慢性牙周炎合并冠心病患者血清Vaspin、Apelin、Chemerin水平與牙周臨床指數(shù)相關(guān)性探討*

張美娜，張 斌

錦州醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院口腔科（錦州121000）

牙周炎（Periodontitis）是臨床上常見的口腔疾病，主要表現(xiàn)為口臭、牙齦出血、溢膿等，在我國成人中發(fā)病率高達50%，常威脅牙齒健康，甚至還會威脅到人體心臟、腎、肝臟等的健康［1］。慢性牙周炎（Chronic periodontitis，CP）是導致成年人失牙的主要原因，多種因素如感染、免疫力降低等都可引起慢性牙周炎的發(fā)生［2］。研究發(fā)現(xiàn)，牙周炎患者罹患冠心?。–oronary heart disease，CHD）的概率大大增加［3］，然而其發(fā)病機制尚不清楚。內(nèi)臟脂肪特異性絲氨酸蛋白酶抑制劑

（Visceral adipose tissue-derived serine protease inhibitor，Vaspin）是一種新型的炎癥因子，研究發(fā)現(xiàn)其可能通過影響血管內(nèi)皮細胞參與動脈粥樣硬化的發(fā)生發(fā)展過程［4］。脂肪因子（Apelin）是人類孤獨G 蛋白耦聯(lián)受體的內(nèi)源性配體，研究表明，Apelin 可參與調(diào)節(jié)血壓和血液流量［5］。研究報道，脂肪因子趨化素（Adipokine chemokine，Chemerin）在冠心病發(fā)生發(fā)展中起到重要作用。張國明等［6］在冠心病患者的動脈粥樣硬化斑塊組織中發(fā)現(xiàn)牙周致病微生物。然而三者在慢性牙周炎合并冠心病中的作用尚不清楚，本研究擬通過檢測慢性牙周炎合并冠心病患者血清中的Vaspin、Apelin、Chemerin水平，探討其在慢性牙周炎合并冠心病病情發(fā)展中的作用。

對象與方法

1 研究對象 選取2017年9月至2019年10月在本院收治的CP患者160例為研究對象，其中CP合并CHD 患者80例為試驗組，男性37例，女性43例，年齡28～60歲，平均年齡（45.62±8.16）歲。病例納入標準:①符合CP、CHD 臨床診斷標準，CP診斷標準參照Ramachandra等推薦的相關(guān)標準［7］，CHD 診斷標準參照《臨床冠心病診斷與治療指南》［8］；②全口余牙總數(shù)≥20個；③至少2個磨牙有一個PD≥4 mm，PAL≥1 mm；④探針出血結(jié)果為陽性者；⑤未接受牙種植術(shù)或者其他牙周治療；⑥冠狀動脈血管至少有一支出現(xiàn)狹窄者；⑦無嚴重心肝腎等器質(zhì)性病變；⑧3個月之內(nèi)未服用抗生素者。排除標準:①其他炎癥、感染合并冠心病患者；②肝功能指標異常、各種慢性、急性病患者；③孕婦、腫瘤患者、長期酗酒者。另選單純慢性牙周炎患者80例為對照組（NC 組），男性38例，女性42例，年齡27～61歲，平均年齡（44.98±9.15）歲。兩組患者性別、年齡比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），具有可比性。本研究經(jīng)錦州醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院倫理委員會批準通過，所有樣品采集均取得患者及家屬知情同意并簽字。

2 主要試劑與儀器 Vaspin ELISA 試劑盒（貨號:69-80016）、Apelin ELISA 試 劑 盒（貨 號:69-99460）、Chemerin ELISA 試劑盒（貨號:69-98960）購自武漢默沙克生物科技有限公司；ELX800 型全自動酶標儀購自美國Bio-Tek公司。

3 樣品采集與保存 所有患者使用真空采血管采集清晨空腹靜脈血5 ml，分別置于促凝管中，標記后于4℃靜置30 min，3000 r／min離心10 min，取血清分裝于1.5 ml無菌EP管中，-80℃冷凍保存?zhèn)溆谩?/p>

4 血清中Vaspin、Apelin、Chemerin含量測定

采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）測定血清中Vaspin、Apelin、Chemerin水平，檢測操作嚴格按照試劑盒說明書進行。本次研究所有樣品的檢測均由檢驗科同一批人員在同臺儀器上操作，每個樣本均設(shè)三次重復。

