自組裝短肽水凝膠RADA16-I在卵巢癌細(xì)胞培養(yǎng)中的應(yīng)用研究

高露瑤，蔡國徽，敖弟書，宋 鴻

(遵義醫(yī)科大學(xué) 微生物學(xué)教研室，貴州 遵義 563099)

近年來用于細(xì)胞三維培養(yǎng)的支架材料得到了迅速發(fā)展，一些生物聚合材料(PLLA、PLGA、PLLA-PLGA共聚物)及生物材料(膠原、藻酸鹽、瓊脂糖等)在細(xì)胞培養(yǎng)中得到了廣泛應(yīng)用[1-2]。然而，理想的細(xì)胞支架材料必須有明確的組份及其適合細(xì)胞生長的孔隙率，就此而言，離子型納米自組裝短肽的成份純凈、性能穩(wěn)定、無免疫原性且降解產(chǎn)物無毒，并具有較好的生物相容性及能自組裝形成納米級(jí)纖維網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)等特點(diǎn)，被視為理想的細(xì)胞培養(yǎng)基質(zhì)材料[3-5]。

目前，卵巢癌的病死率高居?jì)D科惡性腫瘤的首位，然而對(duì)卵巢癌的發(fā)病機(jī)理至今尚不明確[6]，限制了臨床對(duì)卵巢癌的診治，因此建立能模擬體內(nèi)卵巢癌細(xì)胞生長特點(diǎn)的培養(yǎng)模型，將促進(jìn)對(duì)卵巢癌發(fā)病機(jī)理的了解，同時(shí)也有利于臨床藥物的研發(fā)和篩選。本文擬構(gòu)建卵巢癌細(xì)胞A2780納米自組裝短肽水凝膠三維培養(yǎng)模型，為探索理想的卵巢癌體外實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ吞峁?shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料與儀器 人卵巢癌細(xì)胞系A(chǔ)2780購自南京賽博生物科技有限公司；RADA16-I([COCH3]-RADARADARADARADA-[CONH2])由上海波泰生物科技有限公司合成；Matrigel、I型膠原(Collagen I)購自美國BD公司；RPMI-1640培養(yǎng)基、胎牛血清購自美國Gibco公司；DNA熒光定量檢測試劑盒、鈣黃綠素AM、鬼筆環(huán)肽、DAPI均購自美國Sigma公司；活性氧檢測試劑盒購自碧云天生物技術(shù)研究所；其余抗體均購自英國Abcam公司。

CO2培養(yǎng)箱(3131型，美國Thermo公司)；熒光分光光度計(jì)(3001-1913型，美國Thermo公司)；熒光倒置熒光顯微鏡(IX71型，日本Olympus公司)；……