鄒麗華,劉晉萍,張 浩,童媛媛,唐 躍
1.1 實驗耗材及試劑 膜式氧合器(Terumo baby Fx05,日本 Terumo 公司),雙頭滾壓泵(德國 St?ckert公司),氣管導管(美國Covidien公司),HTK液(批號:1208621,德國kohler化學制藥公司),20 G中心靜脈導管(中國深圳益必達公司)。Alda-1(25 mg,美國Sigma公司),為ALDH2特異性激動劑,經心肌灌注旁路給藥,劑量為 8 mg/kg[4]。
1.2 實驗動物及分組 新西蘭白兔15~20周齡,體重2~3.5 kg,經動物倫理委員會批準(2013-4-150-GZR),由阜外醫院動物實驗中心提供。21只新西蘭白兔隨機分CPB不停跳組(C組,n=7)、停跳組(CA 組,n=7)、Alda-1組(CAA 組,n=7)。 另21只新西蘭白兔作為供血兔,用作CPB管路預充,盡管新西蘭兔存在血型,但抗原性較弱,因此同一品種的兔血不會發生溶血反應[5]。所有動物術前禁食6 h,禁飲 2 h。
1.3 建立新西蘭兔CPB模型 新西蘭兔入室稱重,耳緣靜脈置管開放靜脈通路,2.5%戊巴比妥鈉3~4 ml進行麻醉誘導后,經口氣管插管(3.5#)行機械通氣,設定氧濃度35%,通氣量1 L/min,潮氣量約 35~40 ml、呼吸頻率 30~35 次/min、吸呼比1∶1.5。切開右腹股溝,右股動脈22 G套管針穿刺置管持續監測動脈血壓,監測心電圖(electrocardiography,ECG)、心率。16 G套管針置入右腋動脈,用于CPB動脈灌注。中心靜脈導管(20 G)置入左腋動脈,尖端位于主動脈根部作為停搏液灌注管路。正中開胸暴露右心房,切開右心房,插入帶側孔的靜脈插管(16 Fr)作為靜脈引流,調整靜脈插管位置,確保引流通暢后7-0尼龍線固定。若操作中發現實驗兔存在左腋動脈解剖變異或置管失敗導致出血,則立即止血后正中開胸,經主動脈根部置入22 G套管針并荷包縫合。
CPB管路預充液由50 ml新西蘭白兔新鮮全血、5 ml復方電解質注射液(勃脈力)、10 ml琥珀……