杏鮑菇多糖抗運動性疲勞機制*

向超宗，楊小慶

（1.重慶大學城市科技學院，重慶 402167；2.重慶工商職業學院智能制造與汽車學院，重慶 401520）

運動員在日常訓練或重大賽事中，都要進行長時間高強度的運動，不可避免地會引起疲勞，為了防止長期過度疲勞給運動員造成不可逆的身體損傷，使其保持良好的運動狀態，緩解或消除疲勞已成為一項重要課題[1]。近年來，人們不斷尋找具有抗疲勞作用的活性物質，已經研發出多種相關的功能性食品、藥品、保健品，探索更加安全、可靠、有效的產品成為這一領域的熱點之一。研究食用菌多糖的抗運動性疲勞作用，分析其作用機制，為開發具有抗疲勞功效的產品提供了理論和試驗依據。

1 概述

1.1 杏鮑菇多糖

杏鮑菇（Pleurotus eryngii），口味鮮美，營養豐富，在日常生活中廣受歡迎[2]。杏鮑菇中富含蛋白質、糖類、膳食纖維和礦物質元素等營養物質，其中多糖含量較高，顏明娟等[3]測得其含量為6.3%；范文秀等[4]測定結果為5.91%。杏鮑菇多糖具有多種生理活性，如降血脂、抗病毒等，此外還有清除自由基、促進腸胃消化的功能[2]。

1.2 運動性疲勞

運動性疲勞是指在運動過程中或運動后產生的身體疲勞狀況，導致身體機能不能維持在特定水平或不能維持原本的運動強度[5-6]。研究發現，運動性疲勞的發生機制有以下4種：疲勞物質的大量積累；能源物質的過度消耗；相關物質生化狀態的改變；代謝調控失調。抗疲勞就是延緩產生疲勞或加快消除疲勞[5-7]。有效抗疲勞能夠幫助運動員調整身體狀況，提升運動效果和運動能力，所以，對抗運動性疲勞機制的研究十分必要。

2 材料與方法

2.1 材料試劑及儀器

試劑：杏鮑菇，上海農科院食用菌研究所提供。血乳酸含量（LA）、超氧化物歧化酶（SOD）、肝糖原含量（HG） 測定試劑盒，南京建成生物工程研究所提供。

儀器：DGSY-Ⅲ電熱恒溫水浴鍋，北京市意成科技開發公司；FA2004分析天平，上海上平儀器有限公司；TGL-16A高速臺式離心機，上海安亭科學儀器廠；FD-1A-50冷凍干燥機，北京博醫康技術公司；JD-XSC型小鼠恒溫游泳池，上海繼德教學實驗器械廠；752型紫外可見光分光光度計，上海光譜儀器有限公司；DY89-Ⅱ型電動玻璃勻漿機，寧波新芝生物科技股份有限公司。

2.2 方法

2.2.1 多糖的提取

稱取新鮮杏鮑菇3 kg～5 kg，記錄準確質量，預處理后切成薄片，加入20倍體積分數為70%的乙醇，煮3 h，注意攪拌；擠壓使液體濃縮至2 000 mL，過濾，取濾液加入4倍體積95%乙醇，沉淀；抽濾，取沉淀物溶于1 000 mL蒸餾水中，用Sevage法去蛋白；取上層液加入4倍體積95%乙醇，抽濾后將沉淀物在低溫下干燥，得杏鮑菇多糖[8-9]。

2.2.2 分組與給藥

將32只小鼠隨機分為4組，每組8只，分別為對照組、低劑量組、中劑量組、高劑量組。對照組以生理鹽水灌胃，其余3組以杏鮑菇的多糖溶液灌胃，劑量分別為 50 mg·kg-1d-1、100 mg·kg-1d-1、200 mg·kg-1d-1，連續灌胃 15 d[9]。

2.2.3 爬桿試驗

②強化管理機制，實施精細化管理。編制《北京市生態清潔小流域建設管理辦法》，規范全過程管理；編制《生態清潔小流域制圖手冊》《水土保持概估算編制規定》，規范前期工作；編制《北京市生態清潔小流域施工質量評定標準》，規范施工管理；編制《北京村鎮治污設施運行管理指導意見》，規范后期管護。強化農民參與機制，制訂《生態清潔小流域建設農民參與指導意見》，明確農民是生態清潔小流域建設主體、管理主體、受益主體，促進農民從“項目前期、工程實施、后期管護”三個環節全過程參與生態清潔小流域建設工作，實現了水土保持工作“零距離”服務農民。

各組末次灌胃30 min后，將小鼠放在有機玻璃棒上，使其處于肌肉靜力緊張狀態，記錄小鼠從放上玻璃棒開始至滑落的時間，第3次滑落后終止計時，以3次累計時間記為爬桿時間。

2.2.4 負重游泳試驗

各組末次灌胃30 min后，在小鼠尾部系上5%體重的鉛墜，游泳箱中進行負重游泳，水深35 cm，水溫（25±1.0）℃[10]，以人工驅趕小鼠不停游泳直至小鼠頭部完全沒入水中，且8 s～10 s不出水面為體力耗竭的判斷標準[11]。記錄小鼠從開始游泳至力竭的時間。

2.2.5 血清生化指標測定

迅速撈出游泳力竭的小鼠，眼球取血，分離血清，分別按試劑盒法結合比色法測LA含量、SOD活性。

2.2.6 肝糖原含量測定

取血后，取出小鼠的肝臟，用生理鹽水漂洗3次，濾紙拭干后準確稱量100 mg，加入5%三氯醋酸 （TCA）8 mL，制備成組織勻漿，3 500 r·min-1離心15 min，取上清液加入95%的乙醇4 mL，混勻后放置過夜使沉淀完全。然后3 500 r·min-1離心15 min，棄上清，放置10 min，溶于2 mL蒸餾水，蒽酮-比色法測HG含量。

