大銀魚人工繁殖技術研究

王煜恒 ，陳軍 ，王會聰 ，張坤 ，李華

（1.江蘇農林職業技術學院畜牧獸醫學院，江蘇 鎮江 212400；2.句容市華南水產養殖專業合作社，江蘇 鎮江 212400）

當前大銀魚資源面臨著資源量上升到一定高度后會急劇下跌，并且幾年得不到恢復，甚至出現絕產的現象。大銀魚在自然情況下自身繁殖，受精率及孵化率都非常低，一般都在10%以下，而以前移植過銀魚的水庫在移植之后基本依靠大銀魚自繁自育，這是目前大銀魚資源量下降的主要因素之一。因此急需相關人員對已形成種群的大銀魚資源采取新的技術和方法進行合理保護，保持資源穩定與持續高產的研究已成為水庫生態資源保護和開發的一大課題。該試驗將探索開展人工授精的魚卵進行室內人工孵化，并對孵出的仔魚進行人工培育，以期提高魚苗孵化率、出苗率以及增殖存活率。

1 材料與方法

1.1 場地和魚卵

試驗場地為句容市華南水產有限公司養殖基地內。試驗所用大銀魚卵來自宿遷洪澤湖（泗洪縣半城鎮）和句容墓東水庫。洪澤湖魚卵于2019年1月9日采集，句容墓東水庫魚卵于2019年1月15日采集。

1.2 魚卵的采集

親魚用單層刺網捕撈，1 h收集1次，收獲后立刻送至岸邊進行半干法人工授精。親魚按雌雄比例3∶1搭配，30尾雌魚一組，首先將親魚用5%的鹽水消毒，然后用毛巾擦干體表水分，擠壓雌魚生殖腔將魚卵置于干凈塑料袋內，隨后將10尾雄魚生殖腔剪開后放入卵粒中用毛筆輕輕攪動，加入少量0.7%的生理鹽水，塑料袋充氣后搖晃30 s，完成授精。受精卵靜置2～4 min后，用湖水沖洗2～3次，洗掉剩余精液和未成熟卵子及其他污物，最后開始孵化。

1.3 孵化管理

該試驗采用了4種孵化方式，分別為水庫網箱、水泥池、室內網箱、塑料箱4種孵化方式。其中后3種方式均在室內開展，并提供微流水環境，水源為水庫水，經過濾后轉入蓄水塔中。水庫網箱為100目紗絹制成，長寬高分別為2 m×2 m×2 m，孵化時網箱上端離水面0.2 m；水泥池的長寬高分別為4 m×2 m×1 m，孵化時保持水深0.5 m；室內網箱置于前述水泥池內，長寬高分別為1 m×1 m×1 m，孵化水深0.5 m；塑料箱的長寬高分別為0.6 m×0.5 m×0.4 m，保持水深0.25 m。為了便于統計相關數據，每種孵化方式中獨立設置3個長寬高分別為0.3 m×0.3 m×0.3 m小網箱置于其中，塑料箱中放3個同體積的小塑料箱，每個小箱放入1 000個受精卵，用于計數孵化率和出苗率。

1.4 苗種培育

仔魚孵出后第4 d點數，第12 d后具平游能力時收集1200尾用于開口餌料的試驗，其余均投入水庫。試驗分成4組，分別為對照組（不投喂）、餌料組（選用蛋黃、輪蟲和鹵蟲3種餌料），每組3個盆（直徑40 cm，水深10 cm），每盆100尾同一批次的仔魚，試驗期間每天換1/2的水。試驗開展40 d，結束后計數成活的仔魚數，統計各組成活率。

1.5 指標測定

孵化時間是指同批次受精卵中50%孵化出膜是所用的時間。

受精率/%=受精卵數量/魚卵總數×100%；

孵化率/%=孵化仔魚數/受精卵數量×100%；

出苗率/%=平游仔魚/受精卵數量×100%；

仔魚成活率/%=仔魚存活數/仔魚總數×100%。

1.6 數據統計與分析

原始數據經Excel 2003初步整理后，用SPSS 18.0對數據進行單因子方差分析（one-way ANOVA），用Duncan氏多重比較檢驗分析組間差異統計學意義性程度，P＜0.05為差異具統計學意義。數據用平均值±標準差（Mean±SE）形式表示。

2 結果與分析

2.1 兩次受精的基本情況

洪澤湖魚卵受精結束后，在當地穩定1天后帶水運回句容基地孵化，句容墓東水庫魚卵采集結束后就地開展孵化。大銀魚受精卵直徑為0.9 mm左右，1 mL卵數約為1 200粒左右，根據受精卵總體積進行估算其總數。受精2 d開始計算受精卵的受精率，此時受精卵表現為細胞圓滿膨脹形成清晰的卵周隙，未受精卵則畸形或者無卵周隙。每批卵中隨機選擇100個受精卵在顯微鏡下觀察計數，計數3次取平均值。由表1可知，洪澤湖采集的的魚卵數在654萬左右，受精率為58.67%，遠高于墓東水庫的30.67%，且后者僅采集到72萬粒魚卵。各孵化設施中的投卵情況見表2，平均投卵密度為20萬粒/m2。

