采用不同介質溶出曲線評價自制奧美沙坦酯片的質量*

苗彩云，陳江飛

(1.寧波市婦女兒童醫院藥劑科，寧波 315012；2.寧波市第一醫院藥學部，寧波 315010)

奧美沙坦酯由日本三共制藥公司研制開發，2002年5月以商品名Benicar在美國上市，用于治療高血壓。該藥為選擇性血管緊張素Ⅱ(Ang Ⅱ)1型(AT1)受體拮抗藥，通過選擇性阻斷AngⅡ與血管平滑肌AT1受體的結合而阻斷AngⅡ的收縮血管作用。我國于2006年上市，由第一三共制藥(上海)有限公司生產，商品名“傲坦”，上市劑型為片劑，規格為20和40 mg。

奧美沙坦酯具有弱堿性(pKa=4.3)和高親脂性，口服生物利用度約29%[1]，水中的平衡溶解度僅為12.55 mg·L-1[2]，屬于生物藥劑學分類系統中的Ⅱ類藥物，溶出是影響其吸收的限速步驟[3]，因此溶出度實驗技術不僅是評價口服固體制劑內在質量的一種重要手段，在多種pH值溶出介質中溶出曲線的測定更是評估不同來源同一制劑內在質量差異的可靠手段[4]。筆者以原研藥“傲坦”為參比制劑，考察自制奧美沙坦酯片在4種溶出介質中的溶出行為，并采用相似因子法對自制產品作質量評價，為改進奧美沙坦酯片處方質量提供依據。

1 儀器與試藥

1.1儀器 RC806D溶出實驗儀(天津市天大天發科技有限公司)；UV2450型紫外-可見分光光度計(日本島津公司)；AB204-E電子天平(瑞士METTLER TOLEDO公司，感量：0.01 mg)。

1.2試藥 奧美沙坦酯片參比制劑[商品名：傲坦，第一三共制藥(上海)有限公司，批號：120080，120150]；奧美沙坦酯自制片[奧美沙坦酯20 mg(原料分別過篩孔內徑150和75 μm篩和微粉化)，羥丙纖維素、微晶纖維素、低取代羥丙纖維素、乳糖、硬脂酸鎂、包衣粉]；奧美沙坦酯對照品(中國食品藥品檢定研究院，批號：100864-200601)；乙腈為色譜純，十二烷基硫酸鈉(sodium dodecyl sulfate，SDS)、鹽酸、醋酸、醋酸鈉、磷酸二氫鉀等均為分析純；水為純化水。

2 方法與結果

2.1溶液的配制

2.1.1溶出介質 按照《普通口服固體制劑溶出度實驗技術指導原則》[5]配制4種溶出介質，分別為pH值1.0鹽酸溶液、pH值4.5醋酸鹽緩沖液(含0.2%SDS)、pH值6.8磷酸鹽緩沖液和水(含0.1% SDS)。

2.1.2對照品溶液 取奧美沙坦酯對照品約20 mg，精密稱定，置100 mL量瓶中，加乙腈-水(60：40)適量，超聲溶解，稀釋至刻度，搖勻，作為儲備液。精密量取5 mL，置100 mL量瓶中，加相應溶出介質稀釋至刻度，搖勻，作為對照品溶液。

2.2方法學考察

2.2.1檢測波長的確定 取空白輔料適量，用“2.1.1”項下4種溶出介質溶解，制成相應溶出介質的空白輔料溶液，另取“2.1.2”項下對照品溶液適量，按照紫外-可見分光光度法，在波長200～400 nm范圍內進行掃描，介質pH值1.0鹽酸溶液和醋酸鹽緩沖液(含0.2%SDS)中奧美沙坦酯在251 nm處有較強吸收峰，而pH值6.8磷酸鹽緩沖液和水(含0.1%SDS)在258 nm處，空白輔料在該兩處波長均無吸收，分別選擇不同介質以251和258 nm作為檢測波長。

2.2.2線性關系考察 精密量取適量奧美沙坦酯儲備液置于100 mL量瓶中，用“2.1.1”項下4種溶出介質稀釋至刻度，搖勻。取上述溶液適量，按照紫外-可見分光光度法，測吸光度。以奧美沙坦酯質量濃度(X)為橫坐標，吸光度(Y)為縱坐標進行線性回歸，結果見表1，在4.026～16.104 μg·mL-1范圍內呈良好線性關系。

