便秘中醫證候動物模型研究進展?

王 路，許明敏，曹 煒，張 微，李 瑛

(成都中醫藥大學針灸推拿學院，成都 610075)

便秘是臨床上最常見的消化道疾病，以排便困難、排便量少、排便次數減少或排便不盡感等為主要臨床表現。流行病學顯示，我國老年和兒童患者患病率高達18.1 %和18.8 %，顯著高于一般人群[1]。便秘輕者影響其生活質量、工作效率、心理健康[2-4]，重者誘發癌癥[5]、急性心腦血管疾病[6]等,增大疾病相關死亡率，引起了國內外的廣泛關注。而養成良好的排便、飲食和運動習慣僅能改善輕微的便秘癥狀，但多數人仍需借助治療。目前治療方法有止瀉藥、生物反饋治療[7]、心理治療[8]和手術治療等，其中止瀉藥治療效果因人而異且需長期服藥，可能伴有腹瀉等副反應；生物反饋和心理治療范圍較局限；手術治療具有創傷大、手術并發癥發病率高等特點。而中醫藥治療便秘累積了豐富經驗，通過整體分析患者病情和轉歸辨證論治，不僅可以治療便秘癥狀本身，還可以治療其伴隨癥狀，如發熱出汗、口干舌燥等。中醫治療極大地提高了病人的生活質量，降低了治療和時間成本，增加了臨床治愈率等。但中醫治療便秘機制仍不清楚，限制了推廣和應用。所以，建立具有中醫特色的動物模型尤為重要。本文通過整理分析便秘中醫證候動物模型近10年的研究和評價方法，以期為今后的研究和學者提供參考。

1 虛證

1.1 氣虛便秘模型

氣虛便秘是指氣生成不足或消耗太過所致的腸道推動無力，表現為排便無力伴少氣懶言、腹痛喜按、舌質淡紅或有齒痕、苔薄白等癥狀。王好強等[9]通過采用大鼠饑飽飲食、過度疲勞配合嗎啡注射以減少氣的生成和增加消耗造模，觀察大鼠排便情況判定是否成功建立便秘模型外，且同時以大鼠飲食、飲水量下降、喜靜少動、精神萎靡、毛發枯槁、游泳耐力下降等表現判定為氣虛模型建立成功。該模型充分運用中醫理論造模，且操作簡單，可重復性高。

1.2 血虛便秘模型

血虛便秘指陰血不足，腸道失于濡養而致腸道干澀、大便積于腸腑，主要表現為便秘伴面色少華、頭暈、舌質淡、苔薄白等血虛癥狀。血虛的病因包括失血過多、生血不足、瘀血阻礙新血生成等。邱劍鋒、劉五州[10-11]等通過放血法減少細胞數量建立模型。該模型對失血量難以控制、傷口感染等情況也會直接影響到動物的死亡率和實驗指標，其更適用于急性失血如外傷、術后等導致便秘的課題研究。杜麗東[12]等采用溶血法配合化學損傷法，減少外周細胞數量和抑制骨髓造血建立模型。該血虛模型與西醫貧血模型一致，較放血法更加簡單易行，容易規范化，血虛狀態更持久，對外周血和骨髓造血均有影響，更加符合中醫“整體觀”的思想，但仍需要進一步驗證。

陰虛便秘多因腎陰不足、腸失濡潤所致，主要表現為便干如羊屎狀，伴手足心熱、心煩失眠、舌紅少苔等陰虛癥狀。目前較穩定的造模法是模擬甲狀腺機能亢進完成, 因為該病常出現陰虛火旺癥狀。如杜麗東等[13]采用大鼠灌胃甲狀腺素片混懸液和洛哌丁胺造模，劉瑤[14]等采用小鼠灌胃甲狀腺素和利血平復制陰虛津傷證便秘動物模型。通過觀察大鼠大便情況判定是否成功建立便秘模型外，同時以大鼠出現躁動不安、豎毛、皮毛光澤度差、尿色較深等判定是否成功建立陰虛模型。該模型具有方法簡便、成功率高、死亡率低、穩定性強、重復性好等優點。

