化學發光法和酶聯免疫法檢測HbeAg的比較

劉悅悅

【摘 要】目的：通過化學發光法與酶聯免疫法檢測HbeAg的結果比對，探討酶聯免疫法作為初篩方法時不同血清濃度的漏檢率。方法：采用回顧性分析，對同時檢測化學發光法和酶聯免疫法的303例慢性乙肝患者標本進行HbeAg的檢測與分析對比。結果：化學發光法檢測陽性的結果76例，陰性227例，其中化學發光法陰性的標本酶聯免疫法的陰性率為100%;化學發光法陽性的標本，酶聯免疫法陽性50例，陰性26例，總漏檢率為34.2%，對HbeAg化學發光法檢出濃度分組，其中1S/Co-20S/Co的漏檢率為75%;20S/Co-100S/Co的漏檢率為40%;>100S/Co的漏診率為5%。結論：酶聯免疫法對低水平的HbeAg存在較高的漏檢率，對乙肝陽性患者應采用化學發光法作為酶聯免疫法的補充。

【關鍵詞】乙型肝炎E抗原;化學發光免疫分析法;酶聯免疫吸附分析法

【中圖分類號】R512.6【文獻標識碼】A【文章編號】1005-0019（2019）21--01

乙型肝炎E抗原，是乙肝病毒核心顆粒中的一種可溶性蛋白質。它的出現遲于HBsAg，而消失卻早于HBsAg，所以是人體感染HBV后跟隨HBsAg出現的第2個血清學抗原標志物。HBeAg在乙肝活動期檢出率升高，表明肝細胞有較嚴重的損傷，患者有很強的傳染性。在未開展 HBV-DNA 定量檢測的單位，HBeAg 常作為評價 HBV 復制的血清標志物[1]。已有研究表明，目前醫療機構檢測中，血清 HBeAg的檢測一般采用酶聯免疫吸附試驗（ELISA），但該法對于低水平血清 HBeAg 通常很難測出，易造成漏檢[2-4]。探討化學發光法優越性的文章已有很多，但對化學發光中HBeAg 濃度分區研究ELISA法漏檢率的還較少。本文利用回顧性分析，研究ELISA法的漏檢率及易漏檢血清濃度，為臨床解釋兩種方法學結果差異給出數值依據。

1 資料與方法

1.1 一般資料 采集我院2018年1月-12月同時進行CLIA法和ELISA法檢測HbeAg的慢性乙肝患者（性別、年齡均不限，患者符合中華醫學會肝病學會中華醫學會感染病學會聯合修訂的《慢性乙型肝炎防治指南（2010 年版）》[3]）數據共303例。

1.2 儀器與試劑 選擇惠州市中大惠亞醫院檢驗科實驗室使用的有嚴格日常維護和保養的全自動微粒子酶聯免疫分析系統Abbottci2000用于CLIA法檢測，使用配套的美國雅培公司的HbeAg檢測試劑。ELISA法試劑由北京萬泰生物科技有限公司提供。

1.3 方法

1.3.1 CLIA法采用雙抗夾心測定方法。以順磁性微珠作為包被載體，吖啶酯作為發光劑 標記抗體。化學發光物質經氧化劑的氧化后，形成一個處于激發態的中間體，會發射光子釋放能量以回到穩定的基態，發光強度可以利用發光信號測量儀器進行檢測。

1.3.2 ELISA 法 應用雙抗體夾心法定量檢測 HBeAg。嚴格按照實際說明書操作。

1.4 陽性判斷標準 CLIA法中HBeAg以 S/Co 為單位，結果≥1.0 時判為陽性。ELISA法根據實際說明書要求判斷。

2 結果

2.1 標本共計 例，CLIA法檢測陰性227例，對應的ELISA法結果中陰性227例，符合率100%;CLIA法檢測陽性76例，對應的ELISA法結果中陽性50例，陰性26例，符合率65.8%，漏檢率34.2%。

2.2 將CLIA法陽性的結果進行分組，1.0 S/Co-20.0 S/Co為低水平組，20 S/Co-100 S/Co為中水平組，>100S/Co為高水平組，分別比對其與ELISA法結果的符合率與漏檢率。

3 討論

目前由于兩種方法的價格差距較大，酶聯免疫法在門診及體檢病人中仍是主流，對于部分慢性乙肝患者，監測病情時使用化學發光法成本高，酶聯免疫法能夠減輕患者負擔。酶聯免疫法的特異性高，但從數據顯示，酶聯免疫法有較高的漏診率（34.2%），這使得酶聯免疫法在慢性乙肝患者中的檢測中弊病較多，常有酶聯免疫法患者HBeAg陰性患者復查時使用化學發光法而得到陽性的結果，這種結果的不符造成臨床醫生解釋的困難以及患者對檢驗結果的不信任。

這里我們利用CLIA法高靈敏度，高特異性，重復性好等優點[5]，作為參照，使用ELISA法對不同濃度的HBeAg 進行有效檢測，分組討論其漏檢率。通過數據得出，在低濃度組（1.0 S/Co-20.0 S/Co）ELISA法漏檢率高達75%，ELISA作為初篩方法并不完備，這時增加CLIA檢測可以彌補ELISA法的不足，對乙型肝炎臨床分型、病程發展、轉歸及療效觀察均有一定的指導意義。臨床醫師對患者進行結果解析時要盡量從方法學限制上解釋其漏診率，消除患者疑慮。

參考文獻

鄭定容，黃龍，周偉.CLIA和ELISA法檢測乙肝HBeAg的比較[J].熱帶醫學雜志，2013，13（10）：1233-1235.

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廖冰潔，周迎春.化學發光法和時間分辨熒光免疫分析法檢測低濃度乙肝表面抗原的應用分析[J].按摩與康復醫學：中旬刊，2012，3（1）：2-3.