病理診斷中胸腹水細(xì)胞塊結(jié)合免疫組化

劉楊

【摘?要】 目的：分析胸腹水細(xì)胞塊結(jié)合免疫組化在病理診斷中的應(yīng)用效果。方法：從本院2017年8月至2018年8月經(jīng)手術(shù)活檢確診為惡性胸腹水積液患者中選46例。所有患者胸腹水液基細(xì)胞制作細(xì)胞塊，并切片，隨后分別進(jìn)行免疫組化與HE常規(guī)染色。對比兩種不同染色方法的病理診斷結(jié)果。結(jié)果：統(tǒng)計分析，相對比常規(guī)HE染色方法，實施細(xì)胞塊結(jié)合免疫組化的病理診斷陽性率明顯要高，且檢驗數(shù)據(jù)P<0.05，差異符合統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)論：臨床診斷腫瘤細(xì)胞陽性中，將細(xì)胞塊與免疫組化結(jié)合應(yīng)用，可明顯提高腫瘤陽性診斷準(zhǔn)確率，應(yīng)用價值較高。

【關(guān)鍵詞】 免疫組化;病理診斷;細(xì)胞塊;胸腹水

文章編號：WHR2019052635

胸腹腔積液其實就是胸腹水，是腫瘤性疾病常見的癥狀。大部分晚期惡性腫瘤患者會出現(xiàn)胸腹水。分析便可發(fā)現(xiàn)，形成胸腹水的原因并不具有單一性[1-2]，唯有準(zhǔn)確判斷胸腹水的性質(zhì)，才有利于臨床疾病確診、治療，并且還有助于改善患者預(yù)后。臨床中比較常用的診斷方法是胸腹水脫落細(xì)胞學(xué)檢查。但相比較組織學(xué)病理診斷準(zhǔn)確率，單純的細(xì)胞形態(tài)學(xué)準(zhǔn)確率要低，對臨床確診疾病構(gòu)成不利影響。本文作者分析胸腹水細(xì)胞塊結(jié)合免疫組化在病理診斷中的應(yīng)用效果。

1?資料與方法

1.1?一般資料

從本院2017年8月至2018年8月經(jīng)手術(shù)活檢確診為惡性胸腹水積液患者中選46例。男25例，女21例，患者的年齡為28～66歲，平均年齡為（46.9±5.3）歲;胸水20例，腹水26例;容量50～500mL，平均為（300.3±82.6）mL，液體顏色為血色或淡黃色;其中肺腺癌15例，惡性間皮瘤1例，肺鱗癌3例，小細(xì)胞癌12例，鱗狀細(xì)胞癌15例。

1.2?方法

采集所有患者胸腹水液基細(xì)胞制作細(xì)胞塊，并切片，隨后分別進(jìn)行免疫組化與HE常規(guī)染色。制備細(xì)胞學(xué)涂片：在靜止?fàn)顟B(tài)下抽取患者胸腹水樣品，0.5h后使用吸管從距離瓶底的液體中吸取8mL，并放在離心管內(nèi)保持3500r/min的速度離心操作15min。留取下段液體，并將底部的沉淀物涂在切片上固定。染色使用瑞士-姬姆薩，指導(dǎo)涂片顯示為紫紅色。細(xì)胞塊切片：如抽取的積液樣本超過200mL，需在室溫條件下放置6h，留取下段清液100mL，依照1∶9的比例將甲醛溶液和積液量進(jìn)行配置，將濃度為40%的甲醛溶液混于積液內(nèi)，搖勻后放置在室溫條件下過夜。次日清晨取上清液，將底部沉淀物充分搖勻后放置在離心管內(nèi)，保持3500r/min的速度離心15min，離心后的沉淀物需進(jìn)行脫水、浸蠟、包埋后予以HE染色。免疫組化染色：依據(jù)細(xì)胞涂片的形態(tài)學(xué)改變選擇抗體，應(yīng)用En Vision操作進(jìn)行免疫組化，操作時需嚴(yán)格依照說明書展開，使用的試劑為SP、TTF-1、CK5/6、CK7、CK20、CA125、CEA、CR、EMA、EA、DES、MC等。切片的厚度控制在4μm，通過防脫玻片對切片進(jìn)行裱片，修復(fù)環(huán)境應(yīng)在高溫、高壓下。任選抗體放在4℃的冰箱內(nèi)過夜，DAB顯色后，復(fù)染需應(yīng)用蘇木素。

1.3?判斷指標(biāo)

陽性率診斷：CR與TTF-1等免疫組化標(biāo)記物陽性表達(dá)在細(xì)胞核中，CK5/6、EMA和CEA陽性表達(dá)定位在細(xì)胞膜，細(xì)胞漿的陽性表達(dá)主要來源于CK20、CK7、CA125、DES，并能夠觀察分布的棕黃色顆粒，在目標(biāo)細(xì)胞達(dá)到10%時可確定為陽性。

