基于固體分散體技術哈蟆油滴丸成型工藝的研究

張 靜，孫敬蒙，張煒煜

（1.長春中醫藥大學，長春130117；2.吉林大學白求恩第一醫院藥學部，長春130021）

“哈蟆油滴丸”的主要原料為哈蟆油。哈蟆油為中國林蛙（Rana temporaria chensinensis David）雌蛙的干燥輸卵管，味甘、咸，性平，具有補腎益精、養陰潤肺的作用，收載于2015年版《中國藥典》一部。哈蟆油主產于吉林省長白山地區，具有很高的藥用和食用價值，是一種營養價值極高的滋補品，也是我國馳名中外的名貴食療性中藥；又稱為林蛙油、田雞油、哈什蟆油、蛤蟆油、蛤螞油、雪蛤油或雪蛤膏。近年來，哈蟆油在國內外消費量迅猛增加，逐漸受到了更為廣泛的關注。哈蟆油具有提高機體免疫功能與應激性能作用、抗氧化與抗衰老作用、調節血脂作用、對生長發育和性功能的影響、耐缺氧抗焦慮作用、抗疲勞作用及鎮咳祛痰作用等[1～3]。哈蟆油傳統的使用方法是取干哈蟆油，冷水洗干凈后浸泡20小時，把膨脹的哈蟆油隔水用文火燉，30分鐘后服用，此方法費時，而且具有腥味，難以吞咽。將其采用固體分散體技術，制備成滴丸制劑，具有口感好，服用方便，生產工藝簡單，質量穩定，便于攜帶，貯存等優點。本文旨在對“哈蟆油滴丸”的成型工藝進行研究，并獲得相關工藝參數[4～5]。

1 實驗材料

電子分析天平（上海精科天美，型號：FA1204B）；萬能粉碎機（上海宇硯機械設備，型號：30B型）；多功能滴丸實驗機（煙臺百藥泰中藥科技有限公司，型號：DWJ-2000S-DP）；甲基硅油（100mm2/s）（江西阿爾法高科藥業有限公司）；輕質液狀石蠟（西安泰華醫藥科技有限公司）；聚乙二醇 （湖南爾康制藥股份有限公司）、聚維酮（西安天正藥用輔料有限公司）、硬脂酸鈉（湖南九典制藥股份有限公司）、明膠（陜西圣瑞醫藥科技有限公司）；哈蟆油（安徽易元堂中藥飲片科技有限公司）。

2 實驗方法與結果

2.1 粉碎工藝研究

經過凈制的哈蟆油呈顆粒狀，為了便于制劑，需將哈蟆油粉碎。由于哈蟆油原料較昂貴，所以從經濟及成本方面考慮，將哈蟆油粉碎為細粉，既能保證出粉率，節約成本，又能避免因粉碎不完全，粉末中摻有哈蟆油纖維狀組織而導致的丸劑成型性不好的問題。

干燥后哈蟆油粉碎成細粉，計算出粉率；重復三次操作，結果見表1。

表1 哈蟆油粉碎的出粉率

結果表明，三批平均出粉率為98.2%，RSD為0.10%，粉碎工藝合理。產品生產處方以極細粉足量投料。

2.2 輻照方法及劑量的確定

為了保證哈蟆油微生物限度指標合格，并且保證哈蟆油的成分不被破壞，我們首先采用低溫間歇滅菌法滅菌，但不能保證哈蟆油細粉微生物限度合格，故采用60Co滅菌。研究方法如下。

2.2.1 低溫間歇滅菌法

2.2.1.1 實驗分組

3天組：分別取3組哈蟆油細粉，每組1g，組號3-1、3-2、3-3， 每組每天分別滅菌 1小時、1.5小時、2小時，連續低溫間歇滅菌3天。

4天組：分別取3組哈蟆油細粉，每組1g，組號4-1、4-2、4-3， 每組每天分別滅菌 1小時、1.5小時、2小時，連續低溫間歇滅菌4天。

5天組：分別取3組哈蟆油細粉，每組1g，組號5-1、5-2、5-3， 每組每天分別滅菌 1小時、1.5小時、2小時，連續低溫間歇滅菌5天。

表2 哈蟆油滅菌時間表

2.2.1.2 實驗方法

按照表2分組，分別取哈蟆油細粉1g，置已滅菌的稱量瓶中，密封，采用熱風循環烘箱進行滅菌，溫度控制為60℃，按編號分別滅菌連續3天、4天、5天，每天分別滅菌1小時、1.5小時、2小時，殺滅微生物繁殖體，在室溫條件下放置24小時，測定微生物限度，結果見表3。

