胎兒染色體異常血清學篩查與無創DNA 檢測的有效性及其可行性分析

杜升燁，李娜，黃憲霞，劉雪梅，曹呈國

1.濟南市人民醫院產科，山東濟南 271100；2.濟南市人民醫院中醫婦科，山東濟南 271100

染色體異常會導致多個器官或組織發生畸形病變，且該疾病屬于無法治療疾病，因此及早發現，并終止妊娠是減少該疾病的關鍵[1]。據臨床數據統計顯示，在我國每年由1 600 多萬的新生兒出生[2]，而因染色體異常導致的先天性致愚致殘缺陷兒可以占總出生人口的5%以上， 屬于世界上天生殘缺兒童出生率最高的國家，這對患兒及其后代的生存質量帶了嚴重影響，也會使患兒家庭以及社會帶來負擔[3]。針對孕婦產前進行有效的篩查和診斷可以有效降低先天性畸形兒的出生率，是保證分娩質量的關鍵手段[4]。此次研究針對來該院進行染色體異常篩查的孕婦， 選取2016年5 月—2018 年5 月該院接受篩查的1 500 名孕婦，采用血清學篩查以及無創DNA 檢查， 分析兩種檢測方式的準確性，并針對高危孕婦轉上級醫院進行產前診斷，進一步隨訪檢查結果，跟蹤妊娠結局。通過臨床資料，為染色體異常胎兒提供可靠的診療流程，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取該院接受篩查的1 500 名孕婦， 年齡19～45歲，平均年齡（28.8±3.2）歲；孕周15～20 周，平均孕周（18.1±2.3）周。 根據患者年齡將其分為Ⅰ～Ⅵ組，Ⅰ組孕婦40 名，年齡19～20 歲；Ⅱ組孕婦422 名，年齡21～25 歲；Ⅲ組孕婦463 名，年齡26～30 歲；Ⅳ組孕婦299 名；年齡31～35 歲；Ⅴ組孕婦172 名，年齡36～40歲；Ⅵ組孕婦104 名，年齡41～45 歲。前提是在拒絕羊水穿刺，自愿選擇DNA 檢測的。該次研究是在獲得醫院倫理委員會批準的前提下開展。 納入標準：①經B超檢測進行孕周校準， 確定孕婦孕周在14～21 周之間；②入組孕婦均為單胎妊娠；③體重低于100 kg；④入組孕婦對于該次研究內容知情，并自愿接受兩種檢測方式進行染色體異常篩查，且在同意書上簽字。 排除標準：①孕婦近期曾接受過細胞治療、異體輸血或移植手術等治療； ②孕婦自身屬于染色體異常狀態；③孕婦在4 周內曾接受過免疫治療；④孕婦自身不愿參與該次研究。

1.2 方法

①對入組患者進行血清學篩查，具體如下：取孕婦清晨空腹上肢靜脈血， 采用化學發光免疫分析儀（MP8 型）進行檢測，對絨毛膜促性腺激素、游離雌三醇以及甲胎蛋白水平進行測定， 然后對孕婦18 三體綜合征、21 三體綜合征和神經管畸形的風險率進行計算，≥1/270 為21 體綜合征高風險，在1/500～1/270之間為臨界風險，將檢測結果為高風險孕婦診斷為陽性[5]。

②無創DNA 檢測，該院與安諾優達基因科技（北京）有限公司協作，具體如下：使用專用CF 采血管進行采血，取孕婦外周靜脈血5 mL，將血液置于-4℃的冰箱中進行保存，通過離心獲得血清，對樣品DNA 進行提取分離，對cffDNA 采用PCR 技術擴增，并對樣本DNA 進行檢驗，對需檢驗樣本進行，生物信息分析采用其配套軟件BGPDV2.0.1 進行，對檢測見過進行判讀[6]。

1.3 診斷標準

針對檢測后為高危孕婦，建議轉入山東省立醫院進行羊水穿刺，做染色體核型分析和芯片分析，追蹤診斷結果。 染色體異常的以羊水穿刺作為金標準，針對未進行羊水穿刺的產婦， 以最終分娩結局作為金標準[7]。

1.4 統計方法

數據應用SPSS 18.0 統計學軟件進行分析，計數資料以[n(%)]表示，進行χ2檢驗，P＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 不同檢測方法篩查結果分析

