山茱萸提取物對乳腺癌細胞MDA-MB-231 侵襲和轉移的抑制作用及機制研究

謝靜靜 張金花 金劍英 金 丹 郭群依

全世界每年約有100 萬名婦女罹患乳腺癌，由于該病而死亡的人數超過37 萬[1-2]。雌激素可通過雌激素受體α（estrogen receptor α，ERα）與胰島素樣生長因子1 受體（Insulin-like growth factor 1 receptor，IGF-1R）途徑相互作用，繼而增加增殖，降低對細胞凋亡的敏感性[3-4]。IGF-1R/絲氨酸/蘇氨酸激酶（serine/threoninekinase，Akt）可以傳輸來自受體酪氨酸激酶（receptortyrosinekinase，RTK）和G 蛋白偶聯受體（G-protein-coupled receptor，GPCRs）的信號，這些信號可被生長因子或細胞因子激活[5-6]。盡管RTK 介導的信號轉導途徑重疊，IGF-1R 介導的活化Akt 特別有助于IGF-1R 的抗凋亡活性[7-8]。山茱萸提取物是屬于異黃酮類，包含許多可能抑制癌變的化合物，例如蛋白酶抑制劑、植酸、異黃酮；研究表明，山茱萸提取物的抗癌作用是由某些類型的細胞凋亡介導的，低濃度的山茱萸提取物可通過上調B 細胞淋巴瘤因子-2（Bcl-2），下調Bcl-2 相關的X（Bax）蛋白來促進凋亡，從而對MCF-7 細胞的增殖產生抑制作用[9-10]。本研究擬探討山茱萸提取物對乳腺癌細胞MDA-MB-231 侵襲和轉移的抑制作用及機制，為乳腺癌的治療提供理論依據。

1 實驗材料

1.1 材料 人乳腺癌細胞MDA-MB-231（美國典型培養物保藏中心，批號KTL-66792）。

1.2 主要藥品及試劑 山茱萸提取物（陜西斯諾特生物技術有限公司，批號190123）；RPMI-1640 培養基、DMEM 培養基（美國Life Technologies 公司，批號SJB-Q017、SKB-Q008）；順鉑（德國默克公司，批號S5485）；胰蛋白酶（武漢博士德生物工程有限公司，批號20181207）；胎牛血清（FBS）、磷酸鹽緩沖鹽水（PBS）、無血清的Dulbecco's 改良的Eagle 培養基、硝酸纖維素膜（碧云天生物技術研究所，批號CT0507、CT0108、CT6074、CM5533）；MTT 溶液（美國Sigma-Aldrich 公司，批號MR-781）；二甲基亞砜（美國Origen Bioedical 公司，批號P60178）；transwell 遷移室（德國Greiner 公司，批號DM-0079）；基質膠（美國BD 公司，批號P0873K）；TRIzol 試劑（美國Invitrogen公司，批號IK5013）；……