顯微鏡血涂片及手工草酸胺法在血小板減少患者結果復核中的應用

侯蒙

近年來，隨著科技的發展與應用，各類全自動化監測儀器不斷更新，監測性能與標本檢驗質量密切相關，而穩定的檢測系統是確保檢驗質量的基礎。目前，血液分析儀是實驗室常用檢測儀器，BC-6900全自動血液分析儀是深圳邁瑞公司生產的高精密血液檢測儀器之一，分為體液、血液2種模式，可對血常規進行有效檢測[1]。臨床實踐發現，目前多數全自動血液分析儀以電阻抗法原理對血小板進行檢測，根據脈沖信號強弱對血小板數值進行歸類收集，在臨床應用中具有重要價值[2]。對于腫瘤化療、需血小板輸注或血小板減少患者而言，血小板計數尤為重要，可直接為臨床診斷、治療方案選擇提供指導依據，故血液分析儀檢測結果準確性尤為重要[3]。鑒于此，本研究選取血小板減少患者178例，探究顯微鏡血涂片、手工草酸胺法在邁瑞BC-6900全自動血液分析儀血小板結果復核中的應用效果，現報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 經醫院醫學倫理委員會審批，選取我院2017年7月至2019年7月收治的血小板減少患者178例，其中男98例，女80例；年齡22～74歲，平均年齡(45.69±8.55)歲；病因：遺傳性疾病69例，獲得性疾病109例；合并癥：高血壓36例，糖尿病25例，慢阻肺13例。

1.2 選例標準

1.2.1 納入標準 血液中血小板計數＜100×109/L；輕者表現為皮膚淤斑、出血點，鼻衄、牙齦滲血，嚴重者表現為黑便、嘔血、腦出血及血尿；簽署本研究知情同意書。

1.2.2 排除標準 血液采集依從性差者；血液標本存放不合格者。

1.3 方法

1.3.1 儀器與試劑 BC-6900全自動血液分析儀(產自深圳邁瑞軟件技術有限公司)、SC-120全自動推片染色機(產自深圳邁瑞軟件技術有限公司)、olympus內置光源顯微鏡(產自北京普瑞賽司儀器有限公司)。

1.3.2 樣本采集 根據世界衛生組織《靜脈采血的最佳操作》標準，采集178 例患者肘靜脈血，EDTA-K2抗凝。

1.3.3 檢測方法 BC-6900全自動血液分析儀：校準品校準儀器，重復10次，取其平均值，計算紅細胞計數(RBC)、白細胞計數(WBC)、血紅蛋白(Hb)、血小板計數(PLT)空白計數相對偏倚，相對偏倚＝(均值-靶值)/靶值×100%；采用鞘流阻抗法對紅細胞對應電脈沖個數進行測量，獲取血小板數目；利用血小板直方圖，獲取血小板各種參數；光學法糾正血小板計數；顯微鏡血涂片：利用SC-120全自動推片染色機，45°制成3張符合質控標準血涂片，由高資歷經驗豐富血液科檢驗師進行血小板形態觀察與結果估測，將顯微鏡血涂片作為參照，與全自動血液分析儀結果進行一致性分析；手工草酸胺法：血小板計數根據第三版《全國臨床檢驗操作規程》進行操作，并以手工草酸胺法為參照，與全自動血液分析儀結果進行一致性分析。

1.4 觀察指標 觀察邁瑞BC-6900全自動血液分析儀準確度試驗結果；分析顯微鏡血涂片、手工草酸胺法與邁瑞BC-6900全自動血液分析儀一致性。

1.5 統計學方法 采用SPSS 24.0 軟件進行分析，一致性采用Kappa檢驗，P＜0.05即差異有統計學意義。

2 結果

2.1 邁瑞BC-6900全自動血液分析儀準確度試驗結果(表1) RBC、WBC、Hb、PLT 4個檢測項目相對偏倚符合檢測行業標準。

表1 邁瑞BC-6900全自動血液分析儀準確度試驗結果

2.2 一致性分析 將顯微鏡血涂片、手工草酸胺法血小板計數分別與邁瑞BC-6900全自動血液分析儀進行比較，顯微鏡血涂片與血液分析儀差值均數為7.04×109/L，差值標準差為12.38×109/L，95%范圍(7.04±1.89)×12.38×109/L；手工草酸胺法與血液分析儀差值均數為2.15×109/L，差值標準差為12.98×109/L，95%范圍(2.15 ±1.89)×12.98×109/L；顯微鏡血涂片與手工草酸胺法差值標準差為6.41×109/L，差值標準差為11.91×109/L，95%范圍(6.41±1.89)×11.91×109/L，顯微鏡血涂片、手工草酸胺法與邁瑞BC-6900全自動血液分析儀血小板計數具有良好一致性。

3 討論

血小板減少是指血液中PLT＜100×109/L，多見于血液性疾病、放化療損傷、風濕免疫病、藥物相關血小板減少等[4]。目前，臨床主要通過病因治療，并及時進行血小板輸注支持，而準確檢測PLT對臨床對癥治療具有重要指導意義。

目前，PLT作為血液分析常規項目，主要采用血液分析儀檢測，BC-6900全自動血液分析儀是利用熒光技術、激光流式細胞術，將血液中各細胞、細胞中核酸含量通過熒光強度表現出來，并結合細胞內信息或細胞體積進一步區分細胞類型，提高血液中原始細胞與幼稚細胞檢測準確度及精準識別度，有助于血液系統疾病早發現、及時對癥治療[5]。臨床工作中，為確保檢驗質量，在新儀器使用前，需進行系統檢測，評估并檢驗系統基本性能指標，以保證各項性能指標符合臨床檢驗使用要求[6]。本研究發現，邁瑞BC-6900全自動血液分析儀對RBC、WBC、Hb、PLT 4個檢測項目相對偏倚均符合檢測行業標準，表明邁瑞BC-6900全自動血液分析儀檢測系統性能指標符合臨床標準，可用于常規檢測工作。研究發現，全自動血液分析儀對PLT檢測存在一定不足，對血小板減少，尤其是極低值血小板標本，難以準確反映血小板真實數目，為確保檢測準確性，需結合其他方式對其結果進行復核[7]。相關研究報道，顯微鏡血涂片、手工草酸胺法與細胞成像系統進行血小板計數具有良好一致性[8]。顯微鏡血涂片是血液細胞學檢查基本方法，對各種血液疾病診斷存在較大價值，通過顯微鏡觀察可有效估測血小板數量，顯微鏡下可見纖維蛋白絲、巨大血小板、血小板假性聚集等，采用此法可及時糾正全自動血液分析儀血小板計數，確保獲取真實血小板結果[9]。手工草酸胺法是國際通用血小板計數方法，但需排除EDTA依賴性假性血小板減少癥，且此方法結合顯微鏡血涂片觀察可提升檢測血小板減少標本結果準確性，為全自動血液分析儀檢測結果提供重要補充[10]。本研究發現，顯微鏡血涂片、手工草酸胺法與邁瑞BC-6900全自動血液分析儀血小板計數具有良好一致性，可見顯微鏡血涂片、手工草酸胺法可用于全自動血液分析儀血小板結果復核，對提高檢測結果準確性具有重要作用。

綜上所述，顯微鏡血涂片、手工草酸胺法與邁瑞BC-6900全自動血液分析血小板結果具有良好一致性，可用于血小板結果復核，臨床應用中具有重要價值。