E-cadherin參與IL-24抑制肺癌細胞增殖和侵襲遷移的實驗研究

宋秀婧 楊鐵波 王明暉 劉仁龍 顧少巖 張 堯

(齊齊哈爾市第一醫院呼吸內一科，齊齊哈爾 161000)

肺癌屬于呼吸系統惡性腫瘤，其發生機制十分復雜，不僅與環境等外界因素有關，還與細胞內基因的表達調控有關[1]。IL-24是IL-10細胞因子家族成員之一，人體黑素細胞、脾細胞、胸腺細胞等都可以表達IL-24[2]。最近的研究報告顯示，IL-24參與腫瘤的進展，過量的IL-24可以抑制腫瘤的生長，并且對于正常細胞生長沒有影響[3]。在肺癌中的研究報道顯示，IL-24轉染后的肺癌細胞凋亡增多，細胞生長受到抑制，而對于正常的支氣管上皮細胞沒有影響，說明IL-24發揮誘導肺癌細胞凋亡和抑制肺癌細胞生長的作用[4]。還有研究報道表明，IL-24還可以抑制卵巢癌、宮頸癌等腫瘤細胞的侵襲和遷移，并且可以上調腫瘤細胞中E-cadherin表達水平，IL-24抗腫瘤轉移的作用可能與E-cadherin有關[5,6]。目前對于IL-24對肺癌細胞侵襲和遷移的影響和機制尚不明確。本實驗以明確IL-24對肺癌細胞侵襲和遷移的影響和機制為目的，以肺癌細胞A549作為體外實驗對象，以期為闡明IL-24抗肺癌作用機制提供參考。

1 材料與方法

1.1材料 肺癌細胞A549購自武漢普諾賽生命科技有限公司；pcDNA3.1-IL-24、pcDNA3.1購自北京合生基因科技有限公司；IL-24抗體、MMP-9抗體購自美國Abcam；cDNA合成試劑盒購自美國BIOMIGA；E-cadherin shRNA和shRNA陰性對照購自上海吉瑪制藥技術有限公司；MMP-2、E-cadherin、Ki-67抗體購自美國Santa Cruz Biotechnology；Lipofectamine 2000購自美國Invitrogen。

1.2方法

1.2.1pcDNA3.1-IL-24轉染和過表達效果檢測 肺癌細胞中分別轉染對照載體pcDNA3.1和IL-24過表達載體pcDNA3.1-IL-24，記為pcDNA3.1、pcDNA3.1-IL-24，設置不轉染載體的肺癌細胞為對照組。轉染試劑為Lipofectamine 2000，步驟同轉染試劑說明。……