兒童急性淋巴細胞白血病融合基因與預后的關系

曾曉辰，殷絲雨

（南京醫科大學附屬兒童醫院 檢驗科，江蘇 南京 210008）

急性淋巴細胞白血病（acute lymphocytic leukemia, ALL）占兒童急性白血病的75%～80%，在15 歲以下腫瘤患兒中的發生率高達25%，是常見的兒童惡性腫瘤之一[1-3]。2002年WHO 根據MICM 制定新的分型標準，將白血病染色體結構畸變以及融合基因作為其基本的診斷標準之一[4]。ALL 患兒在起病初期檢查發現提示預后差的多項指針，其中融合基因分型、免疫分型與危險度分型與患兒的治療及預后密切相關[5]。本文探討T 細胞型急性淋巴細胞白血病（T-ALL）和B 細胞型急性淋巴細胞白血病（B-ALL）融合基因檢出情況與患兒預后的關系，為危險度分級管理的改進提供實驗依據。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

選取2014年1月—2016年1月南京醫科大學附屬兒童醫院新診斷ALL 患兒（診斷標準符合中華醫學會兒童ALL 診斷）中伴有白血病融合基因陽性的225 例。其中，男性118 例（52.2%），女性107 例（47.8%）；中位年齡5.7 歲（8 個月～15 歲），＜1 歲10 例（4.4%），1～＜10 歲204 例（90.7%），≥10 歲11 例（4.9%）。患兒定期化療登記，隨訪日期2014年1月—2017年12月。

1.2 危險度分層標準和治療方案

所有入組患兒均按照CCLG-ALL-2008 方案進行分組和治療[4，6]。

1.3 實驗方法

cDNA 合成分離骨髓單個核細胞，Trizol 一步法（美國Invitrogen 公司）抽取總RNA，采用通用逆轉錄引物將RNA 逆轉錄為cDNA（逆轉錄試劑盒、半定量PCR 試劑盒購自日本TaKaRa 公司）。采用融合基因特異性引物分別進行PCR 反應。進行PCR 反應的7項基因分別為TEL-AML1、BCR-ABL、E2A-PBX1、MLL-AF4、AML1-ETO、PML-RARα、CBFβ-MYH11。融合基因Hox11、SIL-TAL1和ETV6-RUNX1，由北京海思特醫學檢驗實驗室檢測。電泳分離PCR 產物用1.5%瓊脂糖凝膠電泳，掃描，攝片。免疫分型采用流式細胞術活細胞直接免疫熒光標記檢測。……