表1 不同溶出介質線性回歸方程

Tab.1Linearregressionequationofdifferentdissolutionmedia

溶出介質檢測波長/nm回歸方程R2pH值1.0鹽酸溶液251Y=0.036 5X-0.003 40.999 9pH值4.5醋酸鹽緩沖液251Y=0.037 0X+0.003 80.999 9 (含0.2%SDS)pH值6.8磷酸鹽緩沖液258Y=0.043 5X+0.003 40.999 8水(含0.1%SDS)258Y=0.039 8X+0.001 01.000 0

2.2.3精密度實驗 取“2.1.2”項下對照品溶液適量，照紫外-可見分光光度法，重復測定6次，RSD分別為0.17%，0.16%，0.31%，0.26%，表明儀器精密度良好。

2.2.4穩定性實驗 取“2.1.2”項下對照品溶液適量，分別于室溫下放置0，2，4，6，8 h時，測吸光度，RSD分別為0.63%，0.41%，0.40%，0.39%，表明奧美沙坦酯在4種溶出介質中室溫下8 h內穩定性良好。

2.2.5回收率實驗 取“2.1.2”項下對照品溶液適量，稱取按處方比例的空白輔料置100 mL量瓶中，用“2.1.1”項下4種溶出介質超聲溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。照紫外-可見分光光度法，測吸光度，并計算回收率及RSD，結果見表2。

2.3溶出度測定 參照奧美沙坦酯片(YBH06992006)質量標準溶出度項下的方法，按照溶出度測定法(《中華人民共和國藥典》2015年版二部附錄X C第二法)，分別量取經脫氣處理的“2.1.1”項下4種溶出介質1000 mL，待溶出介質溫度恒定在(37.0±0.5) ℃，設置轉速50 r·min-1，將奧美沙坦片置6個溶出杯中(分2次投入)，自供試品接觸溶出介質起計時，根據《普通口服固體制劑溶出度實驗技術指導原則》和實際溶出情況，分別于5，10，15，20，30，45，60 min取樣10 mL(同時補充同溫等量空白溶出介質)，經孔徑0.45 μm微孔濾膜濾過。按照紫外-可見分光光度法測定吸光度，計算各時間點的累積溶出度，繪制溶出曲線，結果見圖1～4。

2.4溶出曲線相似性評價 根據《普通口服固體制劑溶出度實驗技術指導原則》，采用相似因子(f2)來比較溶出曲線，評價自制片與參比制劑體外溶出行為的相似性。在pH值6.8磷酸鹽緩沖液中，自制片(粒徑150 μm)與2批參比制劑(批號：120080，120150)比較的f2值分別為36.32和32.94；自制片(粒徑75 μm)與2批參比制劑(批號：120080，120150)比較的f2值分別為44.19和39.53，而自制片(微粉化)與2批參比制劑(批號120080，120150)比較的f2值均大于50。自制片(微粉化)與參比制劑在pH值1.0鹽酸溶液的15 min溶出度均超過85%，在另外3種溶出介質中f2值均大于50。結果表明，奧美沙坦酯自制片(微粉化)與參比制劑在4種溶出介質中的溶出曲線相似。

3 討論

奧美沙坦酯幾乎不溶于水，減小原料藥粒徑能加快溶出，是影響制劑溶出行為的關鍵因素。筆者分別將奧美沙坦酯原料過100目(粒徑約150 μm)、200目(粒徑約75 μm)和微粉化(粒徑約15 μm)制成片劑，通過溶出度評價指標進行處方篩選，由于在pH值6.8磷酸鹽緩沖液中能滿足漏槽條件，可用于奧美沙坦酯片溶出度的測定和處方篩選[6-7]。在pH值6.8磷酸鹽緩沖液中，自制片(粒徑約75 μm)、自制片(粒徑約150 μm)60 min的溶出度分別為75.98%和82.84%，與參比制劑比較f2值均小于50，表明奧美沙坦酯片在原料粒徑>75 μm時溶出曲線不同于原研制劑，而將原料微粉化后控制粒徑約15 μm，具有相似的溶出行為。嚴相平等[6]考察了奧美沙坦酯片處方工藝對溶出度的影響，結果顯示原料粒徑的影響最關鍵，與本研究結果基本一致，該報道中研究者認為需要控制粒徑d(0.9)、d(0.5)和d(0.1)小于10.0，3.5，0.6 μm，本研究中的微粉化原料d(0.9)、d(0.5)和d(0.1)分別為15.51，5.97，0.93 μm，30 min溶出率為87.17%，同樣實現與原研制劑相似的溶出曲線。

