急性白血病患者MCP-1、CCR-2及凝血功能指標的檢測分析

何 玲,吳紅衛,譚大為

(1.成都醫學院第一附屬醫院血液科，四川成都 610503;2.貴州醫科大學附屬醫院血液科，貴州貴陽 550004)

急性白血病(AL)是一種常見的造血系統惡性腫瘤，其特點是骨髓中造血干細胞惡變，形成原始細胞及幼稚細胞克隆并抑制正常造血，臨床上表現為貧血、出血和發熱等，可侵襲肝、脾、淋巴結等多組織和器官，影響患者的生活質量和生命健康[1-2]。AL按細胞形態學、免疫學、細胞遺傳學及分子生物學(MICM)診斷分類通?？梢苑譃榧毙粤馨图毎籽?ALL)和急性髓細胞白血病(AML)兩大類[3-4]。目前，美國國立綜合癌癥網絡將AL的主要治療方案設定為聯合化療，調節體內免疫系統，使患者體內的腫瘤細胞發生凋亡，使患者生存期延長[5-7]。本研究通過聯合檢測AL患者血清單粒細胞趨勢化蛋白-1(MCP-1)、CC類趨化因子受體2(CCR-2)及凝血功能指標的變化，以探討其在AL患者中判斷病情、監測治療的作用。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2016年1月至2017年12月成都醫學院第一附屬醫院收治的AL患者100例和同期體檢健康者50例。AL患者的診斷和分型均符合2018《血液病診斷及療效標準第四版》，根據細胞形態學、免疫表型、細胞遺傳學及進行MICM分型[8]。AL患者分為ALL組64例和AML組36例。ALL組患者中男36例，女28例；平均發病年齡(40.36±10.39)歲；病程(1.65±0.84)年。AML患者男20例，女16例；平均(41.46±11.62)歲；平均病程(1.73±0.94)年。同時選取本院50例體檢健康者為對照組，男26例，女24例；平均(40.19±10.83)歲。本研究經本院倫理委員會批準，患者經家屬同意自愿簽署知情同意書。

1.2方法 治療標準：按照2017年版《中國成人急性髓系白血病(非急性早幼粒細胞白血病)診療指南》、2012年版《中國成人急性淋巴細胞白血病診斷與治療專家共識》標準、2014年版《中國急性早幼粒細胞白血病診療指南》[9-11]進行化療。

所有研究對象分別于入院當天及化療2個周期后，于清晨空腹采集6 mL靜脈血，常規分離血清、血漿，采用酶聯免疫吸附試驗(ELISA)法測定研究對象血清內MCP-1、CCR-2含量，試劑盒購于上?；鄯f生物科技有限公司；采用貝克曼庫爾特公司生產的ACL-TOP血凝儀檢測血漿纖維蛋白原(FIB)、血漿D-二聚體(D-D)、抗凝血酶(ATⅢ)、凝血酶原時間(PT)、凝血酶原時間國際標準化比值(PT-INR)、活化部分凝血活酶時間(APTT)、凝血酶時間(TT)表達，試劑盒購自上海晶抗生物工程有限公司。

2 結 果

2.1各組血液MCP-1、CCR-2含量表達 與對照組相比，ALL組和AML組MCP-1、CCR-2水平顯著升高，ALL組MCP-1、CCR-2水平升高更為明顯，差異有統計學意義(P<0.05)。與治療前相比，ALL組和AML組患者治療后體內MCP-1、CCR-2水平顯著降低，差異有統計學意義(P<0.05)。見表1。

表1 各組血液細胞因子含量表達

注：與對照組相比,*P<0.05；與ALL組治療前相比，#P<0.05；與ALL組治療后相比，△P<0.05。

2.2各組凝血功能指標檢測 與對照組相比，ALL組和AML組FIB、D-D、PT、APTT、TT顯著上升，ATⅢ顯著下降，差異具有統計學意義(P<0.05)。與治療前相比，ALL組和AML組患者化療后血漿FIB、D-D、PT、APTT、TT時間顯著降低，差異有統計學意義(P<0.05)，ATⅢ顯著延長，差異有統計學意義(P<0.05)，PT-INR沒有顯著改變，差異無統計學意義(P>0.05)，見表2～3。