5 牙周臨床指數(shù)檢測 ①牙周探診深度（PD）檢測:PD 是指齦緣至袋底或齦溝底的距離，每個受試牙記錄6個位點（頰／舌側(cè)近中、中央、遠中）；健康牙齦PD≤2～3 mm。②牙周附著水平（PAL）檢測:無牙齦退縮時，PAL 為PD 與釉牙骨質(zhì)界到齦緣的距離之差；牙齦退縮時，PAL 為PD 與釉牙骨質(zhì)界到齦緣的距離之和。③菌斑指數(shù)（PI）:PI記錄標準，0 為無菌斑，1為表面有菌斑。④探診出血指數(shù)（BI）:用鈍頭探針輕輕探入齦溝或牙周袋內(nèi)，取出探針30 s后觀察牙齦出血情況。分為6級:1級為0分，牙齦健康；2級為1分，牙齦顏色有炎性改變，探診不出血；3級為2分，探診后牙齦有點狀出血；4級為3分，探診出血并沿齦緣擴散；5級為4 分，探診出血并溢出齦溝；6 級為5分，牙齦自發(fā)出血。⑤牙齦指數(shù)（GI）:檢查舌側(cè)邊緣齦、頰側(cè)近中齦乳頭、頰側(cè)邊緣齦及頰側(cè)遠中齦乳頭4個區(qū)域，分別記錄各區(qū)域炎癥情況。共分為4級:1級為0分，牙齦正常；2級為1分，牙齦輕度炎癥；3級為2分，牙齦中度炎癥；4級為3分，牙齦重度炎癥。計算每個牙和每位受檢者（4個牙位得分之和）的分值。

6 統(tǒng)計學方法 利用SPSS 23.0統(tǒng)計學軟件進行統(tǒng)計學分析，計數(shù)資料采用［例（%）］表示，行卡方檢驗；正態(tài)分布的計量資料以均數(shù)±標準差（±s）表示，行t檢驗；Pearson 檢驗對Vaspin、Apelin、Chemerin水平與各牙周臨床指數(shù)進行相關(guān)性分析，Logistic回歸分析CP患者發(fā)生CHD 的危險因素。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

結(jié) 果

1 兩組一般資料比較 試驗組和NC 組在性別、年齡上差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），試驗組有吸煙史和高血壓史的人數(shù)顯著多于NC 組（P＜0.05），見表1。

表1 兩組研究對象一般資料比較

2 兩組血清Vaspin、Apelin、Chemerin水平比較 與NC 組比較，試驗組Vaspin、Apelin 水平較低，Chemerin水平較高（P＜0.05），見表2。

表2 兩組血清Vaspin、Apelin、Chemerin水平比較（μg／L）

3 兩組PD、PAL、PI、BI、GI指數(shù)比較 與NC組比較，試驗組PD、PAL、PI、BI、GI指數(shù)較高（P＜0.05），見表3。

表3 兩組各牙周臨床指數(shù)比較（±s）

表3 兩組各牙周臨床指數(shù)比較（±s）

組 別 n PD（mm） PAL（mm）PI BI GI試驗組 80 3.69±0.75 4.46±1.15 2.14±0.69 3.49±0.51 3.28±0.78 NC組 80 2.06±0.23 0.00±0.00 0.00±0.00 1.78±0.31 0.59±0.13 t值 — 18.585 34.688 27.740 25.627 30.427 P 值 — ＜0.001 ＜0.001 ＜0.001 ＜0.001 ＜0.001

4 CP 合并CHD 患者血清Vaspin、Apelin、Chemerin水平與PD、PAL、PI、BI、GI指數(shù)相關(guān)性分析 CP合并CHD 患者血清Vaspin水平與PD、PAL、PI、BI、GI指數(shù)呈負相關(guān)（P＜0.05）；血清Apelin水平與PD、PAL、PI、BI、GI指數(shù)呈負相關(guān)（P＜0.05）；血清Chemerin水平與PD、PAL、PI、BI、GI指數(shù)呈正相關(guān)（P＜0.05）。見表4。

表4 試驗組患者血清Vaspin、Apelin、Chemerin水平與各牙周臨床指數(shù)相關(guān)性分析

5 CP患者發(fā)生CHD 危險因素的Logistic分析 多因素Logistic回歸分析結(jié)果顯示年齡、高血壓史、吸煙史、Chemerin高水平均為影響CP患者發(fā)生CHD的獨立危險因素，Vaspin、Apelin高水平為獨立保護因素（P＜0.05），見表5。

