DDR2血管內(nèi)皮細胞條件性基因敲除小鼠的復(fù)制、鑒定及表型分析*

王婷婷，卜歆，李金奎，王娜，邱意開，岳振生，蘇金，張淑雅

[1.寧夏醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院 生育力保持教育部重點實驗室（生物化學(xué)與分子生物學(xué)系），寧夏 銀川 750004；2.空軍軍醫(yī)大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院 生物化學(xué)與分子生物教研室，陜西 西安 710032；3.寧夏醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院 急診科，寧夏 銀川 750004]

膠原的盤狀結(jié)構(gòu)域受 體2（discoidin domain receptor 2, DDR2）是一種位于細胞膜的酪氨酸蛋白激酶受體，由胞外結(jié)構(gòu)域、跨膜結(jié)構(gòu)域和胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域組成，胞外盤狀結(jié)構(gòu)域被膠原識別并激活，進而介導(dǎo)盤狀結(jié)構(gòu)域發(fā)生二聚化，觸發(fā)胞內(nèi)催化結(jié)構(gòu)域的酪氨酸殘基發(fā)生自磷酸化[1]。磷酸化的酪氨酸激酶介導(dǎo)細胞外基質(zhì)膠原向細胞內(nèi)的信號傳遞[2]。DDR2 高表達于激活狀態(tài)的血管內(nèi)皮細胞（例如，心臟瓣膜內(nèi)皮細胞發(fā)生內(nèi)皮間充質(zhì)轉(zhuǎn)化的過程[3]，腫瘤血管內(nèi)皮細胞[4]）。前期研究發(fā)現(xiàn)，DDR2 自發(fā)全身性突變?nèi)笔∈竽[瘤血管新生障礙，能顯著抑制腫瘤的生長與轉(zhuǎn)移。另有文獻[5]報道，DDR2 全身性敲除促進小鼠肝纖維化的發(fā)生、發(fā)展，提示DDR2 在生理和病理性血管新生中扮演十分重要的調(diào)控作用，但對血管內(nèi)皮細胞中DDR2 對血管新生的調(diào)控機制尚不清楚。為深入研究血管內(nèi)皮細胞中DDR2 在血管新生中的作用及分子機制，本研究設(shè)計基于同源重組理論，利用胚胎干細胞（embryonic stem cell, ES cell）（ES 細胞）打靶及顯微注射技術(shù)，復(fù)制DDR2flox/flox小鼠，利用Cre/LoxP 系統(tǒng)復(fù)制DDR2在血管內(nèi)皮細胞可誘導(dǎo)性條件性基因敲除小鼠（DDR2flox/flox，Cdh5-Cre/ERT2），可以選擇性地在小鼠發(fā)育的不同時間誘導(dǎo)敲除血管內(nèi)皮細胞中的DDR2，希望為深入研究DDR2 在生理性及病理性血管新生中的作用提供幫助。……