厚果崖豆藤提取物抑制NF-κB p65的活化對三陰性乳腺癌細胞增殖、凋亡和轉(zhuǎn)移的影響①

何 力 蘭戴天 高青山 李 娟 鄧小林

(四川省醫(yī)學(xué)科學(xué)院·四川省人民醫(yī)院甲狀腺乳腺外科,成都 610100)

乳腺癌是全球女性最常見的癌癥，發(fā)病率和死亡率都很高[1]。三陰性乳腺癌 (triple-negative breast cancer，TNBC) 以雌激素受體 (ER)、黃體酮受體 (PR) 和人表皮生長因子受體 (HER)-2缺乏表達為特征，占所有類型乳腺癌的15%[2]。TNBC具有早期轉(zhuǎn)移和預(yù)后不良的趨勢，是一項重大的臨床挑戰(zhàn)[3]。由于TNBC對內(nèi)分泌治療或其他現(xiàn)有靶向藥物沒有反應(yīng)，藥物治療的選擇僅限于傳統(tǒng)化療，而傳統(tǒng)化療往往陷入耐藥性問題[4]。因此，有必要尋找對TNBC具有最小毒性且治療有效的新化合物。一種新型查爾酮化合物(millepachine，MIL)，該化合物首次從厚果崖豆藤中分離得到，具有2,2-二甲基苯并吡喃基序的苯并芘結(jié)構(gòu)，使其具有足夠的親脂性以確保良好的細胞膜滲透性[5]。MIL在體內(nèi)和體外均表現(xiàn)出對多種人類癌細胞的強大抗腫瘤作用，作為一種新型的抗癌藥物候選藥物，由于其結(jié)構(gòu)新穎、抗腫瘤活性強，對藥物研發(fā)具有潛在的重要意義[6]。因此，本研究選擇不同劑量的MIL處理MDA-MB-231乳腺癌細胞，探索MIL對MDA-MB-231乳腺癌細胞增殖、凋亡和轉(zhuǎn)移的影響是否存在NF-κB通路的參與，以及該通路p65蛋白的表達和核轉(zhuǎn)位情況，從而確定新的治療靶點，以期為MIL應(yīng)用于三陰性乳腺癌的治療提供理論和實驗依據(jù)。

1 材料與方法

1.1材料 DMEM/F12 培養(yǎng)液、胎牛血清、胰酶(Gibco 公司，美國)；Cell Counting Kit-8(CCK-8)(同仁化學(xué)公司，日本)；ELX808酶標儀(Bio-Tek公司，美國)；二喹啉甲酸 (Bicinchoninic acid，BCA)蛋白定量試劑盒 (PIERCE公司，美國)；MatrigelTM底膜基質(zhì) (BD公司，美國)；p65,p-p65抗體(NEB公司，美國)；HRP標記的山羊抗小鼠二抗(Santa Cruz公司，美國)；……