蒸發(fā)光散射檢測器在中藥成分分析中的應(yīng)用研究

霍秦秦 孫立麗 秦麗娜 王婉婷

（1 吉林市食品藥品檢驗所，吉林 吉林 132000；2 華北制藥華勝有限公司，河北 石家莊 050000）

1 蒸發(fā)光散射檢測器的介紹

1.1 蒸發(fā)光散射檢測器的概述：作為一種新型的通用型檢測器，蒸發(fā)光散射檢測器可以很大程度上克服傳統(tǒng)UV檢測器檢測方法的不足，同時蒸發(fā)光散射檢測器還可運(yùn)用在超臨界流體色譜和逆流色譜的檢測中。目前，在醫(yī)藥、化工、食品等行業(yè)都會用到蒸發(fā)光散射檢測器[1]。

1.2 蒸發(fā)光散射檢測器的工作原理 蒸發(fā)光散射檢測器通過利用流動相與被檢測物質(zhì)之間相差的蒸氣壓來除去揮發(fā)的流動相，并在此基礎(chǔ)上利用不揮發(fā)性的組分粒子讓從激光光源中發(fā)出的光受到散射，硅光二極管會記錄并通過信號輸出這些受到散射的光信號[2]。

霧化過程，蒸發(fā)過程，檢測過程是蒸發(fā)光散射檢測器運(yùn)行的3個過程。霧化過程是將色譜柱的流出物利用惰性氣體或純凈空氣霧化[3]。蒸發(fā)過程就是讓色譜柱流出物中的流動相在加熱的漂移管中揮發(fā)，而留下?lián)]發(fā)性較小的粒子作為被檢測的粒子。檢測過程，這是測定不揮發(fā)性粒子對光的散射過程，最終將這種光的散射信號記錄下來。

1.3 蒸發(fā)光散射檢測器的優(yōu)點及特殊性：蒸發(fā)光散射檢測器的作用范圍十分廣泛，不僅可以作為高效液相色譜的色譜檢測器，還可以作為超臨界流體色譜以及高速逆流色譜的色譜檢測器[4]。蒸發(fā)光散射檢測器作為新型的通用檢測器，它有三個無法被替代的優(yōu)點：第一，蒸發(fā)光散射檢測器不依賴樣品的光學(xué)性質(zhì)。凡是揮發(fā)性不超過流動相的物質(zhì)，在蒸發(fā)光散射檢測器上都可以產(chǎn)生響應(yīng)。第二，蒸發(fā)光散射檢測器在支持梯度洗脫方面占據(jù)了極有利的優(yōu)勢，流動相配比變化對基線產(chǎn)生的影響可以被蒸發(fā)光散射檢測這種方法消除。第三，蒸發(fā)光散射檢測器與傳統(tǒng)的示差檢測器及紫外低波長檢測方法相比會有更好的靈敏度。除此以外，與UV檢測器進(jìn)行對比，蒸發(fā)光散射檢測器也表現(xiàn)出了它在檢測方面的特殊性。為了能合理地限制非揮發(fā)性的緩沖鹽的使用，使用蒸發(fā)光散射檢測器時，要求流動相和修飾劑都必須具有良好的揮發(fā)性。

2 中藥成分分析

對中藥成分進(jìn)行分析會有以下六點作用：第一，可以對中藥的真?zhèn)芜M(jìn)行辨別；第二，可以對中藥藥材品質(zhì)的優(yōu)劣進(jìn)行評定；第三，可以對中藥藥材中毒性成分的含量進(jìn)行監(jiān)控；第四，還可以對中藥藥材中雜質(zhì)的含量進(jìn)行監(jiān)控；第五，使GAP藥材品質(zhì)得到保證；第六，對中藥制劑的質(zhì)量進(jìn)行監(jiān)控。

