USP33在結直腸癌組織中的表達及與Wnt/β-catenin通路的關系

（義烏市中心醫院 肛腸外科，浙江 義烏322000）

結直腸癌的預后與分期關系密切，出現轉移的結直腸癌患者5年生存率較低，嚴重影響患者健康[1-2]。泛素特異性蛋白酶33（USP33）為泛素特異性蛋白酶家族成員之一，在多種惡性腫瘤中表達異常。其在惡性腫瘤的侵襲、遷移中發揮重要作用[3]，可通過多種信號通路參與惡性腫瘤的侵襲、遷移過程[4]。Wnt/β-catenin信號通路在結直腸癌的發生、發展中具有重要作用，抑制Wnt/β-catenin信號通路對結直腸癌具有抗癌作用[5-6]。本文對結直腸癌組織中USP33的表達及與Wnt/β-catenin通路的關系進行研究。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2015年1月—2017年12月義烏市中心醫院肛腸外科結直腸癌組織標本及對應的癌旁組織標本各90例。其中，男性55例，女性35例；平均年齡（61.25±4.56）歲；腫瘤直徑（2.37±1.34）cm；分化程度：低分化36例，中分化25例，高分化29例；Dukes分期：A期24例，B期23例，C期27例，D1期 16例 ；浸潤深度 ：≥T243例，＜T247例；有淋巴結轉移40例，無淋巴結轉移50例；肝轉移42例，無肝轉移48例。納入標準：所有患者行首次手術治療；經病理證實為結直腸癌。排除標準：術前行放化療等其他治療。本研究通過本院倫理委員會批準，患者簽署知情同意書。

1.2 方法

1.2.1 試劑兔抗人 USP33 多克隆抗體、鼠抗人USP33多克隆抗體、鼠抗人β-catenin多克隆抗體及鼠抗人C-myc多克隆抗體等購自美國Abcam公司，ECL購自美國Sigma公司。

1.2.2 免疫組織化學染色將結直腸癌組織和癌旁組織石蠟切片脫蠟至水，置微波爐加熱5 min修復抗原，用10%山羊血清封閉15 min，加入USP33、β-catenin及C-myc一抗（1∶400）過夜孵育。加入生物素標記二抗孵育1 h；加入辣根酶標記鏈霉卵白素孵育15 min，DAB顯色，蘇木精-伊紅染色，鹽酸酒精返藍，梯度酒精脫水；……