以煙草花葉病毒為載體的μE3單克隆抗體的制備及鑒定①

李 旭 魏德強

(東北林業大學生命科學學院，哈爾濱150040)

雌三醇(μE3) 分子式為 C18H24O3，分子量為288.38 Da。雌三醇是一種半抗原，在體內通過雌二醇的代謝而產生，其主要是存在于尿液中的一種天然的雌激素，在胎盤中芳構化形成雌三醇[1]。雌三醇在孕婦體內含量的變化與巨大兒和唐氏綜合征或愛德華氏綜合征等疾病密切相關[2-5]。在孕婦體內未結合的雌三醇濃度非常低，則預示著胎兒存在染色體異常的可能，可能患有愛德華氏綜合征或唐氏綜合征；而雌三醇異常升高，則增加了孕婦懷有巨大兒的風險，因此雌三醇檢測是篩查孕婦胎兒畸形的重要指標，在優生優育中有著重要作用。

免疫學方法是利用抗原、抗體間的特異性反應對目標抗原進行分析，從而避免了傳統化學分析法耗時耗力的弊端，可以對μE3等生物學樣品進行直接檢測分析[6-9]，能夠很大程度地提高檢測的時效性和準確性，給臨床診斷和治療提供了便捷、可靠的保障。然而，μE3為小分子半抗原，不具有免疫原性，很難獲得高特異性和高親和力的單克隆抗體。

近些年來，棒狀煙草花葉病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)通過遺傳方法和化學方法改變其原有性狀，而被用來作為半抗原的載體。TMV由許多個結構相同的重復單元構成，均為對稱結構，這些對稱的重復結構單元可以使多個半抗原分子在其表面呈高重復性和高密度的有序排列，相對于傳統載體BSA等更加有效地提高了半抗原的免疫原性，使半抗原能夠誘導產生強烈有效的免疫反應[10]。……