三葉青抗腫瘤作用研究進(jìn)展

黃明遠(yuǎn) 鄒強(qiáng)

摘要：三葉青為葡萄科崖爬藤屬植物，是我國傳統(tǒng)的中藥材，具有多種生物活性。肺癌、肝癌、乳腺癌均為臨床上常見的癌癥，藥理學(xué)研究表明三葉青醇提取物，萃取物均具有一定的腫瘤抑制作用。現(xiàn)就三葉青的抗腫瘤活性進(jìn)行綜述，為以后更好的利用開發(fā)這一植物資源和臨床抗腫瘤方面的應(yīng)用提供理論依據(jù)。

關(guān)鍵詞：三葉青;提取物;抗腫瘤

提起癌癥讓人們不寒而栗，一般人們所說的癌癥泛指所有的惡性腫瘤，癌癥是起源于上皮組織的惡性腫瘤。自上世紀(jì)來癌癥已經(jīng)成為人類的第二大類疾病，同時(shí)癌癥也被世界衛(wèi)生組織列為世界五大疑難雜癥之一。近年來我國的癌癥發(fā)病率一直表現(xiàn)出上升的一種狀態(tài)?，F(xiàn)在對惡性腫瘤的治療主要包括手術(shù)治療，但是對早期癌癥治療效果相對較好，對于晚期治療效果就不太好;化學(xué)治療主要是用化學(xué)藥品對腫瘤細(xì)胞生長起到抑制或者直接殺死，同時(shí)化學(xué)藥品也存在許多的缺點(diǎn)比如開發(fā)費(fèi)用較為昂貴而且它的毒副作用也是比較大的，同時(shí)伴隨不同程度的致突變毒性;目前中醫(yī)中藥治療越來越吸引大量的醫(yī)學(xué)研究者的目光，因?yàn)樗亩靖弊饔幂^小的而且促進(jìn)患者恢復(fù)，增強(qiáng)對放化療的耐受力。目前，報(bào)道的中草藥具有抗腫瘤作用的不在少數(shù)，其中就包括三葉青，同時(shí)它也是我國的珍貴的民間傳統(tǒng)天然藥食兩用植物，古典藥籍就有記載它的應(yīng)用廣泛，具有十分重要的價(jià)值，值得我們深入研究[1] 。

三葉青屬于葡萄科崖爬藤植物，中國特有的植物，主要分布在我國華南以及西南地區(qū)[2] 。同時(shí)三葉青也是我國老百姓家中常備的一種中草藥，因?yàn)楦鶕?jù)古典藥籍記錄三葉青可以用于一些熱毒病癥及溫毒并且具有比較好的藥效。據(jù)現(xiàn)代藥理學(xué)研究發(fā)現(xiàn)三葉青在抗腫瘤、抗炎、抗病毒和保肝等方面具有顯著的效果。通過查閱國內(nèi)外近年來有關(guān)于三葉青研究的相關(guān)的文獻(xiàn)，對三葉青的活性成分及其生理活性作用的研究進(jìn)行了總結(jié)。

1 三葉青抗腫瘤作用

1.1抑制肺癌

李禮斌等[3] 發(fā)現(xiàn)兩產(chǎn)地不同處理三清葉的乙醇提取物對肺癌細(xì)胞A549存在抑制效果，呈現(xiàn)劑量依賴性，常溫浸提后的來源于浙江的三青葉切片抑制腫瘤生長效果最佳。張祺箐等[4] 通過三葉青黃酮提取物對細(xì)胞進(jìn)行干預(yù)，觀察單核細(xì)胞分泌前列腺素E2、環(huán)氧化酶-2的情況，推測中藥三葉青具有逆轉(zhuǎn)腫瘤免疫抑制的作用。三葉青黃酮抗腫瘤作用與Treg 細(xì)胞生成及其CD152 表達(dá)有一定關(guān)系[5] 。研究表明三葉青中起到抑制腫瘤生長的作用的是黃酮類化合物[6] 。對荷瘤小鼠造模后，每日觀察小鼠生活狀態(tài)，采集相關(guān)數(shù)據(jù)，發(fā)現(xiàn)三葉青黃酮給藥組抑瘤率在44.3%-15.4%之間，明顯高于其他組。鐘良瑞[7] 采用MTT法研究三葉青黃酮對對肺癌A549細(xì)胞生長變化，與空白對照組比較，隨著黃酮含量的增加，腫瘤細(xì)胞數(shù)量明顯減少，呈現(xiàn)一定的濃度依賴性。

1.2乳腺癌

邱模昌[8] 對三葉青分別用三種溶劑進(jìn)行提取，觀察提取物在體外抗乳腺癌MCF-7細(xì)胞作用，采用流式細(xì)胞雙染色法進(jìn)行檢測，其中乙酸乙酯提取物對腫瘤細(xì)胞凋亡最明顯。郭菁菁[9] 探討了三葉青多糖對乳腺癌小鼠腫瘤生長的抑制作用的影響，可增強(qiáng)機(jī)體免疫功能，提高抗腫瘤免疫應(yīng)答，研究表明多糖提取物與免疫相關(guān)的T淋巴細(xì)胞有關(guān)。前期實(shí)驗(yàn)已經(jīng)得出三葉青水部位具有一定的抗腫瘤作用，現(xiàn)將水部分進(jìn)行分離得到6個(gè)不同組分，分別進(jìn)行活性篩選，對得到的化合物進(jìn)行純化分離，繪制藥物濃度對細(xì)胞增殖影響的曲線[10] 。

