LDH與PLT參數(shù)的相關(guān)分析

黃華霖 焦曉陽

（1 深圳市龍崗區(qū)中心血站，廣東 深圳 518172；2 汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院，廣東 汕頭 515041）

血小板輸注是預(yù)防和治療各種血小板減少或功能障礙引起出血的重要方法[1]。由于到目前還沒有更好的方法來評(píng)估血小板輸注后的體內(nèi)效果，仍采用輸血后血小板計(jì)數(shù)和臨床癥狀體征改善來判斷血小板的療效[2-4]。影響血小板輸注效果的因素主要有免疫因素、非免疫因素和人為因素[5]。現(xiàn)在普遍認(rèn)為影響PLT輸注效果主要是患者的個(gè)體因素以及多次輸注PLT而導(dǎo)致，較少的研究是從所輸注的PLT質(zhì)量本身來評(píng)估PLT輸注的效果。單采PLT制備過程中PLT暴露于人工材料表面和經(jīng)過高速離心，均會(huì)誘導(dǎo)細(xì)胞活化、破碎和生化釋放[6-7]。LDH存在于PLT的α顆粒內(nèi)，α顆粒釋放會(huì)導(dǎo)致LDH水平升高。因此，我們從血小板本身質(zhì)量角度，研究單采PLT輸注過程中LDH與PLT參數(shù)相關(guān)性，尋找評(píng)價(jià)血小板輸注療效的指標(biāo)。

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象：99份來自我站的單采PLT。33份來自轄區(qū)醫(yī)院輸注單采PLT的患者病例。

1.2 儀器與試劑：血小板恒溫震蕩保存箱（蘇州醫(yī)用儀器廠）、Trima全自動(dòng)血細(xì)胞單采機(jī)（美國CaridianBCT 公司）、全自動(dòng)血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀（希森美康醫(yī)用電子有限公司）、SHINOW 9.0現(xiàn)代血站管理信息系統(tǒng)（唐山啟奧科技有限公司 ）、玻璃試管（天津市天科玻璃儀器制造有限公司）、LDH測(cè)定試劑盒（貝克曼庫爾特實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)有限公司）、血細(xì)胞分析用溶血?jiǎng)ㄏＩ揽滇t(yī)用電子有限公司）、血細(xì)胞分析用稀釋液（希森美康醫(yī)用電子有限公司）、血液成分分離機(jī)配套管路（美國CaridianBCT 公司）。

1.3 研究方法

1.3.1 自2018年6月～8月，我們挑選了99份來自我站的單采PLT。獻(xiàn)血者符合《獻(xiàn)血者健康檢查要求》（GB18467-2011），單采PLT前7天內(nèi)未服用任何會(huì)影響PLT功能的藥物，且獻(xiàn)血前獻(xiàn)血者的紅細(xì)胞比容（Hematocrit,HCT）≥0.36、PLT：≥150×109/L和＜450×109/L，獻(xiàn)血后獻(xiàn)血者的PLT≥100×109/L。

1.3.2 利用Trima全自動(dòng)血細(xì)胞單采機(jī)完成單采PLT采集，將PLT存袋內(nèi)和留樣管置于恒溫震蕩保存箱內(nèi)，震蕩10 min后，熱合留取留樣管5 mL單采PLT樣本。觀察22 ℃不同保存時(shí)間（第1、3、5天）LDH和PLT水平。

1.3.3 利用SHINOW 9.0現(xiàn)代血站管理信息系統(tǒng)，通過獻(xiàn)血者的獻(xiàn)血碼追蹤單采PLT臨床使用后的情況，并成功追蹤到33份單采PLT的患者輸注效果。這些患者分別來自轄區(qū)醫(yī)院等。記錄患者輸注PLT前、后的血常規(guī)結(jié)果等指標(biāo)。

1.4 統(tǒng)計(jì)分析：統(tǒng)計(jì)分析使用SPSS22.0進(jìn)行。采用重復(fù)測(cè)量的方差分析比較22 ℃不同時(shí)間（第1、3、5天）的PLT、LDH差異。采用spearman相關(guān)分析進(jìn)行采輸PLT中LDH差值與輸注前后PLT相關(guān)參數(shù)（MPV、PCT、PDW）的相關(guān)性分析。P＜0.05表明差異有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 單采PLT貯存時(shí)間對(duì)PLT、LDH水平的影響：PLT在（22±20）℃條件下，貯存不同時(shí)間（第1、3、5天）后，PLT數(shù)量沒有明顯變化，LDH水平呈逐漸升高（P＜0.05）。見表1。

