TNFSF14對(duì)STZ誘發(fā)Ⅰ型糖尿病的影響及其機(jī)制初探①

江 沛 李 由 徐 砜 許桂蓮 李桂清 ( 陸軍軍醫(yī)大學(xué)西南醫(yī)院腎科,重慶 400038)

Ⅰ型糖尿病 (type 1 diabetes mellitus，T1DM) 是一種自身免疫性疾病，它是由機(jī)體對(duì)自身抗原的免疫反應(yīng)不當(dāng)而引起的，它由活化的T細(xì)胞損傷自體胰島中的β細(xì)胞，使之不能正常分泌胰島素，導(dǎo)致胰島素的絕對(duì)缺乏[1,2]。

TNFSF14是腫瘤壞死因子超家族(tumor necrosis factor super-family,TNFSF )中的一員,又稱LIGHT或 HVEM-L，其可由樹(shù)突狀細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、NKT等多種細(xì)胞產(chǎn)生[2]。TNFSF14含有 254個(gè)氨基酸，既可為膜結(jié)合型分子，又可作為可溶性分子，主要通過(guò)與 LTβR(TNFRSF3)和 HVEM(TNFRSF14)兩種受體結(jié)合，在腫瘤免疫、炎癥反應(yīng)、自身免疫性疾病的發(fā)生及胸腺陰性選擇等過(guò)程中發(fā)揮重要的生物學(xué)作用[3]。TNFSF14缺陷小鼠 (TNFSF14 konckout，TNFSF14 KO小鼠) 具有正常的外周淋巴器官，它通過(guò)對(duì)免疫細(xì)胞的影響或通過(guò)參與炎癥過(guò)程在調(diào)節(jié)宿主免疫應(yīng)答中起著重要的作用[4]。

鏈脲佐菌素(streptozotocin,STZ) 是一種DNA烷基化試劑，能通過(guò)GLUT2葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白獨(dú)自進(jìn)入細(xì)胞，對(duì)胰島中的β-細(xì)胞具有毒性，根據(jù)劑量的不同常用于誘導(dǎo)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的各型糖尿病模型[5,6]。

鑒于TNFSF14與其受體HVEM和LTβR對(duì)于機(jī)體免疫具有重要的調(diào)節(jié)作用，而目前尚未有文獻(xiàn)闡述其對(duì)Ⅰ型糖尿病進(jìn)程的影響。因此，本文以STZ誘導(dǎo)的T1DM小鼠為模型，探討TNFSF14在Ⅰ型糖尿病中發(fā)揮的作用。

1 材料與方法

1.1材料

1.1.1材料、試劑 STZ (Sigma) ；檸檬酸(國(guó)藥集團(tuán))；檸檬酸鈉(國(guó)藥集團(tuán))；血糖儀(強(qiáng)生穩(wěn)豪)；蘇木素-伊紅染色液(碧云天)；FITC標(biāo)記的抗小鼠CD3、PE標(biāo)記的抗小鼠CD4以及APC標(biāo)記的抗小鼠FoxP3流式抗體均購(gòu)自Biolegend公司。

1.1.2實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 23～25 g體重雄性SPF級(jí)C57BL/6小鼠購(gòu)自北京華阜康生物科技股份有限公司；TNFSF14 KO小鼠(C57BL/6背景)為德國(guó)Kfeffer博士惠贈(zèng)，在動(dòng)物房潔凈層柜(IVC系統(tǒng))內(nèi)飼養(yǎng)，恒溫、恒濕條件下自由攝食飲水[2]。……