表5 CP患者發(fā)生CHD 危險因素的Logistic分析

討 論

有研究者認為，無論任何病因?qū)е碌穆匝装Y都與心血管疾病風險的增加有關(guān)［9］。Ziebolz等［10］研究發(fā)現(xiàn)，終末期冠心病患者最終需要通過心臟移植手術(shù)的患者合并慢性牙周炎的比率超過90%。程景明［11］研究對比冠心病患者中患有慢性牙周炎和牙周健康的人數(shù)時，發(fā)現(xiàn)兩者人數(shù)差異有統(tǒng)計學意義。近期研究表達，慢性牙周炎已成為冠心病的獨立危險因素［12］。諸多證據(jù)表明慢性牙周炎與冠心病有較強的相關(guān)性。關(guān)于兩者之間的聯(lián)系或者發(fā)生機制如何，目前尚不清楚，為了解釋兩者之間是由何種方式產(chǎn)生的聯(lián)系，研究者大多偏向以下幾種生物機制:炎癥和免疫機制、血栓機制、血脂機制、胰島素抵抗機制等［13］。

研究表明，脂肪細胞可分泌血清Vaspin等脂肪細胞因子，具有明顯的抗炎癥反應(yīng)作用，有利于保持斑塊的穩(wěn)定，對體內(nèi)血管平滑肌細胞生長和冠狀動脈粥樣硬化的形成有一定抑制作用［14］。對于冠狀動脈粥樣硬化的形成以及心血管事件具有重要的影響。羅慶慧等［15］對比觀察冠心病患者血清中Vaspin水平變化時發(fā)現(xiàn)，無論是急性心梗死組、不穩(wěn)定型心絞痛組還是穩(wěn)定性心絞痛組，其血清中Vaspin水平均顯著低于健康對照組，并且Vaspin水平與Gensini積分呈負相關(guān)，說明冠心病患者血清Vaspin與冠狀動脈狹窄程度有關(guān)。研究表明Apelin 具有心肌保護作用，可介導血管再生，改善心肌缺血，改善循環(huán)障礙等一系列心血管效應(yīng)［16］。曾文平等［17］研究發(fā)現(xiàn)冠心病患者血清Apelin水平顯著低于對照組，認為Apelin水平變化與冠心病發(fā)生發(fā)展有關(guān)，參與了冠狀動脈粥樣硬化的生理過程。Chemerin是脂肪因子家族的成員之一，具有趨化白細胞的功能，可募集表達Chemerin受體的炎性細胞聚集于組織的受損部位發(fā)生炎癥反應(yīng)［18］。近期研究發(fā)現(xiàn)，Chemerin可能與冠狀動脈斑塊形成有關(guān)，參與了血管重構(gòu)過程［19］。閆曉紅等［20］研究發(fā)現(xiàn)，冠心病患者血清中Chemerin水平隨著冠狀動脈病變程度加劇而上升，并且發(fā)現(xiàn)單支病變患者高水平Chemerin具有明顯的促炎癥作用。Ozcan等［21］研究發(fā)現(xiàn)，牙周炎患者唾液中Chemerin含量顯著上升，提示Chemerin與牙周炎發(fā)生有關(guān)，與上述結(jié)果一致。本研究發(fā)現(xiàn)，Vaspin、Apelin在CP 合并CHD 患者血清中下降，Chemerin則上 升，提 示Vaspin、Apelin、Chemerin 與CP 合 并CHD 有關(guān)，其水平高低可反應(yīng)CP 合并CHD 患者冠狀動脈病變。

慢性牙周炎直接導致牙周臨床指標的變化，牙周臨床指標可反映慢性牙周炎的病變程度。肖燕等［22］研究CP合并CHD 患者時發(fā)現(xiàn)，經(jīng)過治療改善后的患者牙周臨床指標均有顯著下降，本研究結(jié)果與之相似，PD、PAL、PI、BI、GI指標相對于對照組均顯著升高。進一步對CP 合并CHD 患者血清中Vaspin、Apelin、Chemerin水平與牙周臨床指標進行相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)，Vaspin、Apelin 與PD、PAL、PI、BI、GI 呈 負 相 關(guān)，Chemerin水平與PD、PAL、PI、BI、GI呈正相關(guān)，提示血清中Vaspin、Apelin、Chemerin水平與牙周臨床指標可同時反映CP 合并CHD 患者病情嚴重程度。同時本研究顯示Chemerin高水平為影響慢性牙周炎患者發(fā)生冠心病的危險因素，Vaspin高水平、Apelin 高水平為獨立保護因素，提示血清Vaspin、Apelin、Chemerin水平可能作為判斷CP合并CHD 患者冠狀動脈病變的輔助指標。

綜上所述，CP 合并CHD 患者血清Vaspin、Apelin水平較低、Chemerin水平較高，與患者牙周指數(shù)有關(guān)，均為CP患者發(fā)生CHD 的影響因素。本研究不足之處在于樣本量不足，需擴大樣本量進一步研究。