宮頸細胞DNA倍體分析在宮頸癌前篩查中的應用價值

閆怡　陳麗　陳建偉

[摘要] 目的 探討宮頸細胞DNA倍體分析在宮頸癌前篩查中的應用價值。 方法 選取2017年4月～2019年6月在我院進行宮頸癌前篩查的473例已婚婦女，均行宮頸細胞學檢查、HPV檢測、宮頸細胞DNA倍體分析及宮頸活檢組織病理檢測。分析宮頸細胞DNA倍體分析在宮頸癌前篩查中的診斷價值。 結果 473例入選者中，TCT≥ASCUS者94例，HPV（+）者102例，宮頸細胞DNA倍體分析結果陽性者85例，宮頸活檢組織病理檢測陽性者91例。宮頸細胞DNA倍體分析的符合率、敏感度及特異性均高于宮頸細胞學檢測、HPV檢測（P<0.05）。宮頸細胞學檢測的符合率、敏感度及特異性均高于HPV檢測（P<0.05）。宮頸細胞學與HPV雙陰性者宮頸細胞DNA倍體分析的符合率為99.67%，宮頸細胞學TCT≥ASCUS但HPV陰性者宮頸細胞DNA倍體分析的符合率為96.23%，差異無統計學意義（P>0.05）。對正常宮頸者和低度癌前病變者隨訪3個月，宮頸細胞DNA倍體分析的符合率高于宮頸細胞學檢測、HPV檢測（P<0.05）。宮頸細胞學檢測的符合率高于HPV檢測（P<0.05）。 結論 宮頸細胞DNA倍體分析在宮頸癌前篩查中與宮頸組織活檢具有較高的符合率，能在現有宮頸癌篩查方式的基礎上盡可能地提高準確率，減少漏診率，且敏感度及特異性均較高。

[關鍵詞] 宮頸細胞DNA倍體分析;宮頸癌前篩查;宮頸細胞學檢查;應用價值

[中圖分類號] R737.33? ? ? ? ? [文獻標識碼] B? ? ? ? ? [文章編號] 1673-9701（2020）11-0065-04

Application value of DNA ploidy analysis on cervical cells in cervical precancerous screening

YAN Yi1? ?CHEN Li1? ?CHEN Jianwei2

1.Department of Gynecology， Jiangjin District Central Hospital of Chongqing City， Chongqing? ?402260， China;2.Department of Pediatrics， Jiangjin District Central Hospital of Chongqing City， Chongqing? ?402260， China

[Abstract] Objective To investigate the application value of DNA ploidy analysis on cervical cells in cervical precancerous screening. Methods A total of 473 married women who were given cervical precancerous screening in our hospital from April 2017 to June 2019 were selected for cervical cytology， HPV testing， DNA ploidy analysis of cervical cells， and histopathological examination of cervical biopsy. The diagnostic value of cervical cell DNA ploidy analysis in cervical precancerous screening was analyzed. Results Among the 473 enrolled cases， 94 cases were TCT≥ASCUS， 102 cases were HPV（+）， 85 cases were positive for cervical cell DNA ploidy analysis， and 91 cases were positive for pathological examination of cervical biopsy. The coincidence rate， sensitivity， and specificity of cervical cell DNA ploidy analysis were higher than those in cervical cytology and HPV test （P<0.05）. The coincidence rate， sensitivity and specificity of cervical cytology were higher than those of HPV test（P<0.05）. The coincidence rate of cervical cytology and DNA ploidy analysis of cervical cells in HPV double negative patients was 99.67%. The coincidence rate of DNA ploidy analysis in cervical cytology with TCT≥ASCUS but HPV negative was 96.23%， and the difference was not statistically significant （P>0.05）. Patients with normal cervix and low precancerous lesions were followed up for 3 months. The coincidence rate of cervical cell DNA ploidy analysis was higher than that of cervical cytology and HPV test（P<0.05）. The coincidence rate of cervical cytology was higher than that of HPV test （P<0.05）. Conclusion The DNA ploidy analysis on cervical cells has a high coincidence rate with cervical biopsy in cervical precancerous screening， which can improve the accuracy rate and reduce the rate of missed diagnosis as much as possible based on the existing cervical cancer screening methods， and the sensitivity and specificity are high.

