NGAL、KIM-1檢測在早產兒窒息后腎功能損傷診斷的臨床應用分析

吳亞臻，寧 方，賀春蘭

（青海大學附屬醫院，1.新生兒重癥醫學科；2.檢驗科，青海 西寧 810000）

據WHO統計全球由于早產而死亡的新生兒占28%。在一些發達國家，有5%～7%的新生兒為早產兒[1]，我國早產率呈上升趨勢，而早產兒病死率在12.7%～20.8%。整體呈現胎齡越小、體重越低，早產兒的病死率就越高[2]。據大量研究發現，早產兒病死率與窒息后腎功能損傷密切相關[3-5]。目前，已有許多生物學標志物應用于急性腎損傷(acute kidney injury，AKI)的早期診斷[6]。國內多以血肌酐（serum creatinine，SCr）改變診斷腎損傷，而新生兒一般在出生后48小時發生SCr改變，難以反映早期腎損傷情況；而常規的腎活檢由于創傷性大，不適于早產兒。故臨床上需探索更為可靠的生物學標志物來對早產兒窒息后AKI進行早期識別進而更早的指導臨床采取有效措施降低早產兒病死率。因此本次的研究主要針對窒息早產兒腎功能損傷時，檢測尿中NGAL、KIM-1水平及其SCr，并進行相關性分析，探索其水平變化與早產兒窒息后AKI之間的關系。

1 材料與方法

1.1 研究對象

抽取2017年1月～2018年12月胎齡28～36周，出生時1分鐘及5分鐘Apgar評分≤7分（0-3分為重度窒息，4～7分為輕度窒息），伴有AKI，于我院產科出生的早產兒30例為研究組。隨機抽取同期住院的胎齡28～36周，出生時1分鐘及5分鐘Apgar評分均為8-10分的無并發癥的早產兒30例為對照組。2組患兒在性別、胎齡、出生體質量方面比較差異無統計學意義(P＞0.05)，具有可比性。詳見表1。

新生兒窒息診斷標準：根據全國新生兒窒息多器官損害臨床診斷多中心研究協作組2016年通過的《新生兒窒息多器官損害的臨床診斷標準》[7]。AKI的診斷標準：參照2012年KDIGO《AKI臨床實踐指南》AKI的診斷標準[8]。

排除標準：先天性心臟病（例如室間隔缺損或者房間隔缺損）患兒以及由于其他解剖結構異常（例如膈疝或肺發育不良）造成肺動脈高壓的患兒將有產傷、創傷性顱內出血、顱骨骨折、遺傳代謝性疾病、先天性畸形及有應用氨基糖甙類抗生素史者不予納入研究。

表1 一般情況比較（±s）

表1 一般情況比較（±s）

組別 n 性別 出生時胎齡（d）出生體質量（Kg）男 女對照組 30 16(53.33)14(46.67) 238.5±9.7 2.36±0.36觀察族 30 16(53.33)14(46.67)235.9±10.2 2.24±0.38 t/x2 2.245 1.012 1.256 P 0.417 0.316 0.214

1.2 研究方法

兩組入選者均用集尿袋收集出生后首次或24小時內、72小時尿液各5～10 ml，使用ELISA方法檢測尿NGAL、KIM-1水平；在獲得尿液同時抽取股靜脈血2.0 ml，分離血清，采用全自動生化儀檢測SCr。

1.3 統計分析

使用SPSS 19.0及MedCalcl2.7軟件進行統計學分析。計量資料數據以均數±標準差（±s）表示，組間比較運用t檢驗或單因素方差分析；計數資料數據以百分率表示。組間比較運用x2檢驗；運用ROC曲線及曲線下面積(AUC)和Logistic回歸預測NGAL、KIM-1預測的敏感性和特異性情況。AUC在0.8～0.9為預測準確性佳，＞0.7為有臨床應用價值，＜0.7為預測能力差。根據其ROC曲線確定截斷值，并根據截斷值確定其靈敏度和特異度，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 2組早產兒不同時間腎功能相關指標水平變化。

