體內(nèi)藥物分析課程教學(xué)思考與探索

高毅華，王秀季，張立堅(jiān)

(廣東醫(yī)科大學(xué)儀器分析教研室，廣東 東莞 523808)

體內(nèi)藥物分析是藥物分析學(xué)的重要分支，是研究藥物及其代謝物在生物體內(nèi)數(shù)量及質(zhì)量變化規(guī)律的學(xué)科。通過對(duì)生物體內(nèi)藥物的分析，獲得藥物的吸收、分布、代謝、排泄等各種動(dòng)力學(xué)參數(shù)，以及藥物與生物大分子之間的相互作用和代謝產(chǎn)物、代謝方式、代謝途徑等信息，為臨床合理用藥和新藥開發(fā)提供科學(xué)的數(shù)據(jù)[1]。而《體內(nèi)藥物分析》課程則是藥學(xué)類藥物分析專業(yè)本科及研究生的必修課，是藥學(xué)類本科及非藥物分析專業(yè)研究生的選修課。由此可見，體內(nèi)藥物分析已成為醫(yī)藥專業(yè)院校一門重要的專業(yè)課。我校于2010年將其作為選修課面向藥學(xué)院藥學(xué)本科學(xué)生開設(shè)，先后選用李好枝主編的《體內(nèi)藥物分析》(第一版)和姚彤煒主編的《體內(nèi)藥物分析》作為主講教材。在過去的十年期間，作為課程建設(shè)負(fù)責(zé)人及主講老師，本人一直沒有間斷對(duì)該課程的教學(xué)思考與探索。現(xiàn)將本人這些年在課程建設(shè)與實(shí)踐中的教學(xué)體會(huì)總結(jié)如下。

1 教材選擇

教材是教學(xué)內(nèi)容和課程體系的集中體現(xiàn)，好的教材除了具有科學(xué)性、系統(tǒng)性之外，更應(yīng)具備教學(xué)實(shí)用性。體內(nèi)藥物分析課程開設(shè)之初，我們選擇李好枝主編的《體內(nèi)藥物分析》(第一版)作為課程教材。該教材內(nèi)容豐富，包括總論篇、分析方法篇、各論篇。總論分別從緒論、體內(nèi)藥物分析相關(guān)的基礎(chǔ)理論概述、生物樣品與樣品準(zhǔn)備、體內(nèi)藥物分析方法的建立與驗(yàn)證；分析方法篇?jiǎng)t以光譜、色譜、免疫分析法以及其它分析方法為順序展開；各論部分分別對(duì)幾大類藥物的體內(nèi)分析方法做了詳細(xì)闡述[2]。在經(jīng)歷了幾年的教學(xué)實(shí)踐后，我們發(fā)現(xiàn)這本教材在內(nèi)容上相對(duì)于36個(gè)理論課學(xué)時(shí)顯得偏多，基礎(chǔ)理論部分因與其它學(xué)科有交叉而顯得重點(diǎn)不突出。學(xué)生也感覺課本知識(shí)點(diǎn)多，跟其它學(xué)科交叉的內(nèi)容較多而使體內(nèi)藥物分析的重點(diǎn)和邏輯不容易掌握。2017年，我們重新選擇了姚彤煒主編的《體內(nèi)藥物分析》作為主講教材。這本教材主要包括基礎(chǔ)理論、分析方法以及體內(nèi)藥物分析方法在相關(guān)領(lǐng)域的應(yīng)用，在內(nèi)容上更加精簡，并突出了近年來體內(nèi)藥物分析在分析技術(shù)方面的新進(jìn)展。如以各種分析方法在教材中的排列順序?yàn)槔V法在分析方法中被首先介紹，突出了其在體內(nèi)藥物分析中的地位越來越重要。而高效液相色譜法與液-質(zhì)聯(lián)用技術(shù)作為色譜分析法第一部分，說明其在體內(nèi)藥物分析領(lǐng)域具有主導(dǎo)地位。目前，學(xué)生對(duì)該教材普遍感覺滿意，教師也能在規(guī)定的36學(xué)時(shí)內(nèi)完成重點(diǎn)內(nèi)容的講授。