表1 受精卵采集情況

表2 投卵情況

2.2 不同孵化方式對孵化率和出苗率的影響

由表3可見，洪澤湖的大銀魚卵在四種孵化方式中孵化率和出苗率分別高于墓東水庫魚卵的四種方式。室內開展的3種孵化方式孵化率和出苗率都要高于室外孵化方式，其中室內水泥池的孵化率和出苗率最高，室內水泥池網箱孵化次之，室內塑料箱孵化方式要低于前2種方式。在孵化時間上，兩個地區的魚卵差別不大，但是室內孵化方式均要短于室外孵化方式。

表3 不同孵化方式對孵化率和出苗率的影響

2.3 不同餌料對仔魚成活率的影響

從表4中可發現，對照組的仔魚成活率僅為9.33%，遠低于其他組。蛋黃組前期的成活率尚可，隨著培育時間的延長，蛋黃已不能為大銀魚所攝食，死亡逐步升高，40 d后成活率降至17.67%。輪蟲組的成活率最高，達到78.67%，鹵蟲組成活率略低于輪蟲組，為77.67%。

表4 不同餌料對仔魚成活率的影響

3 討論

3.1 不同地區受精率差異的影響

洪澤湖地段相比于墓東水庫較為北一點，1月份時，洪澤湖地區氣溫約為零下5～10℃，而墓東水庫地區則為1～10℃，袁新明等研究發現大銀魚屬低溫產卵類型,其最佳產卵水溫2～4℃[6]。洪澤湖地區溫度相對較低，水溫在2～4℃之間的區域比較多，建議在受精時，在可行范圍內，水溫在2～4℃之間為會有最好的受精效果。

3.2 不同孵化方式對孵化率和出苗率的影響

每種孵化方式中設置3個小箱，魚卵投放時，從中隨機數出1 000個大銀魚卵置于每個小箱內，這些魚卵中存在部分未受精卵，而未受精的魚卵孵化至10 d后極易發生水霉病。受精卵隨發育進行，卵表面出現細密的卵膜絲，極易于其他魚卵相互黏連成一塊，若其中粘附一個發生水霉病的未受精卵，就會導致整塊魚卵都發病。試驗小箱內每天都需挑出未受精卵，而大的孵化設施內由于魚卵較多，無法挑除未受精卵，兩者之間孵化率有較大差異。

表2及表3可看出在四種孵化方式中室內孵化率遠高于室外孵化率，而洪澤湖地區孵化率全部高于墓東水庫孵化率，所以室外孵化效果較差，而室內效果則好一點。可以推測陽光對于大銀魚魚卵孵化率有害，即大銀魚卵孵化最好放在陰涼地方，而在室內的3個方式中，室內水泥地孵化率最好。韓廣建得出的結論可以確定，受精率對受精卵在網箱內的存活率有明顯影響。分析認為，當網箱附著生物后，網箱內外的水交換能力明顯降低，未受精卵的死亡、腐爛污染網箱內水質會造成不良影響受精卵受霉菌感染及腐爛的程度[7]。水泥地中有很多泥沙，使受精卵可以被分開，不容易堆積在一起，水霉病沒有辦法傳播。而網箱和塑料箱比較光滑，魚卵容易移動，堆積在一起，水霉病容易傳播。

3.3 不同餌料對仔魚成活率的影響

由表4可知在喂養時間段內，對照組的問題在于沒有食物，早期仔魚有卵黃提供生長所需營養，并且不開口食用食物，所以前期各種喂養的效果是一樣的[12]。然而到了中后期，因為卵黃消耗干凈，沒有食物及營養供給，所以對照組大量死亡，而蛋黃組也是大量死亡，所以大銀魚對于蛋黃并沒有過多的食用，鹵蟲和輪蟲喂養效果則一直很好。關于大銀魚仔魚早期是否攝取浮游植物一直有爭議，易建國[9]等認為，大銀魚仔魚不能利用藻類。而朱成德[9]報道的大銀魚仔魚腸道出現少量浮游植物相吻合。榮長寬[10]等亦報道野外水體大銀魚仔魚對小球藻、衣藻有一定量的攝入。尤楊[11]表示大銀魚仔魚早期是以浮游植物作為開口餌料，逐步過渡到捕食輪蟲這也印證了仔魚在口器的不同發育階段攝食不同的適口餌料。而鹵蟲幼蟲和輪蟲在大小上差不多，而且2種餌料對于大銀魚前40 d的喂養效果相近，暫可認為鹵蟲和輪蟲作為本研究中最好的餌料，之后的喂養效果需后人繼續研究。

4 小結

在該研究中，一共研究了在不同的環境下大銀魚卵的孵化率和不同餌料對于大銀魚仔喂養的成活率。最終得出本研究的結論，在4種不同方式的孵化中，室內水泥池孵化效果最好，室內網箱和塑料箱效果次之，室外水庫最差。所以建議大銀魚人工孵化在室內進行比較好。而對于不同餌料喂養的研究，從研究結果來說，輪蟲和鹵蟲喂養效果最好，而蛋黃效果比較差，所以不建議用蛋黃來喂養，即用輪蟲鹵蟲喂養比較好。