miR-127-3p靶向MAPK4對肝癌HepG2細胞株生物學特性的影響①

張玉蓉 賈俊枝 徐國明 郭 紅

(內蒙古醫科大學附屬醫院日間病房，呼和浩特 010050)

肝癌是全球范圍內最常見的惡性腫瘤之一，每年約有63萬新肝癌病例產生[1]。在我國，肝癌患者約占總癌癥病例的50%，其五年存活率約為5%[2]。現階段，對肝癌患者多采用手術切除及放、化療進行治療，但多因再度復發及轉移而預后不良[3]。近年來肝癌發病率逐年遞增，探究肝癌生長及轉移相關的分子機制成為醫學領域研究熱點[4]。miR-127-3p是一類抑癌基因，研究表明，在骨肉瘤中，miR-127-3p可顯著抑制腫瘤細胞的增殖和侵襲[5]；在骨巨細胞瘤中，miR-127-3p可顯著抑制癌細胞集落形成及瘤體形成[6]。而目前在肝癌中還沒有關于miR-127-3p作用機制的報道。本研究通過上調miR-127-3p，對其在肝癌細胞HepG2中的作用及機制進行深入探索，為尋找肝癌的有效治療方法提供新思路。

1 材料與方法

1.1材料

1.1.1細胞株 人正常肝細胞HL-7702、肝癌細胞HepG2購自美國ATCC公司。

1.1.2實驗動物 SPF級BALB/c雄性裸鼠20只，鼠齡5～6周，體質量20～22 g，購自上海斯萊克實驗動物有限責任公司[SCXK(滬)2017-0005]，飼養于內蒙古醫科大學新藥安全評價研究中心[SYXK(蒙)2014-0003]，晝夜12 h交替，經過滅菌處理的水和飼料自由攝取。本實驗經內蒙古醫科大學醫學倫理委員會審批(IACUC 2014045)，實驗操作遵循3R原則。

1.1.3主要試劑與儀器 DMEM高糖基本培養液(11965-092)、Transwell小室購自美國Corning公司(3379)，胎牛血清FBS購自美國Gibco公司(10100154)，青鏈霉素購自北京索萊寶科技有限公司(P1400)，Trizol購自美國Invitrogen公司(15596026)，反轉錄試劑盒(4374967)、實時定量PCR試劑盒(10928042)、脂質體2000轉染試劑盒(11668019)、熒光素酶檢測試劑盒(16177)、pcDNA 3.1載體(V79020)購自美國Thermo fisher公司，RIPA裂解……