1.3結(jié)直腸

吳曉尉等[11] 采用MMT法觀察三葉青對結(jié)腸癌SW620細(xì)胞的抑制情況，不同濃度的三葉青提取物均可以使腫瘤細(xì)胞活性下降，當(dāng)濃度繼續(xù)增加時(shí)，抑制作用更明顯。以結(jié)腸癌HT29 細(xì)胞為腫瘤細(xì)胞模型，在小鼠腹腔注射乙酸乙酯提取物，連續(xù)給藥5天，與對照組進(jìn)行比較，觀察小鼠體重變化，及腫瘤抑制率[12] 。三葉青總黃酮對多種腫瘤具有較強(qiáng)的抑制作用。觀察三葉青總黃酮對SW620和TH29結(jié)腸癌細(xì)胞株的抑制作用，隨著作用時(shí)間增加，其抑制作用增強(qiáng)，在3.2、6.4mg/mL濃度下作用效果最佳[13-14]。

1.4肝癌

羅梅秀等[15] 對三葉青水提后用乙酸乙酯進(jìn)行萃取，得到萃取物進(jìn)行細(xì)胞凋亡實(shí)驗(yàn)，加藥后24小時(shí)，進(jìn)行檢測分析。隨著乙酸乙酯提取物的增加，肝癌細(xì)胞HepG2 增殖與凋亡發(fā)生變化，可明顯抑制HepG2 細(xì)胞增殖和誘導(dǎo)凋亡。大量臨床數(shù)據(jù)表明，三葉青具有抗肝癌作用，其中黃酮類化合物抗腫瘤活性最為明顯，隨著黃酮含量的逐漸增加，患有肝癌的小鼠中腫瘤細(xì)胞生長速率明顯下降，同時(shí)檢測HepG2 細(xì)胞凋亡率，也進(jìn)一步得到了證實(shí)[16] 。彭昕[17] 建立了三葉青萃取物抑制肝癌細(xì)胞HepG2生長的實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?，探究了不同濃度下乙酸乙酯部分對肝癌HepG2細(xì)胞周期的阻滯和凋亡誘導(dǎo)作用，為探究作用機(jī)制提供基礎(chǔ)。孫永[18] 采用不同極性有機(jī)溶劑分別對三葉青進(jìn)行提取，進(jìn)行細(xì)胞活性篩選出最佳提取物。進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)三葉青葉片酚類成分能夠抑制肝癌細(xì)胞 HepG2的增殖。

2作用機(jī)制

2.1誘導(dǎo)凋亡

對三葉青塊根經(jīng)乙酸乙酯提取濃縮，對不同濃度的乙酸乙酯提取物進(jìn)行PANC-1 細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)機(jī)制可能與上調(diào)p53 和Bax 的表達(dá)，下調(diào)Bcl-2 的表達(dá)有關(guān)，乙酸乙酯提取物能有效調(diào)節(jié)凋亡的相關(guān)基因[19] 。三葉青黃酮處理肺癌細(xì)胞A549 后，差異表達(dá)已知miRNA 靶基因KEGG 聚類，通過測序和富集分析，發(fā)現(xiàn)內(nèi)吞作用的異常表達(dá)與腫瘤細(xì)胞誘導(dǎo)凋亡密切關(guān)系[20] 。

2.2抑制腫瘤細(xì)胞增殖

惡性腫瘤中肺癌的存活率最低，研究表明在對三葉青黃酮處理24小時(shí)后，采用流式細(xì)胞分析儀分析細(xì)胞凋亡情況，發(fā)現(xiàn)可顯著抑制SPC-A-1細(xì)胞增殖，并誘導(dǎo)其凋亡[21] 。張勝強(qiáng)[22] 觀察不同黃酮濃度三葉青對EC9706 細(xì)胞的影響，隨著濃度的增加和作用時(shí)間的增加，細(xì)胞增長的速率明顯下降，乙酯作用越發(fā)明顯。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表明三葉青黃酮能明顯抑制增殖，降低細(xì)胞遷移和侵襲能力，與其下調(diào)Notch1 有關(guān)，可能是其抗食管癌的機(jī)制之一。

近年來，癌癥發(fā)病率越來越高，合成類藥物對治療惡性腫瘤效果并不是那么理想而且有一定的副作用，科學(xué)家把目光從合成類的藥物轉(zhuǎn)向天然產(chǎn)物類的藥物，從一些中藥成分中尋找毒副作用小且治療效果比較于合成類的藥物較好成為了科學(xué)家研究的重點(diǎn)。同時(shí)隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，不少學(xué)者利用體外細(xì)胞培養(yǎng)、色譜、核磁、紅外以及質(zhì)譜等方法對中草藥中的一些抗腫瘤化學(xué)成分進(jìn)行提取、結(jié)構(gòu)鑒定、活性評價(jià)的研究，同時(shí)對分離出來的活性化合物進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾得到副作用更小的，治療效果更好的新型化合物。

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作者簡介：

黃明遠(yuǎn)（1991.7-），男，漢族，籍貫：黑龍江哈爾濱人，沈陽科技學(xué)院，助教，碩士學(xué)位，專業(yè)：藥學(xué)，研究方向：天然產(chǎn)物活性成分研究

（作者單位：沈陽科技學(xué)院）