農藥對于防治農作物病蟲害具有重要作用,但也給農產品質量安全帶來隱患,因此,蔬菜農藥殘留檢測逐漸受到社會關注。現階段,中國十分重視蔬菜質量安全問題,監管力度不斷加強,各地監管機構、批發市場、超市、生產基地等相繼建立了蔬菜農藥殘留檢測室與檢測點。蔬菜農藥殘毒檢測技術是現如今比較普遍的農藥殘留檢測方法,方法簡單,易于操作,已被各檢測主體廣泛使用。本文分析了蔬菜農藥殘毒檢測技術注意事項,以期更好地開展蔬菜農藥殘留檢測工作。
1藥品配制和處理
1.1藥品配制
藥品配制和保存過程主要包括配置提取液、酶液、底物和顯色劑。提取液是稀釋其他配制劑的重要液體,提取液的配制過程十分重要。受藥品純度及實驗室濕度影響,緩沖液pH值會有所差別。正常情況下,最后配比出的提取液通常無法達到規定值要求。建議在配制完成后,用pH計來校正提取液pH值。
顯色劑、酶液、底物在高溫環境中容易發生變質進而失去效果。所以,在配制藥液的過程中可以采用分裝制,隨用隨取,這種方法可以避免藥品浪費,保證藥品質量。酶是決定檢測技術成功與否的重要成分。酶的活性、純度、反應時酶的濃度等都會影響最后的檢測結果。因此,應合理控制這些因素,保證檢測結果準確。
1.2樣品前期處理
在取樣時,要根據不同蔬菜種類選擇不同部位取樣。例如葉菜類應去掉枯葉和腐葉,進而再收集植株的不同葉片;豆菜和果菜類需在表皮到果肉部分1~1.5 cm處取樣,果肉取樣要適量;含有葉綠素和色素比較高的其他蔬菜,禁止立刻進行加液提取,否則會快速氧化,提取液的顏色會變深。
1.3制備培養樣品
在選擇培養管時,容量最好與培養量相符合,避免檢測結果誤差較大。同時,需把培養箱的溫度控制在37~38℃,培養時間控制為30 min。
2檢測值常見問題
2.1空白值
首先,在操作儀器之前要保證儀器穩定,比色杯沒有較大色差。其次,要嚴格控制樣品從培養箱取出到上機這段時間。丁酰膽堿酯酶樣品的空白值受時間影響較大,丁酰膽堿酯酶穩定性較差,活性較高,在加入底物之后反應速度較快,所以要縮短操作時間,避免空白值迅速減小。因此,不同種類的酶在不同檢測條件下樣品空白值各不相同。
2.2吸光值
樣品吸光值偏高是在檢測中經常會出現的問題。根本原因是酶的活性發生變化和反應中產生的化學、物理干擾。酶失效導致自身顏色發生變化,樣品本底顏色較深,提取液中的樣品組織液形成乳濁液等透光之后被散色,導致透光率降低,吸光度逐漸增大。
2.3抑制率
在檢測結果中,有時會出現抑制率為負數的情況,個別樣品會出現較小的負值誤差,這主要是由于操作誤差導致。酶分解底物時,分解物與顯色劑相結合時速度較快,若操作方法不科學容易造成誤差,從而使抑制率變成負數。
2.4假陽性假陰性
假陽性是因為酶活性降低或者失活,導致在底物中無法發生作用,底物無法被水解,不能與顯色劑相結合從而顯色造成。結果與提取液中存在農藥抑制酶的活性相類似。假陰性是由于某種農藥對酶沒有明顯抑制作用而產生的,表現出沒有農藥的假象。除此之外,在反應過程中,化學干擾也會發生假陰性和假陽性的情況。檢測人員需選擇敏感性較強的酶,降低假陽性和假陰性發生概率。
3其他注意事項
3.1儀器使用條件
應科學控制實驗室溫度及濕度,保證儀器正常使用。實驗室室內溫度應控制在20~30℃,相對濕度要低于85%,否則會影響酶的活性及檢測結果。酶在室溫下培養時,22℃需培養20 min,25℃需培養15 min,若室溫低于20℃,必須將酶放入37~38℃的保溫箱中進行培養。
3.2樣品數量
蔬菜樣品重量應為2~2.5 kg,最好將其分成3份,一份備案,一份用于復檢,一份在檢測時使用。
3.3用水選擇
溶液試劑用水最好選擇蒸餾水,也可以使用等離子水和純凈水,避免用礦泉水和自來水。
3.4樣液浸提
在樣液浸提時,用超聲提取儀進行提取較為適宜,也可以使用振蕩器振蕩浸提。無法使用儀器浸提時,應用晃動的方式浸提。浸提時間要充足且適當,時間過長或者過短都會影響檢測結果。
3.5器具清洗
在檢測過程中用到的所有器具,在重復使用之前都必須進行浸泡,再用自來水沖洗5遍,然后用蒸餾水清洗2遍,洗凈之后再用。
3.6比色瓶保護
對比色瓶做好清潔保護,可減少實驗誤差。比色瓶在插進比色槽之前,必須要用清洗布或者干凈柔軟的紙張進行擦拭,然后再準確插入比色槽。在檢測結束后,要將比色瓶里面的溶液及時倒掉,再用自來水進行清潔,避免污染或溶液腐蝕比色瓶;在使用前,先用蒸餾水沖洗2次,甩干后用擦鏡紙把瓶子表面擦干。
3.7辛辣等樣液檢測
需使用酶抑制法快速檢測蔥、姜、蒜等一些辛辣性蔬菜農藥殘留,但可能出現假陽性的情況,且辛辣味越強烈的蔬菜就越有可能出現假陽性。所以,在浸提辛辣蔬菜類樣品時,需要在其中加入專用消除劑來隔絕辛辣物質的干擾,用特殊的方法進行浸提。
3.8確認結果
在獲得初測結果后,對不合格樣品要在標準檢測室中進一步檢測與定性,進行精確確認。在用氣相色譜或液相技術進行檢測時,用雙毛細管柱、雙檢定器氣相色譜、高效液相色譜檢測進行定性及定量分析。這種檢測方法能快速準確檢測出蔬菜中的有機磷、有機氯、氧基甲酸酯等農藥殘留。
3.9加強監督
蔬菜農藥殘留檢測只能檢測小部分蔬菜樣品,無法覆蓋到市場上全部蔬菜種類,因此在日常管理中,應加強對農戶農藥使用情況的監督,引導農戶正確使用農藥,提高環境保護意識。嚴格按照低毒無殘留標準種植蔬菜,保障食品安全。
3.10檢測資料管理
檢測結果除了需做好電子備份外,還應該準備紙質資料建檔,方便查詢和長期儲存。
蔬菜是十分重要的食物,可為人體補充各種維生素及膳食纖維,但隨著蔬菜需求量的不斷上漲,一些高農殘蔬菜也開始流入市場,所以各地必須重視蔬菜農藥殘留檢測工作。
(1寧夏石嘴山市惠農區農業技術推廣服務中心馬惠蘭2寧夏石嘴山市農業綜合執法支隊惠農大隊李玉明)