低強度脈沖超聲保護MPP+誘導N2a細胞損傷

陳雪瑩，楊 珂，王 冬 *，張 亮，王 穎2,，朱 慧，趙釹君，王志剛

(1.重慶醫科大學附屬第一醫院超聲科，重慶 400016；2.超聲分子影像重慶市重點實驗室，重慶 400010；3.重慶醫科大學附屬兒童醫院兒科研究所, 兒童發育疾病研究教育部重點實驗室, 兒童發育重大疾病國家國際科技合作基地,兒科學重慶市重點實驗室,重慶市干細胞治療工程技術研究中心，重慶 400014；4.重慶醫科大學附屬第二醫院超聲科，重慶 400010)

帕金森病(Parkinson disease， PD)是第二大常見神經退行性疾病，典型癥狀有靜止性震顫、動作遲緩、僵硬及平衡障礙等，主要歸因于黑質紋狀體系統中的多巴胺能神經元進行性死亡、缺失。在環境和遺傳共同作用下，線粒體功能障礙和氧化應激在PD發病過程中具有重要作用[1-2]。目前非侵入方法治療PD已顯示出良好的應用前景，如重復經顱磁刺激[3]、光刺激[4]等。低強度脈沖超聲(low-intensity pulsed ultrasound， LIPUS)為安全、非侵入性的超聲治療方法，臨床廣泛用于骨折后康復治療[5-6]。近來研究發現LIPUS可觸發完整腦回路中的神經元活動及動作電位[7]，對血管性損傷[8]及鋁超載[9]所致腦損傷具有一定保護作用，由此推測對PD亦可能產生作用。本研究以1-甲基-4-苯基吡啶離子(1-methyl-4-phenylpyridinium， MPP+)誘導小鼠神經母細胞瘤Neuro-2a(N2a)細胞株建立PD細胞模型，觀察LIPUS是否對 MPP+誘導神經細胞損傷具有保護作用。

1 材料與方法

1.1 主要材料和儀器 N2a細胞株(認知發育與學習記憶障礙轉化醫學重慶市重點實驗室贈與)；DMEM高糖培養基、胎牛血清(fetal bovine serum, FBS)、0.25%胰蛋白酶(Gibco公司)；1-甲基-4-苯基吡啶離子(1-methyl-4-phenylpyridiniumion，MPP+)、2'，7'-二氯二氫熒光素二乙酸酯(2'，7'-dichlorodihydrofluorescein diacetate, DCFH-DA，Sigma公司)；……