1.4?統(tǒng)計學(xué)分析

本次研究活動使用統(tǒng)計學(xué)軟件SPSS 21處理各類數(shù)據(jù)，兩組患者的計量資料應(yīng)用（±s）來表示，并進(jìn)行t檢驗;計數(shù)資料則采用百分比（%）表明，組間差異采用χ2檢驗，如數(shù)據(jù)檢驗P<0.05，表明兩組數(shù)據(jù)差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2?結(jié)果

統(tǒng)計分析，相對比常規(guī)HE染色方法，實施細(xì)胞塊結(jié)合免疫組化的病理診斷陽性率明顯要高，其中常規(guī)染色方法的陽性準(zhǔn)確率為78.3%，而細(xì)胞塊結(jié)合免疫組化陽性準(zhǔn)確率為95.7%，且檢驗數(shù)據(jù)P<0.05，差異符合統(tǒng)計學(xué)意義。

3?討論

一般情況下，患者體內(nèi)的積液積聚在胸膜腔中即表現(xiàn)為胸腹水。受到多種不同因素的影響，患者胸膜腔內(nèi)的液體吸收減少或增多就會有胸腹水。胸腹水癥狀多出現(xiàn)在病情比較嚴(yán)重的惡性腫瘤患者中。臨床診斷與治療期間，胸腹水的確診有著非常重要的輔助性價值。利用影像學(xué)檢查，可確定積液的多少和具體位置。但細(xì)胞學(xué)檢測始終是病理診斷良惡性腫瘤的重要手段。

在過去，臨床診斷主要通過細(xì)胞離心沉降液涂片，但是該種檢查方法的準(zhǔn)確度有待考證。細(xì)胞塊檢查中會發(fā)現(xiàn)大量的保存切片，并結(jié)合免疫組化和胸腹水細(xì)胞塊，從而彌補細(xì)胞涂片中存在的缺點，有助于臨床診斷。操作中制取胸腹水胸包沉渣石蠟切片比較簡單。細(xì)胞沉渣石蠟包埋可取得活檢組織樣本的連續(xù)切片，有助于細(xì)胞集中，避免檢查中出現(xiàn)誤差。石蠟紙片可避免細(xì)胞涂片厚度不達(dá)標(biāo)而出現(xiàn)的重疊、成團(tuán)以及結(jié)構(gòu)模糊等多種缺陷，且掉片率明顯較低，對提高染色定位準(zhǔn)確與可靠性具有重要的作用[3-4]。涂片相對清晰的前提下，對提高判斷準(zhǔn)確率具有明顯的效果，胸腹水的沉渣蠟片在實際中能夠連續(xù)切片，且還可反復(fù)操作，依據(jù)臨床的需要連續(xù)操作，能夠進(jìn)行多次操作，如免疫組化染色、原位核酸分子雜交染色和細(xì)胞化學(xué)染色等多項操作。免疫組化依據(jù)特異性情況可監(jiān)測細(xì)胞中不明確的抗原，依據(jù)相關(guān)的有色反應(yīng)，能夠確定細(xì)胞定位、分布與活性等多種情況，制作胸腹水細(xì)胞塊實現(xiàn)免疫組化染色可取得較好的效果，促進(jìn)細(xì)胞集中，有助于更好的觀察細(xì)胞，且處理過程與細(xì)胞塊相同，有效避免陽性脫落與抗原受損的情況，從而可獲得與組織塊相同的結(jié)果，有助于提高細(xì)胞學(xué)檢測陽性率，同時還可確定組織的來源[5]。將細(xì)胞塊與免疫組化相互結(jié)合，對提高病理診斷準(zhǔn)確率具有顯著的效果，同時還有助于細(xì)胞學(xué)陽性檢出率，降低誤診與漏診率。與此同時通過細(xì)胞塊和免疫組化可鑒別診斷惡性腫瘤細(xì)胞，并確定組織來源，為診斷惡性腫瘤提供重要根據(jù)。如惡性間皮細(xì)胞、腺癌細(xì)胞核增生的間皮細(xì)胞可通過TTF-1與CEA等抗體鑒別。因此，免疫組化有助于臨床醫(yī)師鑒別診斷，還能夠確定腫瘤細(xì)胞來源和類型，結(jié)合細(xì)胞塊診斷準(zhǔn)確率明顯提高。

綜上所述，臨床診斷腫瘤細(xì)胞陽性中，將細(xì)胞塊與免疫組化結(jié)合應(yīng)用，可明顯提高腫瘤陽性診斷準(zhǔn)確率，應(yīng)用價值較高。

參考文獻(xiàn)

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