血清線粒體DNA水平在重癥感染診斷的作用

徐美玲，容永璋，林華新，陸小蒟

（江門市人民醫院，廣東 江門 529000）

膿毒癥（sepsis）引起多器官功能障礙綜合征（multiple organ dysfunction syndrome，MODS）是危重患者死亡的主要原因之一。目前研究表明MODS的發生與發展主要是由于受損細胞氧利用失衡導致[1-3]。由于氧氣在體內主要利用者是線粒體，線粒體可能在膿毒癥發病過程中扮演重要角色。國外研究指出：感染性休克患者在入住ICU的24小時內，骨骼肌線粒體功能障礙的程度與疾病的嚴重程度有關。近年研究證明，細胞損傷后釋放線粒體碎片進入血液循環能激活中性粒細胞[4-5]。因此重癥感染時線粒體功能破壞，可能最終導致多器官功能障礙。

1 資料和方法

1.1 一般資料

取2016年11月～2018年6月江門市人民醫院ICU收治的膿毒癥患者56例，根據疾病嚴重程度分膿毒癥組和膿毒性休克組。膿毒癥組28例（男14例、女14例），膿毒性休克組28例（男15例、女13例）。納入標準：1、符合歐洲重癥醫學會發布膿毒癥3.0定義及診斷標準；2、入組者經過相關檢查最終得到確診。排除標準：服用刺激炎癥介質釋放的藥物 ；合并嚴重凝血功能障礙、免疫系統疾病；住院時間小于12小時。取同期入院健康體檢者28例（男14例、女14例），設為對照組。本研究經醫院倫理委員會批準通過。

1.2 方法

根據納入標準，病例入組后收集性別、年齡、感染部位等資料。入組12小時內采集空腹靜脈血15 ml分作三份，第一份采用RT-PCR技術測定血清mtDNA水平；第二份采用血液生化分析儀行血常規、急診生化；第三份利用膠體金法檢測CRP及PCT水平。同時應用DoCare重癥監護系統記錄患者生命體征，行APACHE II評分。

1.3 統計分析

采用SPSS 23.0軟件分析。計量資料以均數±標準差（±s）表示，兩組計量數據分析用的獨立樣本t檢驗；P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

實驗組（膿毒癥組與膿毒性休克組）與對照組年齡、血清mtDNA水平、PCT、CRP、白細胞及APACHE Ⅱ比較，其中血清mtDNA水平、PCT、CRP、白細胞及APACHE Ⅱ差異具有統計學意義(P＜0.05)。而膿毒癥組與膿毒性休克組比較，血清mtDNA水平、PCT及APACHE Ⅱ

差異具有統計學意義(P＜0.05)。

表1 兩組比較（±s）

表1 兩組比較（±s）

注：*與實驗組相比，P＞0.05；#與實驗組相比，P＜0.05。**膿毒癥組與膿毒性休克組相比，P＞0.05；##膿毒癥組與膿毒性休克組相比，P＜0.05

組別 年齡(歲) mtDNA（pg/ml） PCT(ng/ml) CRP(mg/L) 白細胞(×109/L)APACHE Ⅱ(分)對照組 62.0±6.5* 275.3±13.9# 0.2±0.15# 3.8±1.5# 7.3±2.4# 4.3±1.2#實驗組 膿毒癥組 63.0±17.0 506.1±98.3 11.6±5.7 41.6±9.5 20.3±3.4 18.4±2.6膿毒性休克組 62.0±19.0** 1504.1±34.7## 54.9±32.3## 45.9±14.4** 21.8±4.7** 24.8±4.2##

3 討 論

膿毒癥病因多樣，包括嚴重創傷、感染以及在此過程中出現的循環障礙、再灌注損傷等，以上均可導致MODS發生。研究指出：受損細胞氧利用失衡是膿毒癥發生與發展關鍵因素之一[6]。感染時，機體中的內毒素能直接損害線粒體功能，抑制電子傳遞。在重癥感染早期，線粒體誘生型一氧化氮（NO）合酶激活，大量NO產生，抑制線粒體功能；同時線粒體產生大量活性氧，直接損害膜脂、脂蛋白，引起線粒體功能障礙。創傷患者，由于創傷后大量細胞破裂，釋放到循環中的mtDNA特異性結合中性粒細胞內的TLR9，通過MAPK信號轉導通路活化中性粒細胞，導致遠隔器官組織的損傷，而激活的中性粒細胞引起系統性炎癥，是創傷后無菌性SIRS的重要啟動機制之一。臨床研究發現重度創傷病人血清mtDNA平均濃度是健康對照組的1000倍[7-8]。

臨床中應用PCT、CRP等指標，對感染性疾病診斷具有重要意義[9-10]。此外，APACHE Ⅱ評分是評估患者病情的指標之一。本研究中，實驗組mtDNA水平、PCT、APACHEⅡ評分、CRP及白細胞均高于對照組，提示以上指標對于診斷機體處于感染狀態有臨床價值。而在膿毒性休克組及膿毒癥組對比中，mtDNA水平、PCT及APACHE Ⅱ評分的差異具有統計學差異，其中mtDNA水平在膿毒性休克組明顯升高，提示患者器官功能損傷越重，組織細胞損傷越重，血清mtDNA水平越高。

本研究結果提示聯合血清mtDNA水平、PCT及APACHEⅡ評分對評估膿毒癥患者病情嚴重程度具有價值。但鑒于本實驗采樣標本較少，實驗結果存在偏倚，下一步研究方向可通過擴樣本量進一步證明線粒體DNA水平能評估患者的病情與預后。