大孔吸附樹脂對燥濕止帶合劑除雜工藝研究

白云鳳 馬輝

(銀川市中醫醫院 銀川 寧夏 750001)

燥濕止帶合劑為我院治療濕熱帶下婦女帶下病有效方[1]，由延胡索、連翹等十味中藥組成，方中各藥配伍使用具有清熱解毒、燥濕止帶的功效。大孔樹脂是由許多微觀小球組成的多孔球狀聚合物,可廣泛用于中藥提取液的除雜和有效成分的富集[1]。由于原制劑為水煎劑，工藝僅為煎煮后濾過包裝，儲存過程中沉淀較多，影響了患者服藥的順應性，為增加制劑穩定性，在有效成分充分保留的前提下，以君藥指標成分連翹苷轉移率為考察指標，目前有文獻通過D101、AB-8樹脂進行連翹藥材中連翹苷的富集純化研究報道[2-3]，尚無對多種樹脂應用于連翹苷吸附特性進行系統研究，本文以連翹苷轉移率為考察指標，通過靜態吸附試驗對六種不同型號大孔樹脂考察，優選出最佳樹脂，通過正交試驗對除雜工藝進行研究與優選，為消燥濕止帶合劑產業化生產提供依據。

1.儀器與材料

1.1 儀器

Agilent1100高效液相色譜儀（美國安捷倫公司）；KQ-250型超聲波清洗器( 昆山市超聲儀器有限公司)；十萬分子之一電子天平（METTTOLEDOXS205 ）。

1.2 試藥

連翹苷對照品 (中國藥品生物制品鑒定所，批號：110821-200609）；AB-8、HPD722、HPD500、HPD600、HP20、AB-8 型大孔樹脂（滄州寶恩吸附材料科技有限公司）；燥濕止帶合劑（自制）；乙腈（色譜純，國藥集團化學試劑有限公司）；水（超純水）；其他試劑均為分析純。

2.方法與結果

2.1 色譜條件

參照文獻[4]，采用HPLC測定。色譜柱：DiamonsilTM (鉆石)C18柱（4.6×250mm，5μm）；乙腈：甲醇（30∶70），檢測波長：277nm，流速1.0ml/min，柱溫25℃；進樣量10μL。

2.2 標準曲線的制備

精密稱取連翹苷對照品適量，用甲醇稀釋成質量濃度為50、25、12.5、6.125、3.125、1.5625ug/mL，分別進樣10 μL，按“2.1”項下色譜條件進行測定。以濃度（X）為橫坐標，峰面積積分值（Y）為縱坐標，進行線性回歸，得回歸方程為 Y＝40.3X+36.58(r＝0.9999）。結果表明，連翹苷在1.5625～50ug/mL濃度范圍內與峰面積積分值線性關系良好。分析方法的日內、日間精密度RSD＜3%（n＝5），加樣回收率在99%～102%之間，均符合要求。

2.3 大孔樹脂型號的篩選

取已處理的6種型號樹脂，其中AB-8、HPD722弱極性樹脂；HPD500、HPD600極性樹脂；HP20、AB-8非極性樹脂各10g,放置于100ml錐形瓶中，加入消炎止帶合劑1ml，其中連翹苷含量為45.24ug/mL,計算各樹脂不同時間點下連翹苷吸附量、總吸附量及吸附率，見表1。

表1 6種樹脂對燥濕止帶合劑連翹苷的靜態吸附數值表

由表1靜態吸附結果顯示樹脂AB-8對燥濕止帶合劑中連翹苷有較強的親和力，故選擇AB-8應用于消炎止帶合劑除雜工藝。

2.4 工藝參數考察與優化

2.4.1 正交試驗設計：根據靜態吸附試驗,優選AB-8樹脂進行試驗，以上樣液濃度、大孔樹脂用量、乙醇洗脫劑濃度及洗脫劑用量為考察因數，以洗脫液中連翹苷回收率為考察進行4因數3水平設計方案，見表2，正交實驗結果見表3。

表2 因數水平表

A-上樣液濃度(g/mL)；B-大孔樹脂用量；C-乙醇洗脫劑濃度（%）；

D-洗脫劑與上樣量(mL)比

表3 正交試驗設計與結果

表4 方差分析

結果表明，以連翹苷回收率作為考察指標，洗脫劑乙醇濃度對連翹苷回收率有顯著影響，從表4中可知：A2＞A1＞A3,B3＞B1＞B2,C3＞C2＞C1,D2＞D3＞D1，故最佳樹脂除雜工藝應為A2B3C3D2，

3.討論

由實驗結果得知：通過對三類型極性差異的大孔樹脂進行消炎止帶合劑除雜工藝的比較，大孔樹脂AB-8效果最佳，最優化的大孔吸附樹脂的純化條件為：A2B3C3D即上樣量為1g/mL藥液，濕樹脂量(g)與上樣量(mL) 比為4∶1，洗脫劑乙醇濃度為60%，洗脫溶劑用量(mL) 與上樣量(mL) 比為8∶1。

消燥濕止帶合劑為水煎液，含有大量雜質成分，嚴重影響成品質量，實驗過程中同時比較了傳統醇沉法與絮凝劑殼聚糖除雜工藝的考察，結果顯示水煎液經三種除雜工藝處理后，藥液在留樣觀察中沉淀物均大大減少，均能有較好的澄清度，考慮到傳統醇沉法與絮凝劑殼聚糖除雜在去除藥液中雜質的同時，方劑中活性成分連翹苷的損失也較大，故推薦大孔樹脂進行藥液除雜，考慮樹脂殘留為課題后續研究的重點與難點。