圍產期婦女感染GBS 體液免疫功能變化的研究

楊麗瑋 郭淑麗 賈海英 馬晶 王婧

無乳鏈球菌，又稱B群鏈球菌（B group streptococcus，GBS），曾被認為是美國新生兒細菌感染的首位致病菌，常定殖在腸道和生殖道，是引起孕婦胎膜早破、產后感染的主要病原菌[1-3]。正常情況下, 各種淋巴細胞亞群、免疫球蛋白含量等保持一定的數量和比例，維持著機體正常的免疫功能。一旦外源病原微生物侵入，機體會出現各樣變化淋巴細胞或免疫球蛋白的消長, 以抵御病原微生物的感染。GBS可通過垂直傳播或上行感染，引起新生兒敗血癥和腦膜炎[4-5]。本文旨在了解本地區GBS感染的圍產期婦女機體體液免疫功能狀態，為孕婦GBS感染的臨床診治工作奠定基礎，具體如下。

1 資料與方法

1.1 病例資料

收集2017年1月—2018年9月新疆維吾爾自治區人民醫院門診及住院的35～37周常規產檢者，進行GBS帶菌狀況篩查，收集病例組GBS陽性者孕婦135例，年齡25～46周歲，漢族51例，維吾爾族79例，回族3例，哈薩克族2例，平均年齡（33.2±4.5）周歲，對照為同孕期35～37周的健康體檢者為對照組，GBS陰性者100例，年齡20～43周歲，平均年齡（31.89±3.3）周歲，漢族41例，維吾爾族55例，回族2例，哈薩克族2例，且年齡（t=0.259，P=0.796）、民族（χ2=0.617，P=0.685）無統計學差異。所有受試者均經B超證實為單胎宮內妊娠，胎兒存活，自愿加入本研究且簽署知情同意書，排除標準：多胎妊娠者；免疫缺陷者；精神病患者；不愿意合作者，本研究項目已通過醫院倫理委員會審核批準。

1.2 細菌培養及鑒定方法

將分泌物標本接種于珠海迪爾生物工程有限公司的B群鏈球菌選擇性顯色培養基，并采用B群鏈球菌培養分析系統進行自動判別。陽性者取肉湯轉種，挑取可疑菌落涂片行革蘭染色陽性鏈球菌，觸酶試驗陰性、最終通過梅里埃MS確認GBS。試劑由法國梅里埃生物有限公司提供。所有標本檢測均嚴格按照試劑盒說明書及相應儀器標準操作程序進行，并進行實驗室質量控制。

表1 GBS 陽性孕婦組與健康對照組免疫球蛋白含量（）

表1 GBS 陽性孕婦組與健康對照組免疫球蛋白含量（）

組別 IgG（g/L）IgA（g/L） IgM（g/L）C3（g/L）C4（g/L）CRP（mg/L）KAP（g/L）LAM（g/L） β2-MG（mg/L） KAP/LAM病例 6.62±4.87 3.46 ±0.58 3.06±0.43 1.22 ±0.65 0.3±0.07 12.35±4.43 6.85±1.43 3.65±1.08 2.51±0.78 1.92±0.55對照 13.52 ±5.73 3.38±0.72 0.95±0.35 1.15±0.52 0.38 ±0.06 3.81±0.74 6.79±1.85 3.76 ±1.12 0.98±0.33 1.89 ±0.57 t 值 9.99 0.12 11.5 0.76 0.95 15.4 0.49 0.74 13.2 1.50 P 值 0.00 0.91 0.00 0.45 0.34 0.00 0.62 0.46 0.00 0.14

1.3 免疫球蛋白和補體檢測方法

采用速率散色比濁法，利用BN proSpec特種蛋白分析儀進行測定受試者血清免疫球蛋白（IgG、IgA、IgM）和補體C3、補體C4、CRP、KAP、LAM、 β2-MG，試劑由Marburg GmbH公司提供，室內質控均在控。