2.2.7 數據處理

試驗數據均以平均數±標準差表示。采用SPSS 16.0對數據進行統計處理，多組間數據比較方差分析，2組間數據比較采用t檢驗，P＜0.05時有顯著性差異。

3 結果

3.1 杏鮑菇多糖對小鼠爬桿時間的影響

杏鮑菇多糖對小鼠爬桿時間的影響見表1。

表1 杏鮑菇多糖對小鼠爬桿時間的影響Tab.1 Effect of Pleurotus eryngii polysaccharide on the time of mouse climbing stick

由表1可知，灌胃杏鮑菇多糖的3個試驗組均比灌胃生理鹽水的對照組小鼠的爬桿時間長，且有顯著性差異（P＜0.05），杏鮑菇多糖劑量越大，小鼠的爬桿時間的增加越明顯，高劑量對小鼠爬桿時間的增長最大，延長率為324.5%。由此可見，杏鮑菇多糖能夠延長小鼠爬桿時間，緩解疲勞。

3.2 杏鮑菇多糖對小鼠力竭時間的影響

杏鮑菇多糖對小鼠力竭時間的影響見表2。

表2 杏鮑菇多糖對小鼠力竭時間的影響Tab.2 Effect of Pleurotus eryngii polysaccharide on the time of exhaustion in mice

由表2可知，相較于對照組而言，灌胃杏鮑菇多糖的試驗組小鼠的力竭游泳時間均有所延長，隨著杏鮑菇多糖劑量的增加，小鼠的游泳時間也依次增加，低劑量對游泳時間的增加效果不明顯，延長了33.2%，高劑量能顯著增加小鼠游泳時間，延長率達120.6%（P＜0.01）。由此可見，杏鮑菇多糖能夠延長小鼠游泳時間，有一定的抗疲勞效果。

3.3 杏鮑菇多糖對血清生化指標的影響

杏鮑菇多糖對血清生化指標的影響見表3。

表3 杏鮑菇多糖對血清生化指標的影響Tab.3 Effect of Pleurotus eryngii polysaccharide on serum biochemical indicators

由表3可知，與對照組相比，灌胃杏鮑菇多糖的3個試驗組小鼠的LA含量降低，SOD活性增高，其中LA含量下降的程度隨杏鮑菇多糖劑量的增加而增大，說明杏鮑菇多糖能有效降低LA含量；SOD活性的升高隨杏鮑菇多糖劑量的增加越來越明顯，說明杏鮑菇多糖對提高SOD活性有一定效果。

3.4 杏鮑菇多糖對肝糖原含量的影響

杏鮑菇多糖對肝糖原含量的影響見表4。

表4 杏鮑菇多糖對肝糖原含量的影響Tab.4 Effect of Pleurotus eryngii polysaccharides on liver glycogen content

由表4可知，與對照組相比，試驗組小鼠HG含量均明顯增加，HG含量隨杏鮑菇多糖劑量的增加而升高，高劑量組效果最為顯著。由此可見，杏鮑菇多糖有助于提高體內HG含量水平。

4 結論

運動耐力的下降是疲勞最主要的表現，通常可以通過爬桿時間和游泳力竭時間的長短表示運動耐力的強弱[12]。在爬桿試驗和游泳試驗中，低劑量組、中劑量組、高劑量組均比對照組小鼠的爬桿和游泳時間長，以高劑量組時間延長最為明顯。該結果表明，杏鮑菇多糖能夠增加小鼠的爬桿和力竭時間，增強運動耐力。

長時間運動會導致機體缺氧，從而進行無氧代謝，產生大量乳酸。乳酸的堆積會破壞內環境酸堿平衡，引起氫離子濃度升高，pH下降，并對肌肉收縮力和ATP的生成造成影響，是產生運動性疲勞的主要原因之一[11-12]。試驗中，試驗組小鼠的乳酸含量與對照組相比降低明顯，表明杏鮑菇多糖能夠減少乳酸的堆積，對于消除疲勞有積極作用。在運動過程中，還會產生大量的氧自由基等代謝產物，氧自由基增多、脂質過氧化反應增強，造成對組織細胞的損傷，引起運動性疲勞。SOD是一種能夠有效清除自由基的特異性抗氧化酶，其活力的增強能加快自由基的清除，有助于阻斷脂質過氧化，修復細胞，緩解疲勞[13]。試驗組SOD活性高于對照組，表明杏鮑菇多糖能提高SOD活性，保護機體免受運動性損傷。

糖類是主要能源物質，劇烈運動時，血糖水平迅速降低，葡萄糖氧化供能過程受阻，此時主要依靠肌糖原和肝糖原分解產生葡萄糖，釋放入血液中，維持血糖濃度[5]。當血糖濃度急劇下降時，肝糖原和肌糖原被大量消耗，不能滿足能量需求，就會產生疲勞。高強度運動時，肝糖原可以為肌肉和神經系統供能，這可能是肝糖原含量增加能夠抗疲勞的原因。試驗中試驗組小鼠的肝糖原含量明顯比對照組高，說明杏鮑菇多糖對于維持運動力竭后肝糖原水平有一定作用。

綜上所述，杏鮑菇多糖的抗運動性疲勞機制可能是通過調整體內激素代謝，清除氧自由基等代謝產物，減少乳酸的積累，增加肝糖原的儲備，將疲勞對機體的損傷程度降至最低。故杏鮑菇多糖可以增強運動耐力，提升其抗疲勞能力，使其自身素質和運動能力得以提升，發揮出最佳水平。