電化學(xué)發(fā)光免疫法與酶聯(lián)免疫法在梅毒診斷中的價(jià)值分析

陸正賢

啟東市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，江蘇啟東 226200

梅毒是一種危害性巨大、傳染性非常強(qiáng)的慢性傳染病，由梅毒螺旋體(TP)感染導(dǎo)致。 大部分的患者在感染梅毒后要經(jīng)歷較長(zhǎng)時(shí)期的潛伏期，早期癥狀并不顯著，因此病情往往遷延，得不到及時(shí)的治療，甚至引發(fā)嚴(yán)重的并發(fā)癥[1]。人類為梅毒螺旋體的傳染源，主要傳播途徑包括了性傳播、輸血傳播、手術(shù)傳播、母嬰傳播和接觸污染物等。隨著我國(guó)經(jīng)濟(jì)發(fā)展以及流動(dòng)人口數(shù)量的增多，梅毒已經(jīng)逐漸成為嚴(yán)重危害社會(huì)公共衛(wèi)生安全的一個(gè)重要問題，而加強(qiáng)對(duì)梅毒早期診斷的有效性、準(zhǔn)確性、快捷性是眼下最為關(guān)鍵的一個(gè)問題。現(xiàn)階段臨床上采用的梅毒診斷的方法主要有梅毒螺旋體血凝試驗(yàn)（TPHA）、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）、梅毒螺旋體顆粒凝集試驗(yàn)（TPPA）、梅毒快速血漿反應(yīng)素試驗(yàn)（RPR）、免疫印跡法（WB）等，其中以ELISA 法應(yīng)用最為廣泛，臨床上通常根據(jù)具體需要選擇相應(yīng)的診斷方法[2]。 但上述方法均存在一定程度的局限，近年來隨著電化學(xué)發(fā)光免疫法（ECLIA）的發(fā)展，逐漸被應(yīng)用到了梅毒診斷中。 為了進(jìn)一步對(duì)比探討ECLIA法和ELISA 法用于梅毒診斷的靈敏度和準(zhǔn)確性開展了此次研究，選擇83 例2018 年12 月—2019 年6 月該院進(jìn)行梅毒檢測(cè)的疑似梅毒患者為研究對(duì)象，報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇83 例該院進(jìn)行梅毒檢測(cè)的疑似梅毒患者為研究對(duì)象， 經(jīng)TPPA 確診試驗(yàn)檢測(cè)陽(yáng)性73 例， 陰性10 例。 其中男性55 例，女性28 例，年齡最小21 歲，最高97 歲，年齡平均為（55.8±15.7）歲。 該次研究患者均知情同意，自愿參與該次研究，且經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 方法

挑選在該院進(jìn)行梅毒抗體ECLIA 法檢測(cè)診斷的弱陽(yáng)性標(biāo)本（發(fā)光值在1-10 COI）和臨界值標(biāo)本（發(fā)光值接近1COI）， 于當(dāng)日進(jìn)行ECLIA 法和ELISA 法兩種方法檢測(cè)，最后用TPPA 確診試驗(yàn)進(jìn)行檢測(cè)。 ECLIA 法采用的是電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀（羅氏E602型）和配套試劑進(jìn)行梅毒抗體檢測(cè)，嚴(yán)格按操作說明書進(jìn)行， 從樣本加樣到結(jié)果判讀均由分析儀自行完成， 發(fā)光值>1 .00 COI 為陽(yáng)性，<1.00 COI 為陰性。ELISA 法采用ELISA 試劑盒（上海科華生物工程有限公司生產(chǎn)）， 使用艾德康全自動(dòng)酶標(biāo)儀（ELISA600），判斷檢測(cè)結(jié)果：S/CO≥1.00 為陽(yáng)性， 反之S/CO<1.00為陰性[3]。TPPA 確診試驗(yàn)使用日本富士梅毒TPPA 診斷試劑盒， 嚴(yán)格按操作說明書進(jìn)行純手工加樣和稀釋，肉眼判定結(jié)果。陽(yáng)性判定基準(zhǔn)：致敏粒子最終稀釋倍數(shù)1∶80 以上的反應(yīng)圖像為陽(yáng)性時(shí)，該結(jié)果為陽(yáng)性，反之則為陰性。

1.3 觀察指標(biāo)

對(duì)比兩種檢驗(yàn)方法的準(zhǔn)確度、 靈敏度和特異性。計(jì)算兩種檢驗(yàn)方法與TPPA 確診試驗(yàn)結(jié)果之間的陽(yáng)性預(yù)測(cè)值和陰性預(yù)測(cè)值。

1.4 統(tǒng)計(jì)方法

采用SPSS 20.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行分析，計(jì)數(shù)資料用[n(%)]表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩種檢驗(yàn)方法結(jié)果與TPPA 確診試驗(yàn)結(jié)果之間的比較

TPPA 確診試驗(yàn)陽(yáng)性病例73 例，陰性病例10 例。ECLIA 法與ELISA 法結(jié)果見表1、表2。

表1 ECLIA 法梅毒診斷結(jié)果

表2 ELISA 法梅毒診斷結(jié)果

2.2 兩種檢驗(yàn)的準(zhǔn)確度、靈敏度、特異性和陽(yáng)性/陰性預(yù)測(cè)值比較

ECLIA 法的準(zhǔn)確度、靈敏度和陰性預(yù)測(cè)值均高于ELISA 法， 但特異度和陽(yáng)性預(yù)測(cè)值則低于ELISA 法。其中，靈敏度、特異性和陰性預(yù)測(cè)值在兩種方法之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

