邢德芳
禽腦脊髓炎的診斷
邢德芳
(山東省萊陽市團旺畜牧獸醫工作站 265217)
通過對發病雞進行臨床剖檢、病理組織觀察及病毒分離鑒定,結果雛雞患禽腦脊髓炎,同時制定了的防控措施,豐富了禽腦脊髓炎的臨床研究數據。
2018年10月,山東某地區某肉種雞場孵化3批肉雛雞,連續發生疫病,以共濟失調和頭頸震顫為主要臨床特征,發病率為50%左右。有的病例癱瘓、不能正常站立,隨之頭頸出現輕度的顫動;有的不愿走動,蹲坐在跗關節上,一側腿麻痹、半斜倒地;有的站立不穩,手握時會出現間歇性的震顫。對15只患病雛雞進行剖檢,初步診斷該雞群所患疾病為禽腦脊髓炎,通過實驗室檢測進行確診,并制定了相應的防控措施。
1.1 臨床檢查與樣品處理 對送檢的患病雞進行解剖,觀察其病理變化,同時采集眼、腦、心、胰腺、腸道、脾臟等組織,置于10%福爾馬林溶液中固定24~48h,按照常規方法制作石蠟切片,HE染色,光學顯微鏡下觀察組織病理學變化。另外將一份腦組織置于-80℃保存,進行病原分離鑒定。
1.2 病毒分離鑒定 將采集的腦組織反復凍融、研磨,5000r/min離心10min,取上清,提取組織中的總RNA,進行RT-PCR。上游引物P1 5’-CTTGTGGGGACATAAATTCAC-3’;下游引物P2 5’-CGCTCTGGGAACAGAAAACTG -3’。

表1 PCR體系

表2 反應條件為
PCR擴增結束后,產物進行1.0 %的瓊脂糖凝膠電泳。
2.1 剖檢變化 有的雛雞兩腳拆開翅膀著地(圖1A);部分雞只出現一側眼球晶體混濁云霧狀,內有絮狀物,瞳孔反射減弱,眼球增大;腦膜充血、水腫、出血,有時可見液化現象;心臟、胰腺、脾臟可見壞死點;其他器官未見明顯病理變化。
2.2 病理組織學觀察 腦組織發生非化膿性腦炎,顯微鏡下可見神經元中心性染色質溶解,細胞變圓、染色變淡、核破碎消失,有的神經元皺縮、胞漿凝固。腦膜血管充血、出血,有淋巴細胞浸潤增生,內皮細胞腫脹變性,血管周圍炎性細胞浸潤,形成“袖套”現象。膠質細胞呈彌漫性或是局灶性增生,形成膠質結節。心肌間質淋巴細胞增生,而心肌細胞輕微顆粒變性。胰腺灶性壞死,淋巴細胞浸潤。腸道肌層之間有大量淋巴細胞浸潤,破壞了組織結構。脾臟白髓區淋巴細胞壞死嚴重,核崩解破碎、消失。
2.3 RT-PCR結果 將PCR擴增產物進行1.0%瓊脂糖凝膠電泳,結果顯示其中處理的6份病料其加樣孔中490 bp處均出現一條亮帶。
(1)通過臨床剖檢、組織病理學及病毒分離鑒定最終確定,該雛雞感染了禽腦脊髓炎。通過對種雞場的流行病學調查發現,在此之前其產蛋率嚴重下降,能達70%,后期一直沒有提高。禽腦脊髓炎并可以進行垂直傳播,雛雞患禽腦脊髓炎跟種雞場關系密切。假如種雞未免疫過禽腦脊髓炎疫苗,則雞群對禽腦脊髓炎病毒沒有特異性抵抗力。同時,冬季是該病高發季節,發病早期養殖戶未采取有效的治療、隔離和消毒措施,致使疫病在該養殖場大面積暴發,造成嚴重損失。(2)該病表現非化膿性腦炎,腦組織血管周圍出現淋巴細胞浸潤、神經元變性、膠質細胞的增生以及某些臟器組織淋巴細胞的增生等,可作為禽腦脊髓炎的診斷依據,必要時還需進行病毒分離或是血清學的檢測。(3)目前,該病沒有特效的治療藥物,為減少經濟損失,盡量將病雞隔離飼養,給予安靜舒適的環境,飼料中添加維生素尤其是B1和E。成年的蛋雞發病之后減蛋現象 嚴重,經過2周左右即可自行恢復,但恢復期的蛋不可做種蛋使用。本病發生以后,一定注意清掃清糞便和日常消毒。(4)平時一定注意種雞的免疫:采用弱毒苗在8~10周齡、產前4周分別進行點眼或是滴鼻,如若飲水應注意添加疫苗保護劑。若使用滅活苗,應在開產之前30d左右,采用肌注接種疫苗。商品蛋雞則在90日齡左右進行弱毒疫苗的免疫,可有效減少本病的發生。
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S858.3
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1007-1733(2019)12-0054-02
(2019-09-25)