2 理論教學(xué)

2.1 教學(xué)重點(diǎn)

體內(nèi)藥物分析雖是藥物分析的分支，但又不同于常規(guī)藥物分析，具有其自身特點(diǎn)。與常規(guī)藥物分析對(duì)象不同，體內(nèi)藥物分析以體內(nèi)藥物及其代謝物、內(nèi)源性物質(zhì)作為生物樣品中的分析對(duì)象，被分析成分具有含量少、背景復(fù)雜的特點(diǎn)。因此，體內(nèi)藥物分析對(duì)方法學(xué)研究的要求更高。例如，在生物樣品的預(yù)處理過程，由于被測(cè)藥物本身含量較低，既要去除共存物干擾的影響，還應(yīng)使被測(cè)組分在預(yù)處理過程中盡量沒有損失；而分析方法的選擇則需要滿足選擇性好、靈敏度高等特點(diǎn)。顯然，很多適合于常規(guī)藥物分析的預(yù)處理技術(shù)與靈敏度低、選擇性差的分析方法都不適用于體內(nèi)藥物的分析。因此，我們的教學(xué)重點(diǎn)傾向于強(qiáng)調(diào)適合體內(nèi)藥物自身特點(diǎn)的生物樣品預(yù)處理技術(shù)以及分析方法的建立。在分析方法的建立以及各論的講授過程中，我們將重點(diǎn)放在各種分析方法的適用對(duì)象以及分析條件選擇。根據(jù)近年來分析方法的應(yīng)用廣泛程度，我們對(duì)色譜及色譜聯(lián)用技術(shù)、免疫學(xué)分析方法做重點(diǎn)講授，突出了近年來體內(nèi)藥物分析的技術(shù)發(fā)展方向。針對(duì)不同的應(yīng)用領(lǐng)域，我們則從體內(nèi)藥物分析的特點(diǎn)和分析目的兩方面讓學(xué)生理解這門課程在實(shí)際應(yīng)用中需要注意的問題。

體內(nèi)藥物分析與前期課程儀器分析的聯(lián)系也十分緊密，它是儀器分析對(duì)生物體內(nèi)微量藥物測(cè)定的應(yīng)用，是建立可靠的微量體內(nèi)藥物的測(cè)定方法。在涉及儀器分析的分析方法講授中，我們盡量避免“炒剩飯”，根據(jù)體內(nèi)藥物分析的特點(diǎn)展開理論內(nèi)容。如分析方法部分的色譜、光譜法與儀器分析的相關(guān)知識(shí)有交叉，我們對(duì)儀器的構(gòu)造及基本原理只做簡單的歸納總結(jié)，把教學(xué)重點(diǎn)放在與實(shí)驗(yàn)條件優(yōu)化相關(guān)的內(nèi)容上，突出體內(nèi)藥物分析的應(yīng)用性。這些在色譜分離條件的選擇、紫外分光光度法中利用計(jì)算分光光度法去除干擾等內(nèi)容的講授中都有體現(xiàn)。

2.2 教學(xué)模式

在理論課教學(xué)過程中，我們結(jié)合體內(nèi)藥物分析學(xué)科特點(diǎn)和藥學(xué)專業(yè)學(xué)生的學(xué)習(xí)目的，采用多種教學(xué)模式相結(jié)合的方式推進(jìn)教學(xué)進(jìn)度，獲得了較好的教學(xué)效果。

