吳 憲 徐 哲 偏麗麗 趙 敏 李 濤 張紀巖
(安徽醫科大學第一附屬醫院檢驗科,合肥 230022)
肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是最常見的惡性腫瘤之一,每年大約都會發現有超過五十萬名成人死于肝癌。盡管HCC的診斷和治療有一定進展,但由于耐藥和易于復發,HCC在很大程度上仍然無法治愈[1-3]。肝癌發生機制多種多樣,具體分子機制尚不完全清楚,其中炎癥是肝癌發生的關鍵因素[4]。此外,有研究證明,自分泌的IL-6會促進惡性腫瘤細胞生長[5,6]。現代醫學主要研究手術切除腫瘤、放化療、血管腫瘤介入綜合治療等手術方法,但治療效果并不理想,年平均生存率僅8%~10%[7,8]。因此研究人類肝癌早期發生及其發展的主要分子機制,對于不斷尋求新的肝癌治療療法等也有著深遠的現實意義。
Tripartite motif family-like 1(TRIML1)編碼一種與TRIM家族高度相似的蛋白,區別在于TRIML1缺少B-box域。TRIML1最初發現于小鼠胚胎中,在小鼠胚胎發育的兩個細胞胚胎到囊胚階段均有表達[9]。TRIML1可與USP5相互作用,而USP5可以促進肝癌的發生發展[10]。此外,有文獻報道,TRIM家族在許多類型的癌癥中發揮重要作用[11-13],其中TRIM11、TRIM31、TRIM52和TRIM59等可以促進肝癌細胞的發生發展[14-18];TRIM16,TRIM26和TRIM50等可以抑制肝癌的發生發展[19-21]。本團隊前期Huh7肝癌細胞基因芯片實驗結果表明,在Huh7細胞中有TRIML1的表達。由此,本次實驗將探究TRIML1在肝癌細胞中的作用。
1.1材料
1.1.1主要試劑及動物 胎牛血清,DMEM和F12購自美國HyClone公司;RIPA 蛋白裂解液和MTT細胞增殖分析試劑盒購自碧云天生物公司;LipofectamineTM2000轉染試劑盒購自美國Gibco 公司;LipofectamineTMRNA iMaX Reagent購自美國Invitrogen公司;TRIML1抗體購自美國Proteintech 公司;GFP抗體購自日本MBL公司;……