肥胖與超敏C反應蛋白、肝功能指標以及氨基酸水平的相關性研究*

舒 楊，張春燕，程昱璇，桑培培，蔣 濤，朱永闌，崔佳奕，檀旭東，史文杰，張民杰，田亞平

(中國人民解放軍總醫院轉化醫學實驗室，北京 100853)

肥胖患者體內脂肪堆積過多和(或)分布異常，通常伴有體質量增加。如果脂肪主要在腹壁和腹腔內蓄積過多，被稱為“中心性”或“向心性”肥胖，是多種慢性病的最重要危險因素之一。肥胖會對身體許多組織的功能產生不利影響，包括胰腺、肝臟、骨骼肌、心臟、關節和中樞神經系統。臨床上脂肪組織的積累會導致2型糖尿病(T2DM)、高血壓、高膽固醇血癥、動脈粥樣硬化、非酒精性脂肪肝疾病、膽囊疾病及某些癌癥的風險，關節炎和阿爾茨海默病的發展。雖然很可能有多種分子機制將肥胖與其并發癥聯系起來，但炎癥是一種常見的機制。

近年來的研究提示，血清C反應蛋白(CRP)水平與肥胖密切相關。CRP作為急性時相反應的一項靈敏指標，血漿CRP水平在炎性反應時迅速升高[1-2]。目前超敏C反應蛋白(hs-CRP)廣泛應用于感染狀況以及炎性反應[3]，hs-CRP水平的測定比CRP更加靈敏。肥胖導致的代謝不平衡增加了慢性肝病的風險，丙氨酸氨基轉移酶(ALT)、天門冬氨酸氨基轉移酶(AST)和γ-谷氨酰轉移酶(GGT)是判斷肝臟損傷的標志物。血液中的氨基酸水平反映了機體組織蛋白代謝和能量代謝的情況，因此本研究探討肥胖與hs-CRP、肝功能指標以及氨基酸水平的相關性。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取本院體檢人員145例，自愿填寫樣本采集表，按照體質量指數(BMI)分組分為體質量正常組和肥胖組，其中正常組78例，平均年齡(43.4±1.6)歲；肥胖組67例，平均年齡(44.4±1.5)歲，兩組年齡差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2方法

1.2.1生化指標監測 根據研究者的身高、體質量計算BMI；按照采集手冊相關要求規范采集靜息狀態下體檢者靜脈血2 mL，3 000 r/min離心10 min分離血清(不含溶血，脂血標本)待測。應用羅氏cobas6000及配套羅氏試劑和質控品檢測血漿hs-CRP、ALT、AST、清蛋白(ALB)、GGT水平，按要求進行質量控制。

1.2.2氨基酸檢測 串聯質譜(MS/MS)分析用直徑為3.2 mm的打孔器進行干血斑的打孔，置于96孔過濾板中，加入配制好的氨基酸和肉堿的內標工作液100 μL，用封膜套覆蓋過濾板，并確保密封良好，然后將96孔板放入振蕩孵育器內，45 ℃孵育45 min，轉速為650～750 r/min，振蕩完畢后，靜置5～10 min，將板中液體轉移80 μL至V型耐熱板中，靜置2 h后，上機檢測。

1.3納入標準

1.3.1BMI具體計算方法是BMI=體質量/身高2(kg/m2)。中國肥胖問題工作組織(WGOC)建議BMI<18.5 kg/m2為低體質量；18.5 kg/m2≤BMI≤23.9 kg/m2為正常體質量；23.9 kg/m2≤BMI≤27.9 kg/m2；BMI>27.9 kg/m2為體質量超重為肥胖[4]。

1.3.2生化指標正常范圍 hs-CRP：0.0～0.8 mg/dL、ALT：0.0～40.0 U/L、AST：0.0～40.0 U/L、ALB:35.0～50.0 g/L、GGT:0.0～50.0 U/L。

1.3.3氨基酸正常范圍 ALA：135.0～573.0 μmol/L、亮氨酸(LEU+ILE+PRO-OH):71.0～307.0 μmol/L、苯丙氨酸(PHE):25.0～84.0 μmol/L、酪氨酸(TYR):35.0～262.0 μmol/L、纈氨酸(VAL):64.0～286.0 μmol/L。