首先，體內(nèi)藥物分析是在臨床治療藥物監(jiān)測(cè)和制劑生物利用度測(cè)定的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的綜合學(xué)科，并隨著分析技術(shù)的不斷發(fā)展逐漸與臨床藥理學(xué)聯(lián)系緊密，成為研究藥物體內(nèi)過程的基礎(chǔ)方法和手段[3]。體內(nèi)藥物分析內(nèi)容不但涉及大量的先修課程儀器分析的相關(guān)知識(shí)，還要求學(xué)生對(duì)不同藥物的化學(xué)結(jié)構(gòu)、理化性質(zhì)和光譜學(xué)特征有一定的了解，并熟悉臨床藥理學(xué)、生物藥劑學(xué)等相關(guān)理論。如果學(xué)生對(duì)這些基礎(chǔ)知識(shí)掌握薄弱，勢(shì)必導(dǎo)致在體內(nèi)藥物分析課程學(xué)習(xí)中感覺難度大，容易產(chǎn)生疲憊心理，造成學(xué)習(xí)積極性受挫。而作為課堂活動(dòng)組織者和講授者的教師若忽略這些問題，一味堅(jiān)持傳統(tǒng)的“填鴨式”教學(xué)，自顧完成個(gè)人理論課堂教學(xué)工作量，學(xué)生很難從中收益，教學(xué)效果也較差。對(duì)此，我們采用師生課堂互動(dòng)模式，通過課堂提問考察學(xué)生的掌握程度，這種模式不僅讓老師了解學(xué)生的學(xué)習(xí)程度，還能提高學(xué)生的注意力，調(diào)動(dòng)學(xué)生的學(xué)習(xí)積極性。例如，教師在緒論中的講授中對(duì)涉及的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)等相關(guān)名詞以及分析方法的評(píng)價(jià)參數(shù)等知識(shí)進(jìn)行課堂提問，促進(jìn)了學(xué)生對(duì)整章內(nèi)容的理解。

其次，以問題為中心的PBL(Problem-Based Learning)教學(xué)模式在近年來的高等醫(yī)學(xué)教育中頗受重視[4]。該教學(xué)模式強(qiáng)調(diào)教師對(duì)學(xué)生進(jìn)行啟發(fā)式教育，從而引導(dǎo)學(xué)生主動(dòng)學(xué)習(xí)。我們也就此進(jìn)行了嘗試。教材第三章的關(guān)于分析方法建立與評(píng)價(jià)的內(nèi)容是體內(nèi)藥物分析的重要章節(jié)，也是歷屆同學(xué)感覺最難理解的部分。該部分內(nèi)容需具有一定的分析儀器使用經(jīng)驗(yàn)才會(huì)被深刻理解，對(duì)只有本科三年學(xué)習(xí)經(jīng)歷的學(xué)生來說難度較大。為了讓學(xué)生充分了解方法建立的過程，教師先給出待檢測(cè)藥物，讓學(xué)生通過文獻(xiàn)查閱總結(jié)出所有有關(guān)該藥物的檢測(cè)方法。其后再將學(xué)生分成不同小組，按照分析方法建立的一般步驟要求各小組討論完成方法的建立；最后，我們進(jìn)行分組報(bào)告，將各組的方案總結(jié)、對(duì)比并討論，按照評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)的要求將建立的分析方法再做方案上的完善。在整個(gè)過程中，通過PBL模式引導(dǎo)學(xué)生按照理論知識(shí)思考問題，再通過討論式教學(xué)幫助學(xué)生分析解決問題。經(jīng)過以上教學(xué)模式的嘗試，學(xué)生在課后普遍反映理論課堂學(xué)習(xí)的目標(biāo)性更強(qiáng)，興趣大增，學(xué)習(xí)效果更佳。