2.3患者MCP-1、CCR-2和凝血功能與患者治療前后的相關性分析 相關性分析顯示白血病患者MCP-1、CCR-2、FIB、D-D、ATⅢ、PT、APTT、TT水平與白血病治療前后的相關系數分別為0.48、0.39、0.44、0.39、0.61、0.41、0.47、0.35，均呈正相關關系(P<0.05)，在治療后白血病患者MCP-1、CCR-2和凝血功能指標均得到了顯著的改善；PT-INR白血病治療前后的相關系數為-0.19，無顯著的相關性(P>0.05)。

表2 各組凝血功能指標水平表達

注：與對照組相比，*P<0.05；與ALL組治療前相比，#P<0.05；與ALL組治療后相比，△P<0.05。

表3 各組凝血功能指標水平表達

注：與對照組相比，*P<0.05；與ALL組治療前相比，#P<0.05；與ALL組治療后相比，△P<0.05。

3 討 論

AL是造血干細胞的惡性克隆性疾病，發病時白血病細胞出現增殖、分化及凋亡異常，并在骨髓中蓄積，對正常造血產生抑制作用，其病因目前尚未完全清楚，常伴有凝血功能的異常，包括血管內皮損傷，血小板功能異常、凝血、抗凝及纖溶激活而形成高凝或出血，是導致患者死亡的主要原因。MCP-1和CCR-2是MCP-1的特異度受體，可以不同程度地趨化單核細胞、嗜酸性粒細胞和嗜堿性粒細胞，在機體防御、慢性炎癥及抗腫瘤等方面有重要作用[12-13]。

本研究結果表明，ALL組和AML組患者體內MCP-1、CCR-2水平顯著升高，ALL組MCP-1、CCR-2水平升高更為明顯，差異有統計學意義(P<0.05)。ALL組和AML組患者治療后體內MCP-1、CCR-2水平顯著降低，差異有統計學意義(P<0.05)。MCP-1與CCR2受體結合后，引起細胞內PTX敏感的Ca2+內流增加、磷脂酶C及PI3K的激活；MCP-1還可以調控JNK1、p38及ERK活性,進而激活MAPK通路，趨化內皮定向細胞運動，誘導血管形成。MCP-1還能趨化TGF-β促進血管生成，即MCP-1有促腫瘤作用[13-14]。本研究中AL患者血清MCP-1水平異?？赡芘c機體炎性反應及免疫功能改變有關。AL患者體內出現血小板生成減少或功能異常，同時白血病細胞釋放促凝物質，均可加速血液凝固性形成高凝狀態或凝血功能異常。FIB是血漿中水平最高的凝血因子，其通過血小板聚集來加速血液凝固，增加促凝物質和減少抗凝物質，可參與調節體內的免疫活性和炎性反應，以及增加炎性介質的合成和分泌，FIG在體內成倍地升高，與血栓前狀態形成密切相關，決定血液是否凝固[15-16]，該指標水平的異?？赡芘c腫瘤細胞在細胞因子的作用下發生髓外浸潤有關。D-D是交聯纖維蛋白特異度的降解產物，主要可以體現血液高凝狀態及繼發性纖溶亢進。外源性、內源性凝血系統的主要生物學指標ATⅢ、PT、APTT、TT水平異常多見于內源性和外源性促凝物質活性減弱[17-18]。

本研究發現，AL患者體內FIB、D-D、ATⅢ、PT、APTT、TT顯著上升，說明AL患者體內存在出血、凝血異常，正常骨髓造血受到抑制，血小板不能有效發揮止血功能，凝血時間延長。與治療前相比，ALL組和AML組患者化療后血漿FIB、D-D、ATⅢ、PT、APTT、TT顯著延長，差異有統計學意義(P<0.05)，PT-INR水平沒有顯著改變，差異無統計學意義(P>0.05)，說明化療后隨著白血病細胞被殺滅，患者的腫瘤負荷減輕，故非感染患者的凝血功能逐漸恢復，減少炎癥介質合成和凝血因子的激活，體內凝血異常得到控制。

4 結 論

動態監測MCP-1、CCR-2及凝血功能指標變化有助于臨床預測、判斷AL患者的病情變化及評估治療效果，可作為病情的判斷及治療的參考指標。