雌激素受體β在膀胱癌中的表達(dá)及對膀胱癌細(xì)胞侵襲、遷移的影響①

姚佳沛 徐建春 劉 煒 樊 凡

(昆明醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院泌尿外二科,昆明650031)

膀胱癌為常見的惡性腫瘤之一，男性發(fā)病率高于女性，考慮男性膀胱癌發(fā)病率高除了與吸煙和職業(yè)因素有關(guān)外，性激素可能是導(dǎo)致男性膀胱癌發(fā)病率高的重要原因[1]。研究發(fā)現(xiàn)膀胱癌組織中ERβ呈高表達(dá)，其表達(dá)水平與膀胱癌的發(fā)生發(fā)展關(guān)系密切[2]，如楊典東等[3]研究發(fā)現(xiàn)膀胱癌組織中ERβ呈高表達(dá)，且與膀胱癌的浸潤性進(jìn)展和分化關(guān)系密切。本文對膀胱癌中ERβ的表達(dá)水平和沉默ERβ對膀胱癌細(xì)胞侵襲、遷移的影響及機(jī)制進(jìn)行研究，從細(xì)胞水平探討ERβ在膀胱癌侵襲、轉(zhuǎn)移中的作用，為膀胱癌的診治提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1材料 收集我院2017年1至12月60例行膀胱癌根治術(shù)患者的膀胱癌組織標(biāo)本及相應(yīng)的癌旁組織標(biāo)本，60例膀胱癌患者簽署知情同意書，手術(shù)前未進(jìn)行放化療等治療。人膀胱癌細(xì)胞T24和正常膀胱上皮細(xì)胞SV-HUC-1購自上海中科院細(xì)胞庫。Matrigel基質(zhì)膠(美國Sigma公司)，DAB顯色試劑盒、免疫組化試劑盒、一抗、二抗(美國Santa Cruz公司)，ERβ及陰性對照siRNA(上海吉瑪公司設(shè)計(jì)合成)等。ERβ siRNA-1干擾序列為5′-GCAAGCATGGAGGAGTGAC-3′，ERβ siRNA-2干擾序列為5′-GGCCTGTGAAACAGTGACC-3′，ERβ siRNA-3干擾序列為5′-GAGGCATTCTCGTCAGATG-3′，對3組ERβ siRNA序列進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)，選擇最佳RNA組(即ERβ siRNA-3組)作為本研究的ERβ siRNA序列。陰性對照干擾序列為5′-TTCTGGCAAGGTCTCA-CGT-3′。

1.2方法

1.2.1膀胱癌及癌旁組織中ERβ表達(dá)測定 將膀胱癌組織和癌旁組織經(jīng)福爾馬林固定，石蠟包埋，切成4 μm厚的切片，采用SP免疫組織化學(xué)法測定膀胱癌及癌旁組織中ERβ表達(dá)(具體步驟和操作嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行)，以鼠抗人ERβ單克隆抗體為一抗，陰性對照以磷酸鹽緩沖液代替一抗，陽性對照用已知乳腺癌ERβ陽性反應(yīng)片。……