3 討論

表3 兩種檢驗(yàn)的準(zhǔn)確度、靈敏度、特異性和陽(yáng)性/陰性預(yù)測(cè)值比較[n(%)]

梅毒是一種性疾病， 傳播途徑包括母嬰傳播、性傳播、輸血傳播等，患有梅毒的孕婦可將梅毒自胎盤傳染給胎兒，導(dǎo)致流產(chǎn)或者早產(chǎn)。 隱性與顯性梅毒患者為傳染源，同性戀、性工作者、吸毒人員與HIV 感染者為梅毒感染高危人群[4]。人體在感染梅毒后，梅毒螺旋體將對(duì)患者的機(jī)體器官、組織造成侵犯，累及皮膚、內(nèi)臟和心血管、神經(jīng)系統(tǒng)和骨骼。隱性梅毒感染者可長(zhǎng)期為潛伏狀態(tài)，無明顯癥狀[5]。

梅毒并非不可治愈的疾病，臨床研究顯示梅毒感染早期經(jīng)診斷與及時(shí)治療后能夠治愈，并且能夠預(yù)防先天梅毒感染。為此，選擇使用靈敏度高、準(zhǔn)確度高和特異性高的檢測(cè)手段，進(jìn)行準(zhǔn)確快速的診斷與治療非常重要。梅毒首次感染后產(chǎn)生lgM 型抗體持續(xù)時(shí)間比較短，但隨著病情的發(fā)展，進(jìn)一步產(chǎn)生lgG 抗體，且持續(xù)增高，而在治療后lgM 型抗體則逐漸消失，但lgG抗體仍然在血清中存在， 并且有的能夠終生檢測(cè)出lgG 抗體。 因此血清學(xué)檢測(cè)用于梅毒診斷具有重要的意義[6]。我國(guó)現(xiàn)階段主要采用ELISA 法與ECLIA 法兩種特異性梅毒螺旋體血清檢測(cè)，該研究顯示二者對(duì)于早期梅毒的診斷有較高的靈敏度和準(zhǔn)確性，可為梅毒的及早診斷和治療提供比較準(zhǔn)確的依據(jù)[7-8]。ECLIA 為近年來逐步興起的新檢測(cè)手段，檢測(cè)范圍廣、速度快、重復(fù)性強(qiáng)，并且靈敏度和準(zhǔn)確度非常高，檢測(cè)過程穩(wěn)定性好，可避免污染。

該次研究進(jìn)一步對(duì)比探討了ECLIA 法和ELISA法用于梅毒診斷的靈敏度和準(zhǔn)確性， 結(jié)果顯示，ECLIA 法準(zhǔn)確度為93.98%，靈敏度為100.00%，特異度為50.00%， 陽(yáng)性預(yù)測(cè)值為93.59%， 陰性預(yù)測(cè)值為100.00%；ELISA 法準(zhǔn)確度為90.36%， 靈敏度90.41%，特異度為90.00%，陽(yáng)性預(yù)測(cè)值98.50%，陰性預(yù)測(cè)值56.25%。遲瓊等[9]比較了ECLIA 法與ELISA 在梅毒診斷中的應(yīng)用價(jià)值，通過對(duì)120 例疑似梅毒患者血清學(xué)試驗(yàn)、ECLIA 與ELISA 檢測(cè)，ECLIA 檢測(cè)的靈敏度、特異度、 準(zhǔn)確度、 陽(yáng)性預(yù)測(cè)值及陰性預(yù)測(cè)值分別為100.00%、97.73%、99.17%、98.70%、100.00%，ELISA分別為98.68%、100.00%、99.17%、100.00%、97.78%。該次結(jié)果與之比較具有一定的相似處。該次研究結(jié)果中，ECLIA 法的準(zhǔn)確度、 靈敏度和陰性預(yù)測(cè)值均高于ELISA 法， 但特異度和陽(yáng)性預(yù)測(cè)值則低于ELISA 法。結(jié)果提示，ECLIA 法與ELISA 法用于梅毒診斷均有非常高的靈敏度和準(zhǔn)確度，用于臨床梅毒篩查和診斷具有顯著的價(jià)值， 但ECLIA 法的靈敏度高于ELISA法，可用于弱陽(yáng)性樣本的檢測(cè)，避免出現(xiàn)ELISA 法假陰性而漏診。 需要注意的是ECLIA 法特異度低于ELISA 法，存在一定的誤診情況，由于梅毒患者的臨床癥狀、體征多且復(fù)雜，因此臨床診斷中還需要結(jié)合多方面的因素，最大程度地客觀評(píng)價(jià)檢測(cè)結(jié)果[10]。

綜上所述，ECLIA 法與ELISA 法用于梅毒診斷具有非常高的靈敏度和準(zhǔn)確度，對(duì)梅毒早期篩查和診斷具有顯著的價(jià)值， 尤其是ECLIA 法的靈敏度明顯高于ELISA 法，可用于弱陽(yáng)性樣本的檢測(cè)，避免出現(xiàn)ELISA 法假陰性而漏診。因此梅毒的臨床診斷中可首選ECLIA 法，從而更為客觀地評(píng)估診斷結(jié)果。