姜炭對大鼠纖溶系統(tǒng)影響的研究

嚴金娣

【摘? 要】目的：通過研究姜炭對纖溶系統(tǒng)影響，探討姜炭的止血機理;方法： 測定大鼠優(yōu)球蛋白溶解時間，考察姜炭對大鼠對纖溶系統(tǒng)的影響;結果：姜炭提取物能顯著延長優(yōu)球蛋白的溶解時間;結論：姜炭通過影響大鼠纖溶系統(tǒng)發(fā)揮止血的作用。

【關鍵詞】姜炭;止血;優(yōu)球蛋白

姜炭系由姜科植物姜[Zingiber Officinale Rosc. ]的干燥根莖，經(jīng)砂燙法炮制而得。味苦、澀，性溫;歸脾、肝經(jīng)，具有溫經(jīng)止血，溫中止痛的功效;常用于陽虛失血、吐衄崩漏、脾胃虛寒、腹痛吐瀉[1]等的治療。臨床上姜炭多用于虛寒性出血的治療。目前，有少數(shù)研究報道姜炭能顯著縮短小鼠的出血時間[2-3]，但卻沒有明確的提出姜炭的止血機理。本實驗以姜炭對優(yōu)球蛋白的溶解時間為指標，探討姜炭對大鼠纖溶系統(tǒng)的影響，闡明姜炭的止血機理。

1 實驗材料與儀器

1.1 藥材

干姜：購于廣東省廣州市藥材公司中藥飲片廠。

姜炭：按《中國藥典》（2010年一部）附錄藥材炮制通則項下炒炭法炮制而得。

大黃：購自大學城長洲藥店。

1.2 儀器

離心機（上海安亭科學儀器廠）、旋轉蒸發(fā)儀（上海亞榮生化儀器廠）、電熱恒溫水浴鍋（江蘇金壇宏華儀器廠）。

1.3 試劑

3.8%枸櫞酸鈉（9 ：1）、1%醋酸溶液、25mmol·L-1? CaCl2溶液、硼砂緩沖液（pH= 9.0）等。

1.4 動物

健康雄性SD大鼠（SPF級），重250±30 克， 購于廣東省醫(yī)學實驗動物中心，許可證號：SCXK（粵）2008-0002。

2 方法

2.1 供試藥品制備

干姜醇提液的制備：稱取干姜1000g，乙醇回流提取得到濃度為2g/mL的供試品溶液，灌胃劑量為1mL/100g。

姜炭醇提液的制備：稱取姜炭1000g，乙醇回流提取2次，得到濃度2g/mL的供試品溶液，灌胃劑量為1mL/100g。

大黃灌胃液的制備： 稱取大黃2500g，沸水煎煮2次濃縮得到一定濃度大黃液。

2.2 實驗動物分組

購買大鼠40只，適應性飼養(yǎng)一周后，按體重均勻分為四個組，即空白組、模型組、干姜組和姜炭組，每組10只。灌胃給予寒涼藥大黃以造成大鼠脾胃虛寒動物模型[4]：空白組每天用生理鹽水灌胃2次，連續(xù)10 天。模型組大鼠每晚灌大黃水煎液一次，連續(xù)10 天，并于第4、6、8日隔日從眼眶靜脈叢放血2ml，共3次。干姜/姜炭模型給藥組每晚灌大黃水煎液一次，連續(xù)10 天，并于第4、6、8日隔日從眼眶靜脈叢放血2ml，共3次，從第6天早上開始灌予干姜/姜炭醇提液，空白組灌服等劑量生理鹽水，連續(xù)5天。

2.3 優(yōu)球蛋白溶解時間測定

造模成功后1h，大鼠眼內眥球后靜脈叢取血加3.8%枸櫞酸鈉（9 ：1）抗凝后離心得貧血小板血漿（ platelet-poor plasma，PPP），取0.5mLPPP加入備有9mL 蒸餾水的錐形離心管中，再加入1%醋酸溶液0.1mL，充分混勻后冰箱內靜置，優(yōu)球蛋白呈絮狀沉淀析出后離心取沉淀，于37℃的溫度下，加0.5mL pH=9.0硼砂緩沖液將優(yōu)球蛋白全部溶解， 再加25mmol·L-1? CaCl2溶液0.5mL混勻，管內液體開始凝固（纖維蛋白凝塊形成）。待其凝固后，測定凝塊開始溶解到完全溶解的時間，即為優(yōu)球蛋白溶解時間（ELT）[5]。

3 結果

4 討論

纖維蛋白溶解系統(tǒng)（簡稱纖溶系統(tǒng)）的主要作用是清除止血后的血凝塊，即使不溶性的纖維蛋白多聚體分解、液化從新溶解，血管保持通暢。纖溶系統(tǒng)組成包括：纖溶酶原、纖溶酶、纖溶酶原激活物及纖溶抑制物[6-8]。

考察機體纖溶系統(tǒng)活性的指標之一就有測定優(yōu)球蛋白溶解時間。利用優(yōu)球蛋白與纖維蛋白和纖溶酶原的強親和力在酸性條件下一同沉淀下來，而沉淀中不含纖溶抑制物，排除纖溶抑制物對纖溶酶或纖溶酶原的抑制作用。測定優(yōu)球蛋白溶解時間，可以考察藥物對纖溶系統(tǒng)的影響。由實驗結果（見表1）可以看出，姜炭能顯著的延長大鼠優(yōu)球蛋白的溶解時間，說明姜炭能夠降低大鼠纖溶系統(tǒng)活性，血凝塊溶解時間加長，有利于止血。

參考文獻

[1] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典：2010年版一部[M].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010：14.

[2] 吳建華，馬耀茹.姜不同炮制品止血作用實驗研究[J].陜西中醫(yī)，2002， 23（5）：449-450.

[3] 薛興陽，孟江，盧國勇，等.姜炭止血有效部位的實驗研究[J].廣東藥學院報，2010，26（4）：387- 390.

[4] 陳小野，周永生，樊雅莉，等.大鼠虛寒證模型的研制[J].中國實驗動物學報，2001，9（3）：155- 159.

[5] 張泉林，李茂星，張文娟，等.藏藥獨一味總環(huán)烯醚萜對纖溶系統(tǒng)的實驗研究[J].安徽醫(yī)藥，2011，15（12）：1475-1476.

[6] 郭青龍，李衛(wèi)東.人體解剖生理學[M].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2009：97-105.

[7] 王鴻利.止血與凝血機制研究進展[J].繼續(xù)醫(yī)學教育，2006，20（26）：13-19.

[8] 韓邦志，謝金鮮.中藥止血與凝血機制的研究進展[J].廣西中醫(yī)藥，2009，32（2）：6-8.