腦紋狀體內植入CREB基因修飾的BMSCs對帕金森大鼠學習記憶能力影響的實驗研究①

余 恒 宋光捷

(襄陽市中心醫院，湖北省文理學院附屬醫院北院區神經內科，襄陽 441003)

帕金森病(Parkinson′s disease，PD)是一種常見于中老年的神經系統變性疾病，以腦黑質紋狀體內多巴胺(dopamine，DA)使神經元發生變性缺失為主要病理特征[1]。近年來其發病率隨人口老齡化逐漸上升，每年患病率達15/10萬～328/10萬人口，對社會和經濟造成嚴重影響[2]。環磷酸腺苷反應元件結合蛋白(cyclic adenosine monophosphate response element binding protein，CREB)是一種調節基因轉錄的蛋白質，被蛋白激酶A(protein kinase A，PKA)、PKC等磷酸化后可參與調控機體學習記憶[3]。同時有研究證實骨髓間充質干細胞(bone marrow derived mesenchymal stem cells，BMSCs)可通過腦內移植改善PD大鼠靜止性震顫、動作遲緩等運動障礙癥狀[4]。研究顯示PD患者學習記憶障礙與p-CREB表達異常密切相關[5]。然而目前未見CREB基因對PD大鼠學習記憶能力影響的研究。因此本研究就腦紋狀體內植入CREB基因修飾BMSCs對PD模型大鼠學習記憶障礙的影響進行探討，現報告如下。

1 材料與方法

1.1材料

1.1.1實驗動物 健康雄性Wistar大鼠37只，SPF級，6周齡，體質量180～200 g，購于上海上藥第一生化藥業有限公司，生產許可證SCXK(滬)2016-0002。

1.1.2試劑與儀器 眼科剪(上海千盛生物科技有限公司)，DMEM-LG培養液(北京普博欣生物科技有限責任公司)，CO2培養箱(無錫旭野科技有限公司)，美國Thermo Scientific離心機，總RNA提取試劑盒(武漢鴻雨新科技有限公司)，DNA連接酶(北京合生基因科技有限公司)，Lipofectin 2000(美國Invitrogen公司)，戊巴比妥鈉溶液(石家莊北方藥業有限公司)，腦立體定位儀(北京吉安得爾科技有限公司)，乙醇(上海滬宇生物科技有限公司)，微量進樣器(北京同德創業科技有限公司)，6-羥基……