[Key words] DNA ploidy analysis on cervical cells; Cervical precancerous screening; Cervical cytology; Application value

宮頸癌是常見的婦科惡性腫瘤，高發年齡為50～55歲，宮頸癌前篩查能夠早期發現宮頸癌和癌前病變，對于宮頸癌的二級預防意義重大[1-2]。相關指南推薦宮頸細胞學檢查為首選，但受到基層醫院病理質量等條件限制，存在漏診率[3-4]。宮頸細胞學+HPV分流可減少漏診率，但費用較高，且對于HPV（-）但存在宮頸病變者的漏診風險增加。目前，國際上有將細胞DNA倍體分析用于宮頸癌的診斷，也用于判別宮頸癌惡性程度及宮頸疾病的發展狀態，但用于宮頸癌前篩查的相關研究較少，且宮頸癌前篩查未推薦細胞DNA倍體分析作為首選。研究顯示，DNA倍體異常細胞數量的變化與宮頸病變的程度有密切關系，細胞DNA倍體分析可能在節約經濟的前提下，降低宮頸癌前病變的漏診率，彌補目前篩查方式的不足[5-6]。本研究旨在進一步探討宮頸細胞DNA倍體分析在宮頸癌前篩查中的應用價值，現報道如下。

1 對象與方法

1.1 研究對象

選取2017年4月～2019年6月在我院進行宮頸癌前篩查的473例已婚婦女作為研究對象，年齡29～60歲，平均（42.35±3.61）歲。納入標準：①自愿行宮頸細胞學檢查、HPV檢測、宮頸細胞DNA倍體分析及宮頸活檢組織病理檢測的已婚女性;②知情同意本研究并簽署知情同意書者。排除標準：①妊娠期女性;②合并精神系統類疾病者;③不愿意參加本研究者。

1.2 方法

所有患者均行宮頸細胞學檢查、HPV檢測、宮頸細胞DNA倍體分析及宮頸活檢組織病理檢測，具體方法如下。

1.2.1 宮頸細胞學檢查? 采用薄層液基細胞學技術（TCT）進行檢查，采集標本前24 h內禁止性生活、陰道檢查、陰道灌洗及用藥，取標本的用具必須無菌、干燥;先將子宮頸表面分泌物拭凈，將細胞刷置于子宮頸管內，達子宮頸外口上方10 mm左右，在子宮頸管內旋轉數圈后取出，旋轉細胞刷將附著于小刷子上的標本洗脫于保存液中，將保存液瓶放入全自動細胞制備儀通過混勻、過濾轉移，然后均勻地貼附于玻片上，將玻片進行固定和染色，最后在顯微鏡下進行觀察和診斷。以TCT≥ASCUS為陽性診斷標準。

1.2.2 HPV檢測? 采用PCR檢測HPV-DNA，采集標本前注意事項及取樣方法同TCT，然后采用HPV核酸定量檢測試劑盒（美國羅氏分子診斷公司）進行檢測，檢測結果中出現任何一個亞型陽性即作為HPV陽性。

1.2.3 宮頸細胞DNA倍體分析? 采集標本前注意事項及取樣方法同TCT，將保存液以1500 r/min離心5 min，棄上清，將細胞懸液滴片、染色，經MotiSavant全自動細胞圖像分析系統（麥克奧迪醫療診斷系統有限公司生產）進行宮頸細胞DNA倍體分析。其判斷標準采用DNA指數（DI），DI>2.5即為陽性。

1.2.4 宮頸活檢組織病理檢測? 所有入選者均進行陰道鏡檢查，并對可疑部位進行活檢，病理結果以宮頸上皮內瘤變低級別病變（CIN Ⅰ）及以上為陽性標準。

1.3 觀察指標

①分析宮頸細胞DNA倍體分析、宮頸細胞學、HPV檢測與宮頸活檢組織病理的符合率、敏感度及特異性。②觀察宮頸細胞學及HPV雙陰性或細胞學不能明確意義的非典型鱗狀細胞（ASCUS）但HPV陰性患者中，宮頸細胞DNA倍體分析與陰道鏡下宮頸組織活檢的符合率。③對正常宮頸及低度癌前病變者進行隨訪3個月，并再次進行宮頸細胞學、HPV檢測及宮頸細胞DNA倍體分析，比較宮頸細胞DNA倍體分析與宮頸細胞學、HPV檢測的符合率。其中符合率=（真陽性+真陰性）例數/總例數×100%，敏感度=真陽性例數/（真陽性例數+假陰性例數）×100%，特異性=真陰性例數/（真陰性例數+假陽性例數）×100%

1.4 統計學方法

采用SPSS25.0統計學軟件處理數據，計量資料以均數±標準差（x±s）表示，采用t檢驗;計數資料以率（%）表示，采用χ2檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 宮頸細胞學檢測、HPV檢測、宮頸細胞DNA倍體分析及宮頸活檢組織病理檢測結果分析

473例入選者中，TCT≥ASCUS者94例，HPV（+）者102例，宮頸細胞DNA倍體分析結果陽性者85例，宮頸活檢組織病理檢測陽性者91例。見表1。

2.2宮頸細胞學檢測、HPV檢測、宮頸細胞DNA倍體分析與宮頸活檢組織病理符合率、敏感度及特異性的比較

宮頸細胞DNA倍體分析的符合率、敏感度及特異性均高于宮頸細胞學檢測、HPV檢測，差異有統計學意義（P<0.05）。宮頸細胞學檢測的符合率、敏感度及特異性均高于HPV檢測，差異有統計學意義（P<0.05）。見表2。