2.2.1.3 實驗結果

表3 微生物測定結果

結果表明，低溫間歇滅菌法對于殺滅大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌等有效，而對于霉菌沒有作用，故低溫間歇滅菌法不能保證哈蟆油細粉微生物限度合格。

2.2.2 輻射滅菌法的60Co滅菌法

依據江月仙[6]等在《60Co-γ射線輻照對哈蟆油營養成分的影響研究》中結論，在5～15kGy劑量范圍內，5kGy輻照前后維生素D、E含量變化均無顯著性差異（P>0.05），而10～15kGy輻照以及加速實驗均使哈蟆油中維生素A、E含量顯著降低（P<0.01），維生素D受照射影響較小；脂肪酸在5～15 kGy輻照后變化不明顯，但加速實驗發現15 kGy使脂肪酸含量顯著提高；經SDS-PAGE分析其分子量為20 KD的蛋白區帶隨輻照劑量增加而變深。證明60Co照射動物性高蛋白、低脂肪、低維生素固體樣品，在高輻照劑量下加速實驗均有不同程度影響，但5 kGy劑量輻照還是安全的。最終確定60Co照射滅菌法，劑量5 kGy。

2.3 賦形劑的選擇

為了保證丸劑的溶散時限合格，采用水溶性賦形劑。常見的有聚乙二醇（PEG）類、聚維酮（PVP）、硬脂酸鈉、泊洛沙姆、明膠等。聚乙二醇主要以聚乙二醇4000、聚乙二醇6000較為常用，先后采用聚乙二醇4000、聚乙二醇6000、聚維酮（PVP）、硬脂酸鈉、明膠為賦形劑，根據圓整度、外觀對丸劑進行評價，結果見表4。

表4 基質的選擇

結果表明，當以聚乙二醇4000為賦形劑時，丸劑成型性較好，所以確定采用聚乙二醇4000作為“哈蟆油滴丸”的賦形劑。

2.4 藥物與賦形劑比例的確定

以藥物在賦形劑中分散狀態、成丸狀態為考察指標，對藥物與賦形劑的比例進行考察，結果見表5。

表5 藥物與賦形劑比例的確定

結果表明，當藥物與賦形劑的比為1∶3時，藥物在賦形劑中的分散狀態較好，制備的丸劑狀態較好，所以最終確定藥物與聚乙二醇4000的比為1∶3。

2.5 冷凝液的選擇

常用的冷凝劑包括甲基硅油、液狀石蠟。以圓整度、成丸狀態為考察指標，對不同的冷凝劑進行考察，結果見表6。

表6 冷凝液的選擇

結果表明，采用液狀石蠟作為冷卻劑，由于沉降速度過快，容易拖尾，且丸劑表面未完全冷凝，成型效果不好。當冷凝劑為甲基硅油及甲基硅油（100mm2/s）∶輕質液狀石蠟（1∶1）時，滴丸狀態較好，綜合考慮滴丸狀態及生產成本，最后確定甲基硅油（100mm2/s）：輕質液狀石蠟（1∶1）為冷凝液。

2.5 混合溫度的確定

聚乙二醇的結晶點為50℃～55℃，為了避免聚乙二醇結晶，以圓整度、成丸為考察指標，對不同混合溫度進行考察，結果見表7。

表7 混合溫度的確定

結果表明，當熔融溫度為70℃時，丸劑的成型性較好，同時為了保證哈蟆油中蛋白質的成分不被破壞，所以確定藥物與賦形劑熔融溫度為70℃。

3 小結與討論

通過對哈蟆油滴丸粉碎工藝、賦形劑的選擇、藥物與賦形劑比例的研究，冷凝液的研究及混合溫度等方面的研究，確定了哈蟆油滴丸的最終成型工藝為：哈蟆油粉碎為細粉、聚乙二醇4000作為“哈蟆油滴丸”的賦形劑、藥物與聚乙二醇 4000的比為1∶3、甲基硅油（100mm2/s）∶輕質液狀石蠟（1∶1）為冷凝液、藥物與賦形劑熔融溫度為70℃，哈蟆油細粉的滅菌方法為60Co照射滅菌法，劑量5 kGy。經過反復驗證及中試生產實驗，證明該工藝穩定可行。

本產品旨在提高人們的健康水平，從中藥資源中開發出具有增強免疫力功能的保健食品。根據中醫理論選用哈蟆油為原料，用現代的固體分散體制備技術，經過原料的檢驗、粉碎、過篩、滅菌、混合、滴制、冷卻、除油、分劑量、內包裝、外包裝、成品檢驗、入庫等工藝制成。產品的功效成份穩定可控，產品的安全性、穩定性及衛生學方面均符合國家關于保健食品評價和規范要求。