體內(nèi)藥物分析教材整體的系統(tǒng)性很強(qiáng)，但是各個(gè)章節(jié)內(nèi)容涉及面廣，知識(shí)點(diǎn)多且較為分散，如果沒有系統(tǒng)性梳理，學(xué)生很難融匯貫通所有知識(shí)點(diǎn)。如生物樣品及預(yù)處理方法一章，各種樣品預(yù)處理方法羅列講授后學(xué)生感覺很難理清思路。于是我們讓學(xué)生在熟悉各種預(yù)處理方法后總結(jié)出各種方法應(yīng)用的特點(diǎn)，做出思維導(dǎo)圖，從而提升了對(duì)每種方法的理解。體內(nèi)藥物分析的很多技術(shù)還具有前沿性的特點(diǎn)，教材中涉及到的很多生物樣品預(yù)處理技術(shù)在經(jīng)典學(xué)生實(shí)驗(yàn)中較少應(yīng)用，教師只能“紙上談兵”。為了加強(qiáng)理解，教師還會(huì)在課堂教學(xué)中以視頻的方式展示給學(xué)生。

3 實(shí)驗(yàn)教學(xué)

體內(nèi)藥物分析是一門理論與實(shí)踐結(jié)合相當(dāng)緊密的學(xué)科，實(shí)際操作環(huán)節(jié)的重要性和理論知識(shí)掌握同等重要，甚至更為重要[5]。因此，實(shí)踐性是其主要特點(diǎn)，實(shí)驗(yàn)課教學(xué)的必要性十分突出。但鑒于課程開設(shè)性質(zhì)為選修課程，學(xué)時(shí)有限，學(xué)生來自不同班級(jí)，人數(shù)不定，組織管理難度大，我們?cè)谧畛醯膸啄暌恢睕]有開設(shè)實(shí)驗(yàn)教學(xué)。隨著各方面條件的成熟，目前，我們已經(jīng)著手體內(nèi)藥物分析實(shí)驗(yàn)教學(xué)工作的建設(shè)。

體內(nèi)藥物分析以生物體中微量藥物及其代謝物為研究對(duì)象，以儀器分析技術(shù)為手段，通過進(jìn)行方法學(xué)研究獲得可靠(精密度、選擇性、靈敏度、穩(wěn)定性等滿足一定的限度要求)的分析方法，為臨床治療藥物監(jiān)測(cè)及新藥研究等各領(lǐng)域提供科學(xué)準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)依據(jù)。體內(nèi)藥物分析實(shí)驗(yàn)基于儀器分析實(shí)驗(yàn)技術(shù)但又明顯不同于儀器分析實(shí)驗(yàn)。在儀器分析實(shí)驗(yàn)課中，通常以驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn)為主，以定性、定量分析為實(shí)驗(yàn)?zāi)康模趯?shí)驗(yàn)中強(qiáng)調(diào)的是對(duì)不同分析方法(光譜學(xué)、電化學(xué)、色譜學(xué)等)原理的掌握，要求熟悉分析儀器的基本操作。而體內(nèi)藥物分析實(shí)驗(yàn)的目的是利用儀器分析方法解決體內(nèi)藥物分析中的實(shí)際問題，在實(shí)驗(yàn)課堂引導(dǎo)學(xué)生將理論與實(shí)際問題相結(jié)合，掌握查閱文獻(xiàn)選擇適宜的分析方法、樣品預(yù)處理、實(shí)驗(yàn)條件的優(yōu)化和驗(yàn)證這一完整的方法學(xué)研究過程并建立可靠的體內(nèi)藥物分析方法。基于以上不同，我們目前擬定的實(shí)驗(yàn)將生物樣品預(yù)處理過程及分析儀器實(shí)驗(yàn)條件優(yōu)化作為重點(diǎn)內(nèi)容，對(duì)在儀器分析實(shí)驗(yàn)中并未涉及的方法學(xué)評(píng)價(jià)參數(shù)(如定量限、提取回收率等)，教師將引導(dǎo)學(xué)生根據(jù)相關(guān)理論在實(shí)驗(yàn)中獲得，以幫助學(xué)生更直觀地理解方法學(xué)研究的手段和意義。結(jié)合實(shí)驗(yàn)室本身的條件以及學(xué)時(shí)數(shù)有限的實(shí)際情況，目前我們擬將龍膽苦苷的血漿蛋白結(jié)合率測(cè)定作為實(shí)驗(yàn)教學(xué)內(nèi)容。該實(shí)驗(yàn)無需對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物做喂藥采血處理，只需將龍膽苦苷與血漿混合平衡即可開展實(shí)驗(yàn)，適合有限的學(xué)時(shí)和場地。學(xué)生可以在操作上學(xué)習(xí)使用超濾法預(yù)處理技術(shù)，在實(shí)驗(yàn)條件和色譜條件的優(yōu)化方面也可以得到訓(xùn)練。