表2 奧美沙坦酯在不同溶出介質中回收率實驗結果

Tab.2Resultsofrecoverytestofolmesartarmedoxomilindifferentdissolutionmedia

溶出介質及其占處方量比例加入量測得量mg回收率平均回收率RSD%pH值1.0鹽酸溶液 50%10.219.9597.4599.291.879.8910.15102.639.819.90100.92 80%15.9815.8399.0616.2915.8997.5416.1316.14100.06 100%19.7919.4198.0820.2320.35100.5920.3419.8097.35pH值4.5醋酸鹽緩沖液(含0.2%SDS) 50%9.799.96101.7499.411.819.989.6997.099.699.77100.83 80%16.0315.6397.5015.9615.6998.3115.9515.7198.50 100%19.6619.3898.5819.6219.97101.7820.0620.13100.35pH值6.8磷酸鹽緩沖液 50%10.1710.27100.98100.820.899.9210.11101.9210.059.9799.20 80%16.2816.44100.9815.9716.26101.8216.1616.40101.49 100%20.5720.63100.2919.8719.8699.9520.3820.54100.79水(含0.1%SDS) 50%10.099.9999.01100.111.6510.1010.0999.9010.2210.34101.17 80%15.8716.17101.8916.4316.1097.9915.9016.27102.33 100%20.1119.6897.8620.1620.43101.3420.3920.2899.46

圖1 自制樣品與參比制劑在pH值6.8磷酸鹽緩沖液中的溶出曲線

Fig.1Dissolutioncurveofself-preparedandreferencesamplesinphosphatebuffersolutionatpH6.8

圖2 自制樣品與參比制劑在水(含0.1% SDS)中的溶出曲線

Fig.2Dissolutioncurveofself-preparedandreferencesamplesinwater(containing0.1%SDS)

圖3 自制樣品與參比制劑在pH值4.5醋酸鹽緩沖液(含0.2%SDS)中的溶出曲線

Fig.3Dissolutioncurveofself-preparedandreferencesamplesinHAcbuffersolutionatpH4.5(containing0.2%SDS)

圖4 自制樣品與參比制劑在pH值1.0鹽酸溶液中的溶出曲線

Fig.4Dissolutioncurveofself-preparedandreferencesamplesinHClsolutionatpH1.0

進一步考察在另3種介質中的溶出行為，由于奧美沙坦酯幾乎不溶于水，其溶解度對pH值有依賴性，pH值在0～2內隨著pH值降低急劇增大，中性介質條件下溶解最少[2]。自制片(微粉化)和參比制劑在pH值1.0鹽酸溶液中溶出較快，10 min溶出率超過95%，表明為不具有區分力的溶出曲線[8]。奧美沙坦酯在水和pH值4.5醋酸鹽緩沖液中達不到漏槽條件，120 min的溶出率低于60%[6，9]，本研究考察了這2種介質中加入不同濃度表面活性劑對溶出度影響，確定水、pH值4.5醋酸鹽緩沖液分別含0.1%和0.2%的SDS作為溶出介質，無論自制片(微粉化)還是參比制劑45 min的溶出率均達85%，且溶出曲線無拐點和突釋，證明為具有分辨力的溶出曲線[8]。

總之，奧美沙坦酯原料粒徑是決定制劑溶出的關鍵因素，本研究將原料微粉化(粒徑約15 μm)的自制片在4種溶出介質中具有與原研制劑相似的溶出曲線，說明兩者質量一致性較好，但是否能取得體內生物利用度等效尚有待進一步研究。