1.4 陽虛便秘模型

陽虛便秘是由于陽氣虛衰、陰寒內盛、積滯腸腑所致，主要表現為缺乏便意，排便困難伴腰膝冷痛，面色白光白、四肢不溫、舌淡苔白等陽虛癥狀。杜麗東[13]等給予大鼠0 ℃生理鹽水和洛哌丁胺灌胃造模；蔡華艷[15]等給予大鼠大黃混懸液灌胃和氧化可的松注射液肌肉注射造腎陽虛便秘模型；王嵐[16]等采用食醋+活性炭冰水法建立脾陽虛便秘模型；鄒穎[17]等給予小鼠番瀉葉100%水煎液灌胃+饑飽失常法造脾虛模型基礎上采用限制飲水和控制飲食方法造成便秘模型，并且經枳術丸治療后癥狀緩解；鄭學寶[18]等采用饑飽失常、過度疲勞法配合禁水法復制脾陽虛模型；楊勇[19]等采用小鼠飲食失節、勞逸失常法配合洛哌丁胺灌胃建立脾陽虛模型。綜上，目前對陽虛便秘模型的制作主要通過冰水或苦寒瀉下藥物灌胃、飲食勞逸失常兩方面手段實現。通過觀察排便情況和畏寒喜暖、踡縮拱背、倦怠嗜睡、消瘦等癥狀判定陽虛便秘模型是否成功。

1.5 氣陰兩虛便秘模型

氣陰兩虛便秘是由于氣虛合并陰虛導致腸道功能異常，主要表現為排便困難伴氣短乏力、潮熱盜汗、神疲懶言、舌淡紅、脈弦細等氣陰兩虛癥狀。林仁敬[20]等根據行氣利水的思想，對大鼠皮下注射鹽酸嗎啡注射液和灌服行氣水煎液(青皮、枳殼、附子，劑量13 g/kg)建立模型，有創新、有理論依據，穩定性較好,安全性、成功率較高，值得借鑒。

2 實證

2.1 熱秘模型

熱秘是指燥熱內結腸腑致大便干結，不易排出，主要表現為腹脹腹痛、小便短赤、舌紅苔黃等實熱證癥狀，常見于平素喜食辛辣、肥甘味厚的患者。陳立軍[21]等給予大鼠熱性中藥(附子煎煮液與干姜、肉桂、吳茱萸、胡椒揮發油混合濃縮)結合洛哌丁胺灌胃造模，結果出現排便時間延長，24 h排便粒數減少，糞便含水率降低，小便黃，體質量增長緩慢等癥狀，與臨床熱結便秘癥狀相似度高，且操作簡單，成本低，安全性高，實用性高。

2.2 冷秘模型

(2) 隨著行車速度的逐步增大，行車速度與結合梁跨中最大撓度并非呈線性變化，而是在某些速度點處有下降現象，但總體來說隨速度增加撓度呈上升趨勢。

冷秘是指來自寒邪積聚腸道、腸道運行受阻所致，主要表現排便困難、腹中冷痛、得溫則減、四肢不溫、舌淡苔白膩等實寒證癥狀，常見于生冷飲食或腹部受涼的患者。段秀俊[22]等采用小鼠禁食不禁水12 h后灌服0 ℃冰水2次成功建立冷秘模型，但是便秘癥狀不夠持久。因此，有學者[23-24]將造模時間延長，采用0 ℃生理鹽水灌胃連續14 d，便秘癥狀更加明顯，模型更加穩定，操作簡單，取材容易。

2.3 食積便秘模型

食積便秘是指飲食積滯導致的便秘，常伴腹脹、噯氣、舌苔白膩等癥狀。所以，屈暢[25]等采用高蛋白高熱量飲食和腹腔注射阿托品復制便秘模型，通過觀察糞便數量和腸道重量判定模型成功。該模型造模方法簡單，理論依據充分，成功率高，適用于食積導致便秘的機制等科學研究。

3 肝郁脾虛證

肝郁脾虛便秘是指肝木郁久乘脾土，致脾氣虛弱、中氣不足、腸道傳導功能失常，主要表現為便秘伴食少納呆、情志抑郁或急躁易怒、舌苔白膩、脈弦細等癥狀。涂星[26]等采用母嬰分離結合冰水灌胃法建立模型，通過排便情況和易躁易怒、活動減少、食量減少、形體消瘦等癥狀判定肝郁脾虛便秘模型的成功。該模型通過復方中藥逍遙散進行反證有效，具有復制容易、穩定性好、成功率高等特點，值得推廣應用。