1.4 統計學方法

使用SPSS 13.0統計學軟件采集和處理數據。計量資料呈正態分布，以表示。病例組與對照組民族比較采用χ2檢驗，病例組與對照組年齡比較及免疫球蛋白含量組間比較采用t 檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

135例GBS陽性孕婦血清IgG（6.62±4.87）g/L明顯低于健康對照組（13.52±5.73）g/L，t=9.99，P=0.00，而IgM、 CRP、β2-MG分別為（3.06±0.43）g/ L、（12.35±4.43）mg/L、（2.51±0.78）g/L高于健康對照組（0.95±0.35）g/L、（3.81±0.74）mg/L、（0.98±0.33）g/L，差異有統計學意義（t=11.5，10.4，13.2，P=0.00，0.00，0.00）；而兩組間IgA、補體C3、補體C4、KAP、LAM、KAP/LAM無統計學差異（P＞0.05），具體詳見表1。

3 討論

由于孕期機體免疫功能減低，孕婦中的GBS攜菌率較高。美國和北歐等國家孕婦攜菌率相似約5%～35%；而國內孕婦GBS攜菌率約2.4%～10.1%。各年齡攜菌率無明顯差異，但種族和地區的差異比較大，GBS的檢出率受較多因素的影響，例如采集的樣本質量、檢測時間、檢測方法等。妊娠婦女感染GBS的高危因素包括肥胖、多次妊娠、多個性伴侶等。

正常妊娠時，母體會產生維持妊娠的一種獨特型封閉抗體，利于胚胎著床、生長、發育和成熟，免受致敏淋巴細胞的攻擊[6]。本研究發現妊娠合并GBS感染時母體IgG水平明顯降低，提示IgG類封閉抗體減少，母胎間的免疫耐受破壞，從而引起異常免疫反應，出現胎膜早破、早產、流產等現象。GBS的主要致病因子包括莢膜多糖、溶血素等，可對孕產婦和新生兒造成嚴重后果[7]，但目前，關于妊娠合并GBS感染者血清免疫球蛋白變化的研究不多，有報道孕婦IgM水平低于非孕期婦女[8]，本研究發現妊娠合并GBS感染者IgG降低而IgM顯著性增高，可能與IgG減少導致IgM反應性增多有關，或是由GBS通過其致病因子引發免疫反應所致，另外，大分子IgM不能經尿液排出也會致其增高。

補體是存在于人體和動物血清、組織液，經活化具有酶活性的蛋白質，在細胞免疫和體液免疫介導的胎兒損傷中發揮重要作用[9]。CRP是一種急性時相蛋白，是獨立于年齡、體重指數、CD4淋巴細胞之外的預測因子，彭鳳梅[10]，張艷[11]通過多元回歸分析證實CRP水平與孕婦宮內感染相關，CRP升高可預測如GBS等的宮內感染，與本研究結論一致，孕婦出現GBS感染時，炎癥指標CRP會升高。β2-MG是一種低分子量蛋白質，正常人血中含量甚微，但若受病毒感染或腎臟早期損傷，血中β2-MG含量可升高[12]。唐永霞[13]報道β2-MG隨著孕周的增加而增高，但在32 周之后升高的比例不大。本研究顯示GBS感染的孕婦β2-MG水平會較正常孕婦升高，提示GBS感染后機體可能出現腎臟的早期損傷，由于GBS致病力較強，且孕婦GBS感染時機體出現體液免疫功能失衡。GBS的主要黏附作用是通過與宿主細胞的外基質蛋白結合，從而啟動細菌與宿主細胞表面整聯蛋白的相互作用，通過該途徑入侵細胞[14]。研究這些細胞間的相互作用及其相關蛋白，可為開發新的治療藥物提供科學依據。

綜上所述，我們有必要關注GBS陽性孕婦腎臟的情況，同時需要進一步擴大樣本量，并進行分子生物學、毒力學等方面的深入研究。