 0.000 0.000 0.000

表2 三組兒童炎性因子相關指標水平比較（ng/L，）

表2 三組兒童炎性因子相關指標水平比較（ng/L，）

注：與A組比較，*P＜0.05；與B組比較，#P＜0.05；A組vs B組：IFN-α（t=4.377，P=0.000），IL-17（t=7.745，P=0.000），IL-10（t=2.425，P=0.000）；B 組vs參照組：IFN-α（t=4.739，P=0.000），IL-17（t=5.268，P=0.000），IL-10（t=2.940，P=0.000）；A 組vs參照組：IFN-α（t=9.115，P=0.000），IL-17（t=13.013，P=0.000），IL-10（t=5.365，P=0.000）

組別 例數 IFN-α IL-17 IL-10 A 組 40 12.87±2.24 97.38±30.24 20.97±4.52 B 組 40 17.95±7.56* 58.76±21.92* 23.84±6.53*參照組 40 23.45±4.32*# 32.49±9.85*# 27.32±4.58*#F值 - 41.565 85.690 14.437 P值 - 0.000 0.000 0.000

3 結論

BA發病率在國內較高，且其近年來發病以及病死率呈逐年增長趨勢，目前對其發病的機制還未完全清楚，大多數的專家學者覺得其同機體變態反應、氣道重構以及氣道高反應密切相關[6]。BA由嗜酸性粒細胞、T淋巴細胞以及中性粒細胞等參與氣道的慢性炎癥，該病同氣道的高反應性密切相關，患者一般會產生可逆性且廣泛多變的呼氣氣流受限，隨著時間增長而增強[7-8]。RSV能通過密切的接觸以及空氣飛沫進行傳播，其由8個編碼結構蛋白以及2個非結構的蛋白構成，屬于副黏液的病毒科，患兒患病初期會出現上呼吸道感染等癥狀，伴隨病情進展會出現支氣管炎或肺炎，少數患兒會產生胸膜炎、心肌炎以及中耳炎等并發癥[9-10]。

IgE為人體內五大免疫型球蛋白其中的一類，該球蛋白能促發并推進變態反應與氣道高反應，IgE通過在患兒氣道釋放相關細胞因子，導致患兒氣流受阻以及支氣管產生痙攣[6]。Tregs為一類對機體里自身免疫反應進行控制的T細胞亞群，分為誘導形成的適應性Treg以及天然形成的自然調節性CD4+CD25+Treg，同人體自身的免疫性疾病密切相關，當其產生異常表達時會導致機體自身出現免疫性的疾病[11-12]。CD4+CD25+Treg起源于人體的胸腺，發揮并抑制機體免疫調節，具備免疫抑制以及無能性的特征，其應用價值體現在人體自身的免疫性相關疾病治療、移植耐受的誘導與腫瘤免疫治療等方面[12]。Th17為輔助性T細胞亞群，主要對抗細胞外的霉菌與細菌，能分泌得到IL-17促炎癥因子，參與機體防御反應以及自身免疫調節[7，13]。本研究顯示，外周血IgE與Th17水平A組＞B組＞參照組，CD4+CD25+Treg水平A組＜B組＜參照組。提示外周血Th17、CD4+CD25+Treg以及IgE水平參與患兒BA合并RSV感染，從而導致相應的臨床癥狀產生，故在治療BA合并RSV感染患兒時需關注患兒病史，IgE與Th17水平是否異常增長，CD4+CD25+Treg水平是否異常減少，從而有效評估患兒病情效能，改善疾病預后。BA發病機制里T淋巴細胞主要影響Th1以及Th2細胞功能活動，Th1細胞參與機體氣道的上皮細胞炎癥反應，從而參與BA病理過程，Th1細胞能分泌生成干擾與抑制病毒復制的IFN-α；Th2細胞輔助人體內的淋巴細胞進行分化得到抗體分泌細胞并參與人體內的免疫應答，Th2細胞能分泌生成具備抗炎以及抗過敏作用的IL-10，IFN-α與IL-10含量能判斷患兒病情輕重[4，8]。有研究[13]表明，CD4+CD25+Treg水平能對Th1應答反應產生抑制，并促進Th2極化，Th1以及Th2失衡，導致BA發生。本研究顯示，IL-17指標水平A組＞B組＞參照組，IFN-α與IL-10指標水平A組＜B組<參照組。提示IL-17、IFN-α與IL-10指標水平參與BA合并RSV感染的免疫學機制，檢測相關指標并進行調節能有效改善患兒病情。

綜上所述，BA合并RSV感染患兒IgE與Th17水平顯著增加，CD4+CD25+Treg水平明顯降低，評估相關指標變化能確定患兒病情效能，從而實施對癥治療，加速疾病康復。