3 蒸發(fā)光散射檢測器在中藥分析中的優(yōu)勢

在復(fù)雜的中藥成分中有一部分化學(xué)成分是在紫外波長處無法吸收的，還有一部分化學(xué)成分只在紫外的末端有吸收，這就限制了傳統(tǒng)紫外檢測器的使用[5]。同時，由于流動相的干擾用，使用傳統(tǒng)的紫外檢測器對中藥成分分析存在色譜分離的問題，這也是影響紫外檢測器對中藥成分進(jìn)行分析的一大因素。但是蒸發(fā)光散射檢測器恰好在某種程度上彌補(bǔ)了這些不足之處，例如在皂苷類成分、糖類成分、內(nèi)酯類成分以及部分生物堿等成分的測定及分析方面，使用蒸發(fā)光散射檢測器檢測就取得了滿意的結(jié)果。

4 蒸發(fā)光散射檢測器在中藥分析中的應(yīng)用

4.1 蒸發(fā)光散射檢測器測定中藥中皂苷元的含量。以葫蘆巴為例，建立葫蘆巴的高效液相色譜—蒸發(fā)光散射檢測器分析方法。以Kromasil C18色譜柱（250 mm×4.6 mm，5μm）為固定相，柱溫為40 ℃，以乙腈-水（95:5）為流動相，流速為0.8 mL/min。結(jié)果顯示：皂苷元在0.792～3.96 μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)為r=0.9998，葫蘆巴藥材中的皂苷元的平均回收率=100.13%。在n=5時RSD為1.9%。高效液相色譜—蒸發(fā)光散射檢測器分析方法準(zhǔn)確度高，重現(xiàn)性好，可作為控制葫蘆巴質(zhì)量的方法。

4.2 蒸發(fā)光散射檢測器測定中藥中的生物堿含量。以地骨皮為例，建立地骨皮中甜菜堿的高效液相色譜—蒸發(fā)光散射檢測器分析方法，以250 mm×4.6 mm，5 μm的Luna C18色譜柱為固定相，色譜柱溫度設(shè)為30 ℃，流動相為99.9∶0.1的水—冰醋酸，流速設(shè)為0.15 mL/min，漂移管溫度為100 ℃，氣體流速為2.50 L/min。通過蒸發(fā)光散射檢測器檢測得出甜菜堿的含量在0.486～2.43 μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)r為0.9999，地骨皮藥材中甜菜堿的平均回收率為97.4%，在n=5的情況下RDS為1.3%。以上分析方法準(zhǔn)確度高，重現(xiàn)性好，可以作為控制地骨皮質(zhì)量的檢測方法。

4.3 蒸發(fā)光散射檢測器對中藥中氨基酸含量的測定。對板藍(lán)根中的精氨酸建立高效液相色譜—蒸發(fā)光散射檢測器分析方法。線性回歸方程為Y=6.1435+1.2805X，r=0.9992，中藥板藍(lán)根中精氨酸的平均回收率為99.3%，在n為5的情況下，RSD為0.9%。高效液相色譜—蒸發(fā)光散射檢測器分析方法準(zhǔn)確度高，重現(xiàn)性好，可以作為控制板藍(lán)根質(zhì)量的方法。

5 總結(jié)

在那些弱紫外吸收或者無紫外吸收的中藥成分的分析中，蒸發(fā)光散射檢測器檢測法確實發(fā)揮出來它獨特而不可替代的作用。除此以外，蒸發(fā)光散射檢測器在定性鑒別研究中也可以相對全面地反應(yīng)出樣品的信息。但到目前為止利用蒸發(fā)光散射檢測器的檢測方法對中藥成分進(jìn)行分析還有許多不盡如人意的地方，蒸發(fā)光散射檢測器還不能完全代替UV檢測器對中藥成分進(jìn)行分析測定。因此需要繼續(xù)發(fā)展完善蒸發(fā)光散射檢測器及相應(yīng)檢測技術(shù)，以便讓蒸發(fā)光散射檢測器在中藥成分分析中起到越來越重要的作用。