乙肝病毒X蛋白結合蛋白可能通過PI3K/Akt信號通路影響肝癌細胞的增殖和遷移

劉 陽 魏 俊 肖 貝 曾 琴

(武漢市傳染病醫院肺結核科，武漢 430023)

乙肝病毒X蛋白結合蛋白(hepatitis B X-interacting protein，HBXIP)是哺乳動物中一種高度保守的細胞組成型表達蛋白，在惡性腫瘤組織中高表達，作為癌蛋白受到研究者的廣泛關注[1]。已有研究報道，HBXIP在非小細胞肺癌、卵巢癌、膀胱癌等多種惡性腫瘤中高表達，通過影響腫瘤細胞增殖、遷移和侵襲等促進腫瘤進展，與腫瘤不良預后密切相關[2-4]。肝癌相關研究表明，HBXIP在肝癌組織和癌細胞中高表達與肝癌組織分化、TNM分期及癌栓形成及癌細胞免疫逃逸有關[5,6]。但目前HBXIP對肝癌細胞增殖和遷移的影響及其機制尚未完全闡明。磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase，PI3K)及其下游蛋白激酶B(Akt)所組成的PI3K/Akt信號通路是調節細胞增殖、凋亡、分化和葡萄糖轉運等功能的重要通路，一直是腫瘤細胞增殖、凋亡、遷移等惡性生物學行為的研究熱點[7,8]。本研究分析HBXIP對肝癌細胞增殖和遷移的影響，旨在揭示HBXIP對肝癌細胞增殖和遷移的影響是否與PI3K/Akt信號通路有關。

1 材料與方法

1.1材料

1.1.1細胞株 人正常肝臟細胞HL7702和人肝癌細胞HepG2、Hep3B、Huh7由中國科學院上海細胞庫提供。

1.1.2主要試劑 RPMI1640培養基、胎牛血清(Gibco公司)；青霉素和鏈霉素(Solarbio公司)；pcDNA3.1-HBXIP質粒、siRNA-HBXIP由廣州銳博生物科技有限公司構建；LY294002(PI3K抑制劑，Apexbio公司)；逆轉錄試劑盒(TaKaRa公司)；SYBR Green實時熒光定量PCR試劑盒(ABI公司)；MTT試劑和二甲基亞砜(Solarbio公司)；鼠抗人HBXIP單克隆抗體、兔抗人PI3K單克隆抗體、兔抗人p-PI3K單克隆抗體、兔抗人p-Akt多克隆抗體、兔抗人Akt多克隆抗體、鼠抗人GAPDH單克隆抗體及辣根過氧化酶標記的山羊抗鼠IgG二抗(Abcam公司)?！?br>