南天仙子的質量標準研究

王月英

（烏海市檢驗檢測中心，內蒙古 烏海 016000）

1 儀器與試藥

1.1 儀器

AL204電子天平、101-1AS型干燥箱、BF5182C-1型進口馬弗爐、DM3000顯微鏡（萊卡）。

1.2 試藥

8批藥材樣品由課題組分別于2018年3月6日安徽省亳州（1號樣品）和3月13日貴州省荷花池（2號樣品）、5月28日陜西藥材公司（3.4.5號樣品）、12月15日廣西玉林（6、7號樣）/12月18日廣州清平等地市場調研時收集。廣天仙子對照藥材購自中國藥品生物制品檢定所，批號121478-200401。磷酸二氫鈉、羧甲基纖維素鈉、香草醛、正己烷、乙酸乙酯、冰醋酸、甲酸、石油醚（60～90℃）、硅膠G均為分析純。

2 方法與結果

2.1 雜質、水分、總灰分、石油醚浸出物測定

2.1.1 雜質

按照本品項下規定的方法，取樣品50 g，過藥典3號篩，篩下物為碎末，篩上物再檢出雜質，二者合并計為雜質。

2.1.2 水分按照中國藥典2015版四部

0823第二法測定、總灰分按照中國藥典2015版四部2302測定。

2.1.3 浸出物

由于該品種的有效成分尚不明確，無法進行其活性成分研究，為了進一步控制其內在質量，對該品種進行了浸出物總量的探索。參照進口藥材暫行標準中南天仙子項下的方法，用石油醚（60～90℃）在80℃和85℃水浴上加熱回流提取2 h、4 h、8 h（提取液無色），提取液揮干石油醚，在60℃烘0.5 h和1 h和105℃烘0.5小時進行考察，結果，在不同溫度和不同烘干時間烘干對浸出物影響不大，而不同提起時間和回流溫度對浸出物有一定的影響，故建立該品種的浸出物測定方法。取本品粉6 g（過四號篩），精密稱定，置索氏提取器中，加石油醚（60～90℃）適量，精密量取，回流提取至石油醚無色，將石油醚提取液轉移至已恒重的蒸發皿中，揮盡石油醚，于60℃烘30分鐘，放冷后稱重，計算石油醚浸出物量，以上雜質、水分、總灰分、浸出物測定結果見表1。

2.2 經驗鑒別

該種子表面具眾多粘液化表皮毛，含粘液質，粘液質遇水釋放粘液，故建立水試鑒別。用水濕潤后，即粘成一片，用手揉捏則越來越粘，扯之有白色膠絲出現。結果見圖1。

表1 雜質、水分、總灰分、浸出物測定結果

圖1 南天仙子經驗鑒別圖

2.3 顯微鑒別

本品為種子類藥材，種皮表皮細胞、下表皮細胞、油滴、子葉薄壁細胞、簇晶、淀粉粒等為主要特征，故建立粉末組織特征鑒別。結果見圖2。

圖2 南天仙子顯微鑒別圖

2.4 TLC鑒別

2.4.1 薄層色譜條件

采0.1 mol/L磷酸二氫鈉的羧甲基纖維素鈉溶液為粘合劑的用硅膠G薄層板，以正己烷-乙酸乙酯-甲酸（8:1:0.2）為展開劑，以香草醛硫酸試液顯色觀察斑點。

2.4.2 供試品溶液制備

精密稱取本品粉末1 g，加石油醚（60～90℃）20 ml，浸泡3 h，濾過，揮去石油醚，提取物用乙酸乙酯2 ml溶解，作為供試品溶液。

2.4.3 對照藥材溶液制備

精密廣天仙子對照藥材1 g,同供試品制備方法制備對照藥材溶液。

2.4.4 試驗方法與結果

吸取供試品溶液和對照藥材溶液各2～5 μl,分別點于0.1mol/L磷酸二氫鈉的羧甲基纖維素鈉溶液為粘合劑的用硅膠G薄層板上，以正己烷-乙酸乙酯-甲酸（8:1:0.2）為展開劑展開8 cm以上，取出，晾干，噴以香草醛硫酸試液顯色，加熱至斑點清晰，結果樣品色譜中，在于廣天仙子（南天仙子）對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點（主斑點Rf值0.63，圖3）。

圖3 南天仙子薄層色譜圖

圖3中4為對照藥材,1.2.3.5.6.7.8.9為樣品。

2.4.5 薄層鑒別結果

該品種活性成分尚不明確，因此對照藥材對照鑒別為唯一選擇，參照進口藥材暫行標準中南天仙子的薄層條件，通過不同提取方法（超聲和浸泡）、不同提取時間（浸泡3小時和超聲0.5小時）、不同薄層板（預制硅膠G和自制0.1 mol/L磷酸二氫鈉的硅膠G）、不同展開劑和比例（正己烷：乙酸乙酯：冰醋酸與正己烷：乙酸乙酯：甲酸）、不同點樣量（2～10 μl）、不同展距（8～16 cm）進行實驗考察。結果，加石油醚（60～90℃）浸泡3小時，以0.1 mol/L磷酸二氫鈉的羧甲基纖維素鈉溶液為粘合劑的硅膠G薄層板為載體，以正己烷-乙酸乙酯-甲酸（8:1:0.2）為展開劑進行展開的斑點清晰，分離度較好。

3 討 論

（1）關于南天仙子鑒別情況看，收集的8批樣品沒有顯著區別，種子形狀，大小，顏色、味道及拉絲程度基本一致。不同地區的南天仙子薄層鑒別斑點在同一條件下斑點的顏色稍有些差異，但數量一致，在實驗過程中，在規定范圍內調整其點樣量就能得到理想的色譜圖。

（2）實驗中對南天仙子樣品進行甲苯法和烘干法進行考察水分含量，結果兩種方法測得的水分值較接近，說明該品種基本不含揮發性成分，再考慮甲苯的毒性，本文選擇了烘干法測定水分含量。

（3）南天仙子藥材具有遇水釋放粘液質特性，因此浸出物浸出溶劑的選擇上未考慮水和醇，而選擇石油醚作為提取溶劑進行考察，并建立本文中的浸出物測定方法。

（4）小結：本文對八批南天仙子藥材樣品進行了水分、雜質、總灰分、石油醚浸出物等考察，并對其進行經驗鑒別和顯微鑒別，還以廣天仙子（南天仙子）作為對照藥材進行了TLC鑒別，建議南天仙子的質量標準確定為：雜質不得過1%，水分不得過9.0%，總灰分不得過10.0%，石油醚浸出物不得少于18.0%。該實驗方法簡便、快捷、可靠，能有效鑒別和評價南天仙子質量。