IgG型抗-E伴抗-Wra 1例報道

段紅潔，趙國生，張宏健，黃海濤，杜春紅

天津醫科大學總醫院輸血科，天津 300000

輸血前不規則抗體篩查十分必要，尤其是針對有輸血史、妊娠史以及長期反復輸血的患者，本室遇到1例反復輸血的患者，抗體篩查陽性，抗體鑒定為較少見的抗-E和抗-Wra，現報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 患者男，81歲，漢族，于2018年11月14日來本院急診就診，診斷為消化道出血，黑便，血紅蛋白(Hb)70 g/L，臨床醫生申請2 U的懸浮紅細胞，不規則抗體篩查陰性，輸注配血相合的懸浮紅細胞2 U，11月16日不規則抗體篩查陰性，再次輸入配血相合的懸浮紅細胞2 U，癥狀緩解后出院。2019年5月18日患者再次出現黑便，來本院急診輸血，不規則抗體篩查陽性，抗體鑒定發現患者血清中存在IgG抗-E合并IgG抗-Wra，抗-E和抗-Wra的效價均為4。

1.2試劑與儀器 抗-C、抗-E、抗-c、抗-e及抗-D均由上海血液生物醫藥有限責任公司提供；抗-A、抗-B，抗-IgG，C3d及篩選細胞(批號:20190413)均由長春博德生物技術有限責任公司提供；抗-Wra及譜細胞(批號:8000256154)由荷蘭Sanquin公司提供；ABO/Rh 正反定型血型定型試劑卡、抗人球蛋白檢測卡及AUTOVUE 全自動血型分析儀由美國 Ortho-Clinical Diagnostics公司提供；ID-Incubator37SⅠ孵育器、ID-Centrifuge12SⅡ離心機由美國BioRad公司提供。

1.3方法

1.3.1血型鑒定 ABO/Rh血型鑒定參照AUTOVUE 全自動血型分析儀說明書操作；C、c、E、e和Wra抗原檢測，按照抗血清試劑說明書操作。

1.3.2直接抗人球蛋白試驗、不規則抗體篩查、抗體特異性鑒定及效價測定等按參考文獻[1]方法操作。

2 結 果

2.1血型鑒定 患者血型為A型、CCDee、Wr(a-)。

2.2直接抗人球蛋白試驗 抗-IgG，C3d陰性。

2.3不規則抗體篩查 抗人球蛋白法抗體篩查陽性時加做鹽水法抗體篩查，確定是否存在IgM類的不規則抗體，結果見表1。

2.4抗體鑒定及效價測定 根據抗體篩查結果初步判斷患者血清中存在抗-E。患者血清與譜細胞在鹽水介質中無反應；在抗人球蛋白介質中除與E抗原陽性的譜細胞發生凝集反應外，還與Wra抗原陽性的譜細胞發生凝集，表明患者血清中含有特異性的IgG抗-E，并可能含有IgG抗-Wra聯合抗體。結果見表2。抗體效價：抗-E和抗-Wra的效價均為4。

2.5交叉配血試驗 選用A型、CCDee、Wr(a-)的獻血者紅細胞與患者血清在鹽水及抗人球蛋白介質中均無溶血、無凝集。輸注該袋懸浮紅細胞2 U，無輸血不良反應發生。

表1 不規則抗體篩查結果

注：1+表示凝集強度；0表示陰性。

表2 譜細胞鑒定結果

注：+表示極小的細胞凝集混合眾多游離紅細胞；0表示陰性；1+表示凝集強度。

3 討 論

不規則抗體又稱意外抗體，通常指ABO血型系統抗-A和抗-B以外的其他血型系統抗體，是引起血型鑒定困難、疑難配血、溶血性輸血反應及新生兒溶血病(HDN)的主要原因之一， 因而對不規則抗體的篩查與鑒定是保證臨床輸血安全的重要手段和關鍵環節。有數據顯示，中國人群中不規則抗體檢出率約為0.2%[2]，Rh系統中抗-E所占比重較高[3]，這是因為Rh血型系統中E抗原的抗原性僅次于D抗原，我國較早就采用RhD相容性輸血，由輸血產生的抗-D顯著減少，抗-E的產生主要因輸血免疫所致，其他系統不規則抗體如抗-M、抗-P1、抗-Jka、抗-Fyb等也可見，有關抗-Wra的報道則相對少見，其可引起交叉配血不合，嚴重時也可引起 HDN和溶血性輸血反應[4-5]。

Wra/Wrb血型抗原是紅細胞帶3蛋白單核苷酸突變所形成的，屬于Diego血型系統[6]。目前針對Wra/Wrb抗原在不同人種群體中分布頻率的研究報告較少，高加索人種中以 Wrb純合子為主，Wra抗原的檢出率約為1/1 000[7]；Wra抗原在西班牙健康獻血者中的分布頻率為1/785[8]；溫機智等[9]研究發現Wra/Wrb抗原在廣州漢族人群中分布與高加索人群中的分布情況大致相似，未發現多態性，紅細胞抗原表型頻率Wr(a-b+)為100%；這表明Wra抗原發生頻率低，而它的對偶抗原Wrb卻有極高的發生頻率。

抗-Wra屬于IgM或IgG性質，由天然抗體產生，經常在自身免疫性溶血性貧血(AIHA)患者的血清中發現，抗-Wra也能引起輕重程度不等的 HDN和輸血反應[4-5]。有關抗-Wra在不同國家地區獻血者和受血者中的檢出頻率略有不同，在巴西利亞的獻血人群中，抗-Wra的檢出頻率很低，約為0.06%，其中抗體性質IgM型占76.5%，而IgG型僅為23.5%[10]。西班牙巴倫西亞地區抗-Wra在健康獻血者、孕婦、受血者中的檢出率分別為1/37、1/20及 1/28[8]。而國內有關抗-Wra在不同人群中的檢出頻率及其臨床意義的研究報道較少，多為個案報道[11-12]，一般是合并其他血型系統抗體時才被檢出。這可能是因為大多數實驗室使用的抗體篩查細胞為國產細胞，不含有Wra抗原。本例報道中患者前兩次輸血時抗體篩查均為陰性，且中國人群中Wra抗原頻率<0.01[13]，交叉配血過程中也未出現陽性，第3次輸血時抗體篩查陽性，進行抗體鑒定時才發現除存在抗-E外可能還含有抗-Wra。該患者表型為 Wr(a-)，其血清在鹽水介質中與譜細胞無反應，在抗人球蛋白介質中與譜細胞呈陽性反應，試管間接抗人球蛋白法效價為4，抗體性質為IgG。故本試驗選擇在抗人球蛋白介質和鹽水介質中配血均相合的與患者Rh分型一致且Wr(a-)的獻血者紅細胞供患者輸注，未發生輸血不良反應。

綜上所述，雖然Wra在人群中屬于低頻抗原，國內也未見抗-Wra引起的輸血不良反應及HDN的相關報道，但其有一定的臨床意義，TANAZ等[5]報道了1例由抗-Wra引起的輸血不良反應，1例66歲女性在輸入Wr(a+)表型的紅細胞48 h后發生了致命性的溶血性輸血反應。因此，為了保證受血者輸血安全，在選擇篩選細胞和譜細胞時可以考慮含有低頻抗原的產品，一旦確定抗體特異性，選擇抗原陰性的供者紅細胞進行交叉配血試驗，必要時選擇多種配血方法，以保證臨床輸血安全。