4 考核方式

體內(nèi)藥物分析的教學(xué)目的在于引領(lǐng)學(xué)生解決在臨床藥學(xué)及新藥開發(fā)中的實(shí)際問題，方法學(xué)研究以在治療藥物檢測(cè)、藥代動(dòng)力學(xué)研究、人群代謝分型、內(nèi)源性物質(zhì)監(jiān)測(cè)以及濫用藥物分析中的應(yīng)用為首要任務(wù)。顯然，單一的卷面考核方式并不適合這門實(shí)踐性較強(qiáng)的課程。因此，除了部分理論知識(shí)采用傳統(tǒng)的卷面考核方式外，我們還增加了平時(shí)成績、文獻(xiàn)檢索、學(xué)習(xí)報(bào)告等方面的評(píng)價(jià)，對(duì)學(xué)生實(shí)施全方位的綜合測(cè)評(píng)。目前，我們對(duì)學(xué)生的考核中，平時(shí)成績占20%，主要包括課堂表現(xiàn)和出勤；作業(yè)成績占30%，主要包括文獻(xiàn)檢索和學(xué)習(xí)報(bào)告；期末考試卷面成績占50%。建立科學(xué)全面的考核體系，不但能客觀地對(duì)學(xué)生進(jìn)行評(píng)價(jià)，還能調(diào)動(dòng)學(xué)生在各方面的學(xué)習(xí)積極性，獲得良好的教學(xué)效果。

5 教學(xué)效果評(píng)價(jià)

除了通過不斷探索教學(xué)內(nèi)容提高教學(xué)質(zhì)量之外，我們還特別關(guān)注教學(xué)效果評(píng)價(jià)。目前開展的教學(xué)效果評(píng)價(jià)包括教師隊(duì)伍的教學(xué)督導(dǎo)評(píng)價(jià)和師生互動(dòng)評(píng)價(jià)兩部分。教學(xué)督導(dǎo)評(píng)價(jià)以打分為主，對(duì)授課教師在教學(xué)準(zhǔn)備、教學(xué)重點(diǎn)、課堂組織等方面進(jìn)行考核。師生互動(dòng)評(píng)價(jià)通過學(xué)生以匿名投票對(duì)授課教師作評(píng)價(jià)以及學(xué)生考核成績兩部分來反映。教學(xué)效果評(píng)價(jià)是一面鏡子，在一定程度上反映了教學(xué)質(zhì)量的好壞，也促進(jìn)了教學(xué)質(zhì)量的提高。

6 結(jié) 語

隨著藥學(xué)事業(yè)的迅猛發(fā)展和新技術(shù)新方法的不斷涌現(xiàn)，體內(nèi)藥物分析在新藥開發(fā)、安全評(píng)價(jià)以及臨床合理用藥中的作用愈來愈突出。圍繞體內(nèi)藥物分析課程特點(diǎn)、任務(wù)、目的開展的所有教學(xué)活動(dòng)都以提高教學(xué)質(zhì)量、培養(yǎng)合格藥學(xué)專業(yè)畢業(yè)生為目的。合理設(shè)計(jì)教學(xué)內(nèi)容、采取有效的理論教學(xué)方式、合理安排實(shí)驗(yàn)教學(xué)、建立科學(xué)的考核方式，這一系列的教學(xué)工作探索都將對(duì)體內(nèi)藥物分析的教學(xué)效果產(chǎn)生積極影響，對(duì)臨床藥學(xué)專業(yè)學(xué)生的培養(yǎng)具有重要意義。