血清學篩查檢出率為13.7%， 準確率88.1%，無創DNA 檢測檢出率為9.8%，準確率92.5%，兩種聯合檢測檢出率為5.2%，準確率97.9%，見表1。

2.2 不同檢測方法效能分析

表1 不同檢測方法篩查結果對比

聯合篩查靈敏度以及特異度明顯高于血清學篩查和無創DNA 檢測（P＜0.05），無創DNA 檢測靈敏度以及特異度明顯高于血清學篩查，差異有統計學意義（P＜0.05），見表2。

表2 不同檢測方法效能對比（%）

2.3 不同年齡檢出情況分析

不同年齡段染色體異常檢出率存在明顯差異，且年齡越高出現染色體異常的概率越高，差異有統計學意義（P＜0.05），見表3。

表3 不同年齡檢出情況分析

3 討論

染色體異常是起始于胚胎時期的嚴重疾病，目前針對該疾病并沒有有效的治療方案，而且該病癥具有較高的發病率，借助有效的產前篩查和診斷，降低染色體異常胎兒的出生率，是減少染色體異?；純撼錾年P鍵[8]。臨床最為常見的染色體異常綜合征為21 三體綜合征、18 三體綜合征以及13 三體綜合征[9]。 現階段針對染色體異常的篩查手段非常多樣，其中常見的方式有核磁共振、血清學、超聲等[10]。 目前臨床應用最為準確的診斷方式為超聲診斷輔助和羊水穿刺，但是該操作屬于有創檢測，檢測風險較高，且操作難度大，不適合作為廣泛檢測方式[11]。 而血清學篩查是目前臨床應用最廣泛的染色體異常篩查方式，該方式可以在沒有任何相應疾病提示孕婦人群中廣泛應用，可以將存在疾病危險的人群篩選出來，進行產前診斷[12]。

隨著醫療科技的不斷進步， 無創DNA 產前檢查技術在胎兒染色體異常篩查中得到廣泛應用[13]。 在孕婦懷孕中期，血液中會有游離狀態的胎兒DNA，通過對胎兒游離DNA 進行收集， 分析其染色體變異發生情況， 該方式檢測與常規血清檢測相比準確率更高，與羊水穿刺相比不會對孕婦機體造成損傷，減少危險事件發生率，是目前對于染色體異常檢查最受孕婦歡迎的一種檢測方式。

此次研究，針對來該院接受染色體異常篩查的孕婦采用兩種不同的檢測方式進行檢測， 研究結果顯示，與血清學篩查相比，無創DNA 檢測的靈敏度以及特異度均明顯升高，差異有統計學意義（P＜0.05），這一結果說明，與傳統血清篩查相比，無創DNA 檢測具有更高的靈敏度和特異度， 且兩種檢測方式聯合，使其靈敏度可特異度明顯提高。此次研究根據最終確診結果，對兩種檢測方式以及兩種方式聯合應用的準確率進行計算，得出血清學篩查檢出率為13.7%，準確率88.1%，無創DNA 檢測檢出率為9.8%，準確率92.5%，兩種聯合檢測檢出率為5.2%，準確率97.9%，這一結果進一步說明， 無創DNA 檢測準確率明顯高于血清篩查，此研究數據與王傳霞等[14]研究中的，22 例無創DNA 檢測異常孕婦中羊水穿刺染色體正常為3 例，19 例篩查結果與羊水穿刺結果相一致， 陽性率為86.4%的研究結果相近。此外，兩種聯合應用可以提高篩查準確率。該研究對不同年齡孕婦胎兒染色體異常發生率進行分析， 發現其發生率與孕婦年齡有關，年齡越大，發生胎兒染色體異常的概率越高。因此，建議選擇最佳育齡期進行生育，針對高齡產婦應加強產前檢查，盡量避免或減少染色體異常胎兒的出生。

綜上所述， 高齡產婦會增加染色體異常的發生率， 與血清學篩查相比， 無創DNA 具有更高的特異性，但是仍存在檢測誤差，針對高危孕婦建議其進行羊水穿刺， 從而更好地為產婦提供產前檢測方案，減少異常兒的出生，提高了人口素質。 有效地做到了出生缺陷的二級預防措施。