4 討論

4.1 便秘模型的特點及不足

4.1.1 模型數量單一 便秘中醫證候動物模型種類眾多，包括有氣虛證、血虛證、陰虛證、陽虛證、氣陰兩虛證、實熱證、寒積證、食積證和肝郁脾虛證模型。一方面，根據《便秘中醫診療專家共識意見》(2017)[27]中的便秘分型，除氣滯秘暫時沒有明確的模型外，其余證型皆有明確研究，而涂星等[26]所建立的肝郁脾虛便秘模型與氣滯秘病機有共通之處。肝郁致脾氣郁滯腸腑，腑氣不通而致便秘，可嘗試在該造模方法基礎上改進建立氣滯便秘模型。另一方面，可供選擇的各證候模型較局限。這可能因為在疾病過程中中醫證候是變化的。如氣虛便秘模型可逐步演變為血虛秘、陽虛秘等，十分影響模型的穩定性。同一證候模型影響因素眾多。如脾陽虛模型的復制方法眾多，其病因包括饑飽失常、過食生冷、飲食偏嗜、飲食不節等。采用單因素造模成功率較低、穩定性差，而采用多因素變量太多，可控性和可重復性較差。同一致病因素可以導致不同的中醫證候，如饑飽飲食和過度疲勞法既可以導致氣虛秘，又可以導致陽虛秘。而如今又缺乏嚴謹系統的中醫證候動物模型評價體系，使得造模后無法準確判斷證候。

4.1.2 缺乏嚴謹系統的模型評價體系 以上模型所涉及的便秘指標包括糞便形態觀察、首粒黑便排出時間、5 h、6 h、12 h或24 h內糞便粒數、糞便濕重、干重、含水率、小腸推進率、結腸含水量、結腸疼痛感覺閾值等。其中各模型指標不同，暫無判斷便秘成功的統一標準。而且個別便秘模型癥狀體征相似或相互矛盾，如陽虛便秘模型中，腎陽虛[13]和脾陽虛[16]癥狀，均可見體質量下降、活動減少、拱背等陽虛癥狀,癥狀相似；同為血虛便秘模型，有的煩躁不安[11]，有的蜷縮、喜臥、萎靡[13]，癥狀相互矛盾。

建立模型所使用的止瀉藥種類眾多，如嗎啡[9-10、18]、地芬諾酯[28-29]、洛哌丁胺[30]、阿托品等。另外同一實驗動物、同一藥物使用用量卻各有不同，而目前暫無研究表明最佳藥物和最佳用量，所以為提高實驗的規范化、合理性和節約實驗成本等，還需要進一步實驗對比研究。

4.1.3 造模法存在爭議 以上造模法存在以下問題，即同一造模方法對應不同的證候模型。如冰水灌胃造模，有人認為是陽虛便秘模型[13]，有人認為是冷秘模型[22-24]。模型[28-30]照搬西醫模型，單純采用止瀉藥復制中醫證候模型的科學性有待考證。模型單純將疾病模型和證候模型機械相加[9-13、19-21]，割裂了模型中“病”與“證”的聯系，與臨床病證結合理念背道而馳。模型復合因素太多[16-19]，這不利于模型的穩定性和可靠性等。

4.2 便秘模型的改進方法及建議

針對各證候便秘模型數量少的問題有以下3種思路：深入分析每一種證型的病因病機，從其他容易模擬的致病因素入手，如采用老年大鼠建立氣陰兩虛便秘模型，因為老年性便秘常以氣陰兩虛為主[31]。參考其他相同證型不同疾病造模方法，如熱秘模型可以參考胃潰瘍熱證模型[32]。復制證候高發病的病理特征、病理表現等, 從而誘導證的發生，如陰虛證常見于肝炎、肝硬化[33-34]等疾病。

完善便秘中醫證候模型評價體系：通過實驗統計確定動物便秘各指標參考值；根據常用實驗動物四診采集標準[35]和實驗室檢測指標的辨證分析, 對各種便秘動物模型外在表征進行區分；結合現代研究技術，動態觀察動物模型證候的演變過程和持續時間等；增加“以藥測證”的方法，逆向判斷證候模型是否成功。

為了模型的可行性、目的性和科學性，應當堅持以中醫理論為指導建立模型，嚴格按照中醫臨床診斷學的要求搜集、判斷動物的癥狀、體征，加強模型的比較醫學研究，全面分析模型征象與本質，做到“一模一證”，采用最佳造模因素和模型構建方法，盡可能減少復合影響因素。

綜上所述，目前便秘中醫證候動物模型為便秘的研究提供了一定的參考和標準，但仍需要進一步研究和完善。所以，建立更加統一化、規范化、合理化、穩定化的便秘中醫證候動物模型，才能對今后中醫藥的發展、疾病發病機制研究、臨床研究和新藥研發起到重要的推動作用。