表1 單采PLT貯存時(shí)間對(duì)PLT、LDH水平的影響（n=99，）

表1 單采PLT貯存時(shí)間對(duì)PLT、LDH水平的影響（n=99，）

2.2 采輸PLT中LDH差值與輸注前后PLT相關(guān)參數(shù)相關(guān)性分析：采用Spearman相關(guān)判斷采輸PLT中LDH差值與患者輸注前后MPV、PDW、PCT差值的關(guān)系。采輸PLT中LDH差值與患者輸注前后MPV、PDW相關(guān)性無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。采輸PLT中LDH差值與患者輸注前后PCT差值相關(guān)系數(shù)是0.476,P值是0.005，相關(guān)性具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

圖1 采輸PLT中LDH差值與患者輸注前后PCT差值相關(guān)性分析（n=33）

3 結(jié)論

PLT是直徑為2.4 μm，平均容積為7.2 fL的盤狀、無核的細(xì)胞碎片，主要來源于骨髓巨核細(xì)胞[8]。PLT的主要功能是凝血和止血作用，以及修補(bǔ)破損的血管。PLT輸注是預(yù)防和治療PLT減少或功能障礙引起出血的一個(gè)主要治療手段，可以快速提升PLT的數(shù)量，減輕PLT減少帶來的負(fù)面影響。PLT輸注效果和治療價(jià)值是其他藥物不能替代的。影響PLT輸注效果的因素包括感染，發(fā)熱，脾功能亢進(jìn)，其他非免疫因素，以及人類白細(xì)胞抗原（HLA）和人PLT抗原（HPA）抗體。PLT輸注耐受（PTR）的特點(diǎn)是PLT輸血后缺乏足夠的增量，其潛在機(jī)制歸因于免疫和非免疫因素[9-10]；后者包括絕大多數(shù)（70%～80%）的PTR病例。血小板在制備、運(yùn)輸、保存過程中，離心損傷、不合適的溫度和震蕩、保存期過長、保存器材的質(zhì)量問題等因素可引起其數(shù)量減少和質(zhì)量受損，從而導(dǎo)致血小板輸注效果差甚至無效，這些非免疫因素比免疫因素參與的血小板輸注無效可能更加常見，是臨床療效中重要的一環(huán)[11]。根據(jù)《血站技術(shù)操作規(guī)程（2019版）》規(guī)定[12]，單采血小板質(zhì)量檢查指標(biāo)為外觀、標(biāo)簽、容量、無菌試驗(yàn)、白細(xì)胞殘留量、紅細(xì)胞混入量、血小板含量、pH值，而對(duì)其PLT其他功能指標(biāo)未做要求。LDH存在于PLT的α顆粒內(nèi)，α顆粒釋放會(huì)導(dǎo)致LDH水平升高，因此LDH常被用于評(píng)估PLT活力[13-16]。從表1結(jié)果顯示，PLT在（22±2）℃條件下，貯存不同時(shí)間（第1、3、5天）后，PLT數(shù)量沒有明顯變化，LDH水平呈逐漸升高（P＜0.05），表明在常規(guī)儲(chǔ)存條件PLT數(shù)量沒有明顯變化的情況下，PLT的活化程度已經(jīng)發(fā)生了明顯的變化。

由于流通環(huán)節(jié)的問題，大部分情況下不可能在采血當(dāng)天將PLT輸注到患者體內(nèi)，因而采血當(dāng)天檢測(cè)的LDH含量不能反應(yīng)PLT輸注時(shí)LDH的含量。為了更好的反映PLT輸注時(shí)PLT的活化程度，最好的是檢測(cè)PLT輸注時(shí)單采PLT中的LDH含量，反映單采PLT的活化程度。但是在我們的實(shí)驗(yàn)過程中，由于單采PLT已經(jīng)發(fā)往臨床，無法留取到PLT輸注時(shí)的樣本，因此，通過SHINOW 9.0現(xiàn)代血站管理信息系統(tǒng)查找患者輸注PLT的時(shí)間，我們采用22 ℃條件下留樣管檢測(cè)到的LDH含量來反映患者輸注PLT時(shí)的LDH含量，研究比較了采輸PLT中LDH差值與輸注前后PLT相關(guān)參數(shù)（MPV、PCT、PDW差值）的相關(guān)性。我們發(fā)現(xiàn)采輸PLT中LDH與患者輸注前后PCT差值存在明顯相關(guān)關(guān)系（相關(guān)系數(shù)是0.476，P值是0.005，相關(guān)性具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義）。PCT是反映血小板功能的主要指標(biāo)，與血小板輸注的治療效果和預(yù)后判斷有顯著相關(guān)性，可以作為臨床判斷的參考指標(biāo)，為臨床診斷、療效和預(yù)后判斷的參考指標(biāo)[17]。同時(shí)有研究表明[18]，血小板輸注有效時(shí)，PCT參數(shù)升高。

因此，從血小板本身質(zhì)量角度，采輸PLT中LDH差值可以作為反映PLT輸注療效的敏感指標(biāo)。