李潔
(夏邑縣人民醫(yī)院 感染內(nèi)科,河南 商丘 476400)
乙型肝炎在全世界范圍內(nèi)發(fā)病率較高,有研究顯示每年因乙型肝炎病毒而出現(xiàn)終末期肝硬化和肝癌的患者所占比例為15%~25%,因此需盡早診斷乙型肝炎病毒感染,實(shí)施相應(yīng)的治療干預(yù)[1]。乙型肝炎病毒血清標(biāo)志物檢測(cè)和HBV DNA檢測(cè)屬于目前檢測(cè)乙型肝炎病毒的主要方法[2]。本研究應(yīng)用化學(xué)發(fā)光微粒子免疫測(cè)定法和熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)測(cè)量乙型肝炎患者機(jī)體血清HBeAg、HBsAg、HBeAb、HBcAb及HBV DNA水平,并檢測(cè)HBcAb IgM陽(yáng)性患者血清HBV-DNA水平,探討乙型肝炎血清標(biāo)志物與HBV DNA水平的相關(guān)性。
1.1 一般資料選取2018年1月至2019年1月夏邑縣人民醫(yī)院收治的250例乙型肝炎患者,其中男176例,女74例,年齡13~69歲,平均(42.6±5.8)歲,慢性乙型肝炎患者223例,HBcAb IgM陽(yáng)性乙肝患者27例。確診為乙型肝炎,排除嚴(yán)重肝腎疾病及腫瘤疾病患者?;颊咦栽竻⑴c本研究并簽署知情同意書(shū)。本研究經(jīng)夏邑縣人民醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審批通過(guò)。
1.2 檢測(cè)方法首先測(cè)量患者HBV M水平,所用測(cè)量?jī)x器為荷蘭Philips公司生產(chǎn)的HKDHG5500型自動(dòng)化學(xué)發(fā)光儀,定期檢測(cè)HBV M水平,所應(yīng)用的檢測(cè)試劑為儀器配套試劑。各項(xiàng)指標(biāo)陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)為:HBsAg在50 IU·L-1及以上;HBeAg在1 S/CO及以上;HBcAb在1 S/CO及以上;HBsAb在10 IU·L-1及以上;HBeAb在1 S/CO及以下;HBcAb IgM在1 S/CO及以上。在檢測(cè)HBsAg時(shí),采用試劑盒稀釋液進(jìn)行500倍稀釋后進(jìn)行檢測(cè)。然后開(kāi)展HBV DNA定量檢測(cè),HBV DNA水平檢測(cè)方法為FQ-PCR法,試劑盒購(gòu)自上海斯諾科基因有限責(zé)任公司,儀器為美國(guó)GE公司生產(chǎn)的6300T RCR System。對(duì)參數(shù)做如下設(shè)置。93 ℃,2 min;93 ℃,45 s;55 ℃,1 min。10個(gè)循環(huán)。93 ℃,30 s;55 ℃,45 s。30個(gè)循環(huán)。在完成反應(yīng)過(guò)程后,在Analysis菜單下,選擇Analyze,使儀器自動(dòng)對(duì)結(jié)果進(jìn)行分析,按照儀器和試劑盒說(shuō)明書(shū)開(kāi)展詳細(xì)操作?!?br>