2 結 果

2.1兩組BMI和hs-CRP水平比較 分別對正常組78例，肥胖組67例進行統計學分析，經分析得出： 肥胖組BMI值明顯高于正常組(21.70±0.16)kg/m2，差異有統計學意義(P<0.01)；肥胖組hs-CRP明顯高于正常組，差異有統計學意義(P<0.01)，且hs-CRP有增高的趨勢，見表1、圖1。

表1 肥胖組與正常組BMI、hs-CRP水平比較

圖1 正常組與肥胖組hs-CRP水平比較

表2 肥胖組與正常組肝功能指標比較

2.2正常組與肥胖組肝功能相關指標比較 分別對正常組78例，肥胖組67例進行分析，經分析得出：正常組的ALT水平為(19.30±1.50)U/L、AST(27.0±1.1)U/L、ALB(46.50±0.40)g/L、GGT(14.14±1.20)U/L；肥胖組的ALT水平為(44.20±5.60)U/L、AST(38.60±2.60)U/L、ALB(47.70±0.40)g/L、GGT(41.10±3.90)U/L，且差異均有統計學意義(P<0.05)，見表2、圖2。

2.3正常組與肥胖組氨基酸水平比較 經分析得出：正常組氨基酸水平ALA、LEU+ILE+PRO-OH、PHE、TYR、VAL與肥胖組氨基酸水平比較，差異均有統計學意義(P<0.000 1)，見表3、圖3。

圖2 正常組與肥胖組肝功能指標水平比較

表3 正常組與肥胖組氨基酸水平比較

圖3 正常組與肥胖組氨基酸指標水平比較

3 討 論

根據2015年《中國居民營養與慢性病狀況報告》調查結果顯示，我國18歲及以上成人超重率為30.10%，肥胖率為11.90%，6～17歲兒童青少年超重率為6.00%，肥胖率為6.40%。隨著居民生活水平的提高，肥胖逐漸發展成為影響人類身體健康的一個重要危險因素，并被視為慢性低度炎癥狀態，肥胖與2型糖尿病、心血管疾病、高血壓等疾病有關[5-6]。經研究發現,肥胖和各種代謝性疾病，以及心血管的發病率大部分重疊[7-8]，雖然近幾年心血管疾病的病死率有所降低，但是隨著肥胖及其并發癥患病率大大增加，有可能會破壞這一現象[9]。越來越多的肥胖相關疾病被認為是現代醫學的一項巨大挑戰。過度營養不良，特別是高脂肪和碳水化合物的攝入，缺乏運動和久坐不動的生活方式是體質量增加和肥胖的主要原因。

CRP是炎性因子，參與炎癥發展的過程，然而對于低水平的CRP，效果不佳，因此為了提高靈敏度與準確度，本研究探討肥胖與hs-CRP、肝功能指標以及氨基酸水平的相關性。

產生CRP是由細胞因子調節的，主要是白細胞介素-6(IL-6)，其影響通過其他細胞因子和生長因子修飾通過激素,如皮質醇和胰島素以及生產細胞因子和其他應激激素，可以在除了炎癥或損傷的其他條件來改變。已顯示來自肥胖人的脂肪細胞過量產生腫瘤壞死-α(TNF-α)。 TNF-α是各種細胞生產IL-6生產的有效誘導。這可以解釋為什么高體質量指數與CRP的血清水平增加有關。

hs-CRP是機體受到損傷或炎性反應刺激后在肝臟合成的一種非特異性標志物。有文獻報道體質量正常者血清hs-CRP水平遠遠低于肥胖患者[10]。在本次的研究中，肥胖組與正常組相比，hs-CRP水平明顯升高，因此也驗證了這一點，同時也反映出肥胖患者存在炎性反應狀態，提示hs-CRP水平升高是肥胖患者的重要相關因子[11]。除此以外，hs-CRP水平與體質量指數呈正相關關系，提示hs-CRP水平的升高與內臟脂肪含量的增多有關。