2.3 宮頸細胞學與HPV雙陰性及宮頸細胞學TCT≥ASCUS但HPV陰性患者宮頸細胞DNA倍體分析和陰道鏡下宮頸組織活檢符合率的比較

473例入選者中，宮頸細胞學與HPV雙陰性者308例，TCT≥ASCUS但HPV陰性者53例。宮頸細胞學與HPV雙陰性者宮頸細胞DNA倍體分析的符合率為99.67%（307/308），宮頸細胞學TCT≥ASCUS但HPV陰性者宮頸細胞DNA倍體分析的符合率為96.23%（51/53），兩者比較差異無統計學意義（P>0.05）。見表3。

2.4 正常宮頸及低度癌前病變患者3個月后宮頸細胞DNA倍體分析及與宮頸細胞學、HPV檢測符合率的比較

473例入選者中，對382例正常宮頸者及91例低度癌前病變者進行為期3個月的隨訪，宮頸細胞學檢測的符合率為94.93%（449/473），HPV檢測的符合率為80.97%（383/473），宮頸細胞DNA倍體分析的符合率為98.94%（468/473）。宮頸細胞DNA倍體分析的符合率高于宮頸細胞學檢測、HPV檢測，差異有統計學意義（P<0.05）。宮頸細胞學檢測的符合率高于HPV檢測，差異有統計學意義（P<0.05）。見表4。

3 討論

宮頸癌是最常見的女性惡性腫瘤，占發展中國家女性惡性腫瘤的第一位，我國每年新增宮頸癌病例約13.5萬，占全球發病數量的1/3，近年來其發病有年輕化的趨勢[7-8]。宮頸癌是目前唯一確定病因的癌癥——高危HPV的持續感染，慢性感染、性傳播疾病、吸煙等為協同因素[9-10]。宮頸癌早期癌變局限于皮膚或黏膜內，還未通過皮膚或黏膜下面的基底膜侵犯到周圍組織，如果發現早、治療及時，則可治愈[11-12]。宮頸癌早期無明顯癥狀和體征，常因子宮頸外觀正常易漏診或誤診，因此，早期進行宮頸癌前篩查非常重要。

宮頸癌前篩查的根本目的是降低宮頸癌的發病率和死亡率，最佳的篩選方案應該是能夠鑒別出可能發展為浸潤癌的宮頸癌前體，避免過度治療[13]。目前，臨床中常用的篩查方法包括宮頸細胞學檢測、HPV檢測及宮頸組織活檢，宮頸細胞學檢測是宮頸癌前篩查的常用方法，但是假陰性較高[14];HPV檢測的敏感度較高，但是特異性較低[15];宮頸組織活檢為宮頸癌及癌前病變確診的依據，但是其為有創性檢查手段[16]。宮頸細胞DNA倍體分析是在TCT的基礎上進行改進的檢測方法，其采用Schiffy試劑對DNA進行特異性染色，通過DNA圖像分析儀進行觀察分析[17]。研究顯示，宮頸細胞DNA倍體分析在宮頸癌前篩查中具有一定的價值[18]。

本研究結果顯示，宮頸細胞DNA倍體分析的符合率、敏感度及特異性均高于宮頸細胞學檢測、HPV檢測，差異有統計學意義（P<0.05），提示宮頸細胞DNA倍體分析在宮頸癌前篩查中與宮頸組織活檢具有較高的符合率，且敏感度及特異性均較高;宮頸細胞學與HPV雙陰性者宮頸細胞DNA倍體分析的符合率為99.67%（307/308），宮頸細胞學TCT≥ASCUS但HPV陰性者宮頸細胞DNA倍體分析的符合率為96.23%（51/53），兩者比較差異無統計學意義（P>0.05），提示宮頸細胞DNA倍體分析可以作為宮頸組織活檢的參考指標;隨訪3個月，宮頸細胞DNA倍體分析的符合率高于宮頸細胞學檢測、HPV檢測，差異有統計學意義（P<0.05），提示宮頸細胞DNA倍體分析可以作為篩查宮頸癌前病變發展的一個有價值的指標。

綜上所述，宮頸細胞DNA倍體分析在宮頸癌前篩查中與宮頸組織活檢具有較高的符合率，能在現有宮頸癌篩查方式（宮頸細胞學檢查或HPV檢測）的基礎上盡可能地提高準確率，減少漏診率，且敏感度及特異性均較高，值得臨床推廣應用。

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（收稿日期：2019-12-27）