類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者外周血單核細(xì)胞miR-24、miR-132表達(dá)及臨床意義①

蘇顯都 林明利 符步遠(yuǎn) 黎 明 (儋州市人民醫(yī)院檢驗科，儋州 571799)

類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(rheumatoid arthritis，RA)是一種慢性全身性自身免疫性疾病，大多數(shù)患者出現(xiàn)不同程度的功能受損和關(guān)節(jié)畸形，嚴(yán)重影響RA患者的生活質(zhì)量[1]。有研究證實，微小核糖核酸(microRNA，miRNA)在免疫細(xì)胞成熟的各個階段及免疫穩(wěn)態(tài)維持方面發(fā)揮著重要的調(diào)節(jié)作用，與自身免疫性疾病的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)[2，3]。近期的研究發(fā)現(xiàn)，miR-24、miR-132在自身免疫疾病的發(fā)病過程中發(fā)揮著重要的作用[4，5]。本研究通過檢測miR-24、miR-132在RA患者外周血單個核細(xì)胞(periph-eral blood mononuclear cell,PBMC)中的表達(dá)水平，分析miR-24、miR-132對RA的診斷價值，旨在為RA的診斷及靶向治療提供實驗依據(jù)。

1 資料與方法

1.1臨床資料 收集2015年1月～2017年10月儋州市人民醫(yī)院及中南大學(xué)湘雅醫(yī)院收治的RA患者160例，其中男性38例，女性122例，年齡18～75歲，平均(47.63±11.35)歲。RA診斷符合2009年美國風(fēng)濕病學(xué)會(ACR)和歐洲抗風(fēng)濕病聯(lián)盟(EULAR)提出的RA分類標(biāo)準(zhǔn)。選擇65例骨關(guān)節(jié)炎(Osteoarthritis，OA)作為OA組，其中男性16例，女性49例，年齡19～74歲，平均(47.42±11.16)歲。另選取同期體檢65名健康者作為對照組，其中男性17例，女性48例，年齡20～72歲，平均(46.85±10.62)歲。選取的研究對象均排除合并其他自身免疫性疾病、感染、惡性腫瘤和重要器官系統(tǒng)疾病。本研究獲得醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)，并與患者簽署知情同意書。

1.2方法

1.2.1分組方法 按照28個關(guān)節(jié)疾病活動性評分(28 disease activity scores,DAS28)來監(jiān)測RA患者的疾病活動度，采用DAS28-ESR，其中2.6

1.2.2PBMC分離及總RNA提取 抽取外周血4 ml 于肝素鈉抗凝管中，3 000 r/min離心5 min，去除上層血漿，加入等體積 PBS稀釋血液，在離心管中加入淋巴細(xì)胞分離液(Ficoll)沿傾斜的管壁緩緩加入稀……