本研究發現，不僅hs-CRP水平升高，ALT、AST、ALB、GGT水平也升高，ALT、AST、GGT是常規用于檢測肝損傷最敏感的肝功能酶[12-15]，肥胖容易引起肝功能損傷。肝臟損傷分為非酒精性脂肪性肝病和酒精性脂肪性肝病。超過80.00%的非酒精性脂肪性肝病的患者為肥胖。ALT和AST活性正?；蛘咧卸壬?，AST/ALT<1，表明這兩種酶是脂肪肝的標志物。作為蛋白質合成器官，肝臟占循環蛋白質體積的85.00%～90.00%。ALB是這些分泌蛋白中水平最高的蛋白質，平均占血漿蛋白總量的55.00%。肥胖患者腹部脂肪細胞豐富，容易因刺激引起肝細胞損傷[16]。肥胖易引起脂肪肝、肝硬化等肝臟疾病[17]。受損傷的肝細胞細胞膜通透性發生改變，因此血清酶的改變可以反映出肝臟的狀態。肝臟是機體主要的代謝器官，尤其是脂代謝和糖代謝。肝臟以糖原形式儲存葡萄糖的能力，通過糖生成途徑進食和組裝葡萄糖，所以響應禁食是至關重要的。肝臟氧化脂質，但也可以包裹多余的脂質以分泌和儲存在其他組織中，例如脂肪。肝臟是蛋白質和氨基酸代謝的主要處理者，因為它負責血液中分泌的大部分蛋白質(無論是基于質量還是基于獨特蛋白質的范圍)，氨基酸處理能量，以及處理含氮廢物來自尿素代謝形式的蛋白質降解。碳水化合物和脂肪紊亂會導致肝臟胰島素抵抗。代謝失衡甚至會導致危及生命的情況。因此，維持肝臟的正常代謝功能至關重要。當肝臟處于病理狀態時，肝臟代謝穩態受到破壞，代謝紊亂會進一步加重肝臟疾病。因此，確定肝病與代謝紊亂之間的關系至關重要。

在人體內，氨基酸通過代謝可以發揮作用，比如：合成組織蛋白質；變成酸、激素、抗體、肌酸等含氨物質；轉變為碳水化合物和脂肪；氧化成二氧化碳和水及尿素，產生能量，因此，肥胖與代謝功能具有相關性。肥胖是由食物攝入和能量消耗之間的不平衡引起的，這導致脂肪組織的過度積累。脂肪組織現在不僅被認為是儲存來自食物攝入的過剩能量的主要部位，而且還被認為是內分泌器官。脂肪組織的擴張產生許多生物活性物質，稱為脂肪細胞因子或脂肪因子，它們引發慢性低度炎癥并與許多不同器官中的一系列過程相互作用。雖然確切的機制仍不清楚，由過量的脂肪組織和脂肪組織功能障礙引起的這些脂肪因子的失調的產生或分泌可能有助于肥胖相關的代謝疾病的發展。

20世紀60年代首次報道了肥胖患者中支鏈氨基酸水平升高，支鏈氨基酸包括：亮氨酸、異亮氨酸和纈氨酸，支鏈氨基酸不僅是構建肌肉組織的基本組成部分，而且參與了蛋白質的合成。支鏈氨基酸是人體必需氨基酸，必須從食物中獲得。支鏈氨基酸的水平升高，說明營養過剩，從而會導致肝功能損傷。

總之，本研究表明，肥胖與hs-CRP水平密切相關，同時肥胖患者對肝功能相關指標有影響。肥胖成為影響人體健康的重要隱患，其肥胖的根本原因就是攝入過多，運動少以及內分泌系統失調，為了防止肥胖的發生，應根據自身情況，攝入適當的蛋白質、脂肪、維生素等礦物質。多食用粗糧，例如：糙米、胚芽米等。不宜食用油炸食品。

4 結 論

hs-CRP水平升高是肥胖患者的重要相關因子，肥胖會引起肝臟損傷以及部分氨基酸代謝異常。改善飲食、多運動就可以有效降低肥胖的發生，進一步減少疾病的發生。