經統計分析，兩組早產兒出生后24小時及72小時NGAL、KIM-1及Scr水平組間比較研究組明顯高于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表2。

2.2 各指標預測AKI患兒早期診斷的AUC、靈敏度、特異度及AUC的95%CI

尿N G A L、K i m-1預測窒息后急性腎損傷的 AUC 值分別為0.882（95%CI 0.651～0.850，P＜0.01）和0.879（95%CI 0.693～0.881，P＜0.01）(見表3)，當NGAL 預測早產兒窒息后AKI的臨界值為116 μg/L，靈敏度為89.6%，特異度為87%，尿Kim-1臨界值為3.27 ng/ml，靈敏度和特異度分別為86%和88%。

表2 2組早產兒出生24小時、72小時腎功能相關指標比較(±s)

表2 2組早產兒出生24小時、72小時腎功能相關指標比較(±s)

72小時NGAL（μg/mL） KIM-1（ng/mL） Scr（μmol/L） NGAL（μg/mL） KIM-1（ng/mL） Scr（μmol/L）研究組（n=30） 2.53±0.271 59.51±6.71 48.00±8.28 3.48±0.221 81.00±5.281 112.50±4.321對照組（n=30） 1.26±0.57 41.00±10.07 43.00±10.52 1.38±0.34 46.01±8.71 46.00±9.88 t 11.021 8.378 2.046 28.364 18.815 33.777 P 0.000 0.000 0.046 0.000 0.000 0.000組別 24小時

表3 各指標預測AKI患兒早期診斷的AUC、靈敏度、特異度、AUC的95%CI

3 結 論

新生兒窒息后AKI發生率最高達56%[9]，且AKI損傷程度與窒息嚴重程度緊密相關。而青海省位于中國西部，地處高原，平均海拔4000米以上，總面積72.23萬平方公里，常住人口583.42萬人，地廣人稀，屬于高原大陸性氣候，全年人口出生率14.67‰，早產、窒息、AKI的發生率高，28%的新生兒死因為早產。大量研究發現，早產兒病死率與窒息后腎功能損傷密切相關[10-11]。

目前NGAL和KIM-1被認為是AKI早期診斷中最有應用前景的早期生物標志物之一,對AKI的早期臨床診斷和評估具有重要的臨床價值。以往NGAL、KIM-1在臨床研究主要集中在心血管疾病、各種泌尿系統疾病所致急性腎損傷、體外循環術后急性腎損傷、糖尿病患者腎損傷等，研究對象以成人為主[12]。新生兒尤其是早產兒領域涉及極少。而NGAL、KIM-1在AKI發生早期其表達即有顯著增強的特點，在早期判斷腎小管或腎小球是否受損，明確腎臟受損的部位和程度，對早產兒窒息后AKI進行早期預測與診斷，指導患兒的治療具有重大臨床意義。

本研究緊扣青海地區窒息早產兒并發癥多，AKI高發的臨床特點，采取患兒尿液作為檢測標本，避免了有創操作對患兒身體損傷，更利于臨床推廣。根據本研究結果發現，當SCr值處于陰性范圍內，NGAL、KIM-1值卻顯著升高，提示NGAL、KIM-1用于早產兒窒息后AKI時與SCr具有良好的互補性。尿NGAL、KIM-1可較SCr提前24 ～48 h診斷AKI，可作為早期診斷窒息后早產兒AKI的指標，具有快速、敏感度、特異度高且較少受其他因素影響等優點。另外本項目利用ROC曲線及計算曲線下面積對尿中的NGAL、KIM-1水平在診斷早產兒窒息后腎功能損傷時的敏感性和特異性進行評價，為后續的NGAL、KIM-1與早期腎功能損傷關系的分析提供了完備的數據基礎。