食管鱗狀細(xì)胞癌患者microRNA-127-3p的表達(dá)水平及臨床意義

符佳，汪砥，江金瓊，劉勁，段華新

（1.湖南省人民醫(yī)院 腫瘤科，湖南 長(zhǎng)沙 410005；2.長(zhǎng)沙市中心醫(yī)院 腫瘤科，湖南 長(zhǎng)沙 410004）

我國(guó)食管鱗狀細(xì)胞癌（esophageal squamous cell carcinoma,ESCC）發(fā)病率較高，嚴(yán)重威脅患者生命健康[1-2]。其發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，與諸多分子機(jī)制有關(guān)[3-5]。明確其發(fā)生、發(fā)展的分子機(jī)制，有利于ESCC早期診斷與靶向治療[6]。有研究表明，microRNA（miRNA）與胚胎發(fā)育、器官形成及腫瘤形成關(guān)系密切，其中miR-127-3p與乳腺癌、宮頸癌等腫瘤形成密切相關(guān)[7]。有研究表明SKI基因是miR-127-3p潛在的靶基因，但在ESCC中鮮有報(bào)道[8]。因此，本研究探討ESCC患者癌組織中miR-127-3p及SKI蛋白表達(dá)水平與腫瘤分期、患者預(yù)后的關(guān)系，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2013年2月—2015年2月于湖南省人民醫(yī)院和長(zhǎng)沙市中心醫(yī)院行外科手術(shù)的ESCC患者80例。其中，男性52例，女性28例；平均年齡（57.1±7.6）歲。患者均未合并影響生存的重大疾病，術(shù)中取適量切除的癌組織及癌旁組織（距癌組織≥5 cm正常食管上皮組織），放置于液氮中保存。ESCC診斷最終經(jīng)病理證實(shí)且分化程度明確。參照2009年第7版國(guó)際抗癌聯(lián)盟TNM分期標(biāo)準(zhǔn)[9]，其中Ⅰ期患者22例，Ⅱ期患者31例，Ⅲ期27例；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移21例，無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移59例。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，受試者均自愿簽署知情同意書，并對(duì)患者隨訪至2018年2月。

1.2 試劑與儀器

DMEM培養(yǎng)液（美國(guó)Gibco公司），0.25%胰酶（美國(guó)Invitrogen公司），ALP活性檢測(cè)試劑盒（南京建成生物工程有限公司），二氧化碳CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱（德國(guó)HeraeusHolding公司），Olympus倒置顯微系統(tǒng)（TH4-200，南京天龍光電儀器廠），實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)（quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR）儀（LightCycler480，德國(guó)羅氏診斷有限公司），TaqMan? MicroRNA Reverse Transcription Kit試劑盒（美國(guó)應(yīng)用生物系統(tǒng)公司）。

1.3 細(xì)胞復(fù)蘇及培養(yǎng)

本研究中使用的ESCC細(xì)胞株Eca109、Kyse150及正常食管上皮細(xì)胞Het-1a均購(gòu)自中國(guó)科學(xué)院